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[期刊] 水产学报  [作者] 周雯伊  黄海  尹绍武  齐鑫  张勇  刘晓春  陈国华  林浩然  
用肌肉注射HCG的处理方式(剂量为500 U/kg体重,每周注射1次,注射时间为6周)诱导雄性花鳗鲡性腺发育成熟,成熟率达80.0%。对人工催熟花鳗鲡精子的生物学特性研究结果表明:花鳗鲡精子头部长径为(3.81±0.69)μm,短径为(1.24±0.15)μm;尾部长度为(24.83±3.05)μm;精液pH为7.3~7.5,精子密度每毫升1.02×1010尾。精子的适宜盐度为15~20,其中盐度为15时,精子激活比率最高,快速运动时间以及精子的寿命最长。精子的pH适宜范围为6.0~8.0,pH值过高或过低都会影响精子的活力与寿命。另外,4种金属离子(Mg2+、Ca2+、Na+和K+)对花鳗鲡...
[期刊] 水产学报  [作者] 林浩然  齐鑫  周雯伊  尹绍武  黄海  张勇  刘晓春  陈国华  
采用多次肌肉注射黄体生成素释放激素(luteinizing hormone releasing hormone,LHRH-A2)和鲤脑垂体匀浆(carp pituitary extract,CPE)的方法诱导花鳗鲡卵巢发育成熟。在任意挑选的15尾实验组鱼中,5尾卵巢发育完全成熟,平均性腺系数(gonadosomatic index,GSI)为(20.9±5.04)%(最大达到27.3%);5尾卵巢发育至成熟期,平均GSI为(7.2±2.86)%;5尾卵巢发育至卵黄生成期,平均GSI为(2.32±1.5)%;而对照组的性腺停留在未发育的Ⅱ期[GSI为(1.18±0.39)%],这表明注射的激素能...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 邓岳松  林浩然  谢骏  潘德博  王广军  许梓荣  
:用含HCG及鲤脑垂体 (PG)匀浆液提取物 (CPE)的W /O/W复乳 ,对塘养雌鳗进行注射催熟实验。雌鳗平均GSI达 35.18% ,最高达 56.5% ,其催熟效果较常规注射方法 (平均GSI 2 7.9% ,最高 50 .4 % )好。用含LHRH A、HCG、CPE的复乳和DOM生理盐水混悬剂对部分达到性成熟的鳗鲡进行催产 ,用W /O/W复乳诱导成熟的鳗鲡 ,排卵率为 75% ;用常规方法催熟的鳗鲡排卵率为 55%。注射复乳制剂后 ,鳗鲡血清GtH含量可较长时间的保持较高水平 ,血清GtH的变化较常规注射方法缓和。注射乳剂还可使鳗鲡脑垂体GtH含量升高。
[期刊] 水产学报  [作者] 宋海霞  方琼珊  翁幼竹  王涵生  方永强  
用兔抗促黄体素生成素受体(LHR)或称绒毛膜促性腺激素受体(CGR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的抗体对LHR,ER和PR进行免疫组织化学定位。目的在于揭示外源性促性腺激素(鲤鱼脑垂体提取物,CPE和人绒毛膜促性腺激素,hCG)诱发日本鳗鲡卵子发生和卵母细胞成熟的内分泌机制。结果表明,注射激素前后卵巢发育和卵子发生出现了十分显著的变化。卵巢组织学切片观察显示激素处理前鳗鲡卵巢发育处于卵黄发生早期,卵母细胞平均直径(220±0.01)μm。第一次注射这两种激素后10d,实验组卵母细胞中卵黄核分散在核的周围,核仁数量显著增加,多达18~20个左右,而对照组8~10个。第3和4次激素处理...
[期刊] 水产学报  [作者] 谢骏  余德光  王广军  刘晓春  朱宏友  林浩然  
降海鳗鲡一直是作为研究鳗鲡人工繁殖的材料,由于降海鳗鲡的资源衰退,选用池塘养殖鳗鲡作为亲本的研究成为热点。尽管人工诱导野生降海鳗鲡获得的胚胎发育过程的研究已报道,但人工诱导池塘养殖鳗鲡的胚胎及仔鱼早期发育未见报道。本文应用池塘养殖日本鳗鲡取代野生降海日本鳗鲡进行人工繁殖,2002年的孵化批次共80次,其中大部分为人工授精卵(60次),一部分(20次)为自然产卵。受精率为(44.03±21.99)%,孵化率为(65.76±19.48)%,共计获得苗种349.9万尾。连续记录了鳗鲡的胚胎和早期仔鱼的发育过程。在水温为20.5℃时,胚胎发育需要时间为49h,所需积温1005℃.h;在水温为22.5℃...
[期刊] 水产学报  [作者] 林静  湛嘉  帅滇  王婷  王倩  王磊  俞雪钧  刘利平  
为分析成年花鳗鲡经多次注射鲤鱼脑垂体(carp pituitary extract,CPE,每周12 mg/kg)和人绒毛膜促性腺激素(h CG,每周300 IU/kg)后,卵巢发育成熟过程中6种性类固醇激素的含量及变化,实验采用超高效液相色谱—串联质谱(UPLC/MS/MS)联用方法对花鳗鲡性腺内这6种类固醇激素进行研究。结果发现,睾酮(testosterone,T)、孕酮(progesterone,P)、雌二醇(estradiol-17β,E2)、雌三醇(estriol,E3)、17α,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮(17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one,D...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 张洁明  柳凌  郭峰  张涛  
从人工诱导日本鳗鲡(Anguill japonica)性腺成熟的角度,采用对亲鳗群体外形和解剖观察,以及性腺组织切片的方法,对日本鳗鲡从下海鳗到性腺发育成熟的全过程进行了组织学和细胞学研究。结果表明,人工诱导的日本鳗鲡精巢发育仍可分为5个时相,即精原细胞前增殖期(Ⅰ);精原细胞后增殖期(Ⅱ),精母细胞生长期(Ⅲ),精子出现期(Ⅳ)和精子成熟期(Ⅴ)。除日本鳗鲡下海鳗的精巢有73.3%的个体处在第Ⅰ时相外,其整个精巢的发育过程和细胞学特征与以前的研究无太大差异。在下海鳗群体中未观察到第Ⅰ时相的卵巢。因此,人工诱导日本鳗鲡的卵巢发育只有卵母细胞单层滤泡期(Ⅱ);脂肪泡出现期(Ⅲ);卵黄充满期(Ⅳ)...
[期刊] 水产学报  [作者] 方琼珊  翁幼竹  刘志刚  王涵生  方永强  
用兔抗血清对抗促黄体素生成素受体(LHR)或称绒毛膜促性腺激素受体(CGR)和雄激素受体(AR)进行LHR和AR免疫组织化学定位,以揭示外源性促性腺激素(鲤脑垂体激素和hCG)诱发日本鳗鲡精子发生及其内分泌机制。结果表明,经过注射激素处理后的实验组与注射前的对照组相比较,其精巢发育和精子发生出现十分显著的变化。组织学切片观察显示,激素处理前鳗鲡精巢处于精原细胞增殖期,而两种激素混合注射后第10天,实验组可见精小叶中精原细胞的有丝分裂和初级与次级精母细胞的数量显著的增加。注射后第35天,靠近生殖上皮除有少量精原细胞外,精小叶中有大量初级精母细胞和次级精母细胞和少数精子细胞以及管腔中存在少量精子。...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 蒲金成  湛嘉  刘登攀  杜力  黎原谷  刘利平  
[期刊] 水产学报  [作者] 柳凌  张洁明  郭峰  张涛  
在多年对日本鳗鲡人工育苗技术研究的基础上,通过采用对胚胎和早期仔鱼的活体观察、计算机图文分析以及组织切片等方法,系统研究了鳗鲡胚胎及孵化后19d前仔鱼的生物学特性。研究结果表明,在水温(23±0.5)℃条件下,日本鳗鲡从受精卵到仔鱼出膜需约38h30min,总积温为885.50℃·h。其特征与一般硬骨鱼类胚胎发育基本相同,鳗鲡胚胎发育可分为14期,为典型的盘状卵裂,原肠作用通过细胞的下包和内卷完成。但日本鳗鲡早期仔鱼与一般硬骨鱼类的仔鱼存在较大差异,表现为无色透明的血细胞和S形心管;开放型的口腔,发达且不能闭合的上下颌和3对颌齿;孵化后3~9d在身体两侧出现由神经细胞和支持细胞构成发达的感觉丘...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 柳凌  郭峰  张洁明  鲁大椿  
对日本鳗鲡(Anguillajaponica)卵巢发育的时间与催产率的关系进行研究,对卵母细胞在体内胚泡破裂(GVBD)的发生过程、以及用17α-OHP和17α,20β-DHP诱导日本鳗鲡排卵的方式、时机和催产效果进行观察,结果表明,卵巢发育时间越长,催产率越低。造成催产率低的原因主要是由于日本鳗鲡在卵母细胞成熟后期,雌鳗个体对催产药物敏感性差异较大,催产时机难以掌握。通过采用适合日本鳗鲡卵母细胞的透明液观察GVBD的发生过程,并根据每个个体GVBD的发生速度,制订适宜的催产方案基本解决了上述难题。本实验采用CP、HCG、17α-OHP或17α,20β-DHP混合催产,使其平均催产率由35 4...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 温海深  林浩然  
综述促性腺素释放激素类似物 (GnRH a)缓释制剂 (SRDS)、人绒毛膜促性腺激素 (HCG)SRDS、类固醇激素SRDS :雄烯二酮 (ADSD)和 17α 甲基睾丸酮 (MT)以及鲤垂体匀浆 (CPE)混合SRDS诱导海水养殖鱼类性腺发育成熟和生殖行为的效果。认为采用GnRH aSRDS处理性腺发育良好的鲈形目鱼类和鲆鲽鱼类 ,可以显著提高血液促性腺激素 (GtH)水平 ,且持续时间长 ,诱导排卵成功 ;HCG乳胶SRDS可诱导日本鳗鲡 (Anguilajaponicus)血液GtH持续升高 ,性成熟系数明显升高并且性腺发育成熟 ;HCG和CPE水 /油 /水 (W /O/W )复乳S...
[期刊] 水产学报  [作者] 杨金先  陈强  李英英  宋铁英  葛均青  
为了明确鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus, AngHV)的生物学及理化特性,利用一株从欧洲鳗鲡“脱黏败血综合征”病料中分离的AngHV病毒株研究了其增殖特性及其对主要鱼类细胞系的感染敏感性,进一步分析了其对热、酸碱、氯仿和乙醚等理化因子的耐受性。结果发现,AngHV感染的鳗鲡卵巢细胞系(Eel ovary, EO)内可见许多典型的疱疹病毒样颗粒,细胞出现时序性细胞病变; AngHV可在EO细胞系内稳定传代,较适宜扩繁温度为25 ℃~27 ℃,而不能在鲤上皮瘤细胞系(Epithelioma papilloma cyprinid cell , EPC)、草鱼卵巢细胞系 (Grass carp ovary cell, CO)、胖头鱥肌肉细胞系 (Fathead monow cell, FHM)、大鳞大麻哈鱼胚胎细胞系(Chinook salmon embryo cell, CHSE-214)、虹鳟性腺细胞系(Rainbow trout gonad cell, RTG-2)、蓝鳃太阳鱼细胞系(Bluegill fry cell, BF-2)等鱼类细胞内增殖;理化特性分析表明,37℃处理30 min,AngHV滴度降低不明显,而56 ℃处理30 min可完全灭活AngHV;AngHV对酸(pH 3.0)敏感,而对碱(pH 10.0)较耐受,且对氯仿和乙醚敏感。本研究结果可为AngHV病的综合防控及疫苗的开发提供参考依据。
[期刊] 水产学报  [作者] 张利红  张为民  林浩然  
采用间隔 15d多次埋植雄激素雄烯二酮 (4 androstene 3 ,17 dine ,ADSD)或甲基睾酮 (17α methyl testosterone ,MT)诱导雌性日本鳗鲡 (Anguillajaponica)性腺发育成熟 ;并着重研究埋植雄激素后 ,雌鳗血清中促性腺激素 (GtH)及脑和垂体中哺乳类促性腺激素释放激素 (mGnRH)含量的动态变化。一次或多次埋植ADSD后 ,1~ 5d的血清GtH含量上升 ,然后下降 ;并且 ,血清GtH含量上升的幅度随埋植次数的增加而增加 ;对于MT处理组 ,只在埋植 7次后第 15天测得血清GtH水平显著高于对照组 ,但仍显著低于ADS...
[期刊] 水产学报  [作者] 何智  李依雪  张碧鱼  张为民  张利红  
为探讨黄鳝卵巢发育规律,观察了实验室养殖条件下黄鳝卵巢初次性成熟过程,采用定量PCR分析了gdf 9(growth differentiation factor 9)、cyp19a1a(P-450 aromatase)、amh(anti-Müllerian hormone)和amhrII(anti-Müllerian hormone type II receptor)基因表达水平。结果显示,4至9月龄黄鳝卵巢中卵母细胞处于初级生长期,胞质中嗜碱性巴尔比尼小体数量先增后减,形状由点变为大团块状,后又缩小。10月龄时,黄鳝卵巢青春期启动,进入次级生长期;部分卵母细胞出现皮质小泡,巴尔比尼小体消失或...
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