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[期刊] 水产学报  [作者] 林浩然  齐鑫  周雯伊  尹绍武  黄海  张勇  刘晓春  陈国华  
采用多次肌肉注射黄体生成素释放激素(luteinizing hormone releasing hormone,LHRH-A2)和鲤脑垂体匀浆(carp pituitary extract,CPE)的方法诱导花鳗鲡卵巢发育成熟。在任意挑选的15尾实验组鱼中,5尾卵巢发育完全成熟,平均性腺系数(gonadosomatic index,GSI)为(20.9±5.04)%(最大达到27.3%);5尾卵巢发育至成熟期,平均GSI为(7.2±2.86)%;5尾卵巢发育至卵黄生成期,平均GSI为(2.32±1.5)%;而对照组的性腺停留在未发育的Ⅱ期[GSI为(1.18±0.39)%],这表明注射的激素能...
[期刊] 水产学报  [作者] 宋海霞  方琼珊  翁幼竹  王涵生  方永强  
用兔抗促黄体素生成素受体(LHR)或称绒毛膜促性腺激素受体(CGR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的抗体对LHR,ER和PR进行免疫组织化学定位。目的在于揭示外源性促性腺激素(鲤鱼脑垂体提取物,CPE和人绒毛膜促性腺激素,hCG)诱发日本鳗鲡卵子发生和卵母细胞成熟的内分泌机制。结果表明,注射激素前后卵巢发育和卵子发生出现了十分显著的变化。卵巢组织学切片观察显示激素处理前鳗鲡卵巢发育处于卵黄发生早期,卵母细胞平均直径(220±0.01)μm。第一次注射这两种激素后10d,实验组卵母细胞中卵黄核分散在核的周围,核仁数量显著增加,多达18~20个左右,而对照组8~10个。第3和4次激素处理...
[期刊] 水产学报  [作者] 周雯伊  黄海  尹绍武  齐鑫  张勇  刘晓春  陈国华  林浩然  
用肌肉注射HCG的处理方式(剂量为500 U/kg体重,每周注射1次,注射时间为6周)诱导雄性花鳗鲡性腺发育成熟,成熟率达80.0%。对人工催熟花鳗鲡精子的生物学特性研究结果表明:花鳗鲡精子头部长径为(3.81±0.69)μm,短径为(1.24±0.15)μm;尾部长度为(24.83±3.05)μm;精液pH为7.3~7.5,精子密度每毫升1.02×1010尾。精子的适宜盐度为15~20,其中盐度为15时,精子激活比率最高,快速运动时间以及精子的寿命最长。精子的pH适宜范围为6.0~8.0,pH值过高或过低都会影响精子的活力与寿命。另外,4种金属离子(Mg2+、Ca2+、Na+和K+)对花鳗鲡...
[期刊] 水产学报  [作者] 林静  湛嘉  帅滇  王婷  王倩  王磊  俞雪钧  刘利平  
为分析成年花鳗鲡经多次注射鲤鱼脑垂体(carp pituitary extract,CPE,每周12 mg/kg)和人绒毛膜促性腺激素(h CG,每周300 IU/kg)后,卵巢发育成熟过程中6种性类固醇激素的含量及变化,实验采用超高效液相色谱—串联质谱(UPLC/MS/MS)联用方法对花鳗鲡性腺内这6种类固醇激素进行研究。结果发现,睾酮(testosterone,T)、孕酮(progesterone,P)、雌二醇(estradiol-17β,E2)、雌三醇(estriol,E3)、17α,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮(17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one,D...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 邓岳松  林浩然  谢骏  潘德博  王广军  许梓荣  
:用含HCG及鲤脑垂体 (PG)匀浆液提取物 (CPE)的W /O/W复乳 ,对塘养雌鳗进行注射催熟实验。雌鳗平均GSI达 35.18% ,最高达 56.5% ,其催熟效果较常规注射方法 (平均GSI 2 7.9% ,最高 50 .4 % )好。用含LHRH A、HCG、CPE的复乳和DOM生理盐水混悬剂对部分达到性成熟的鳗鲡进行催产 ,用W /O/W复乳诱导成熟的鳗鲡 ,排卵率为 75% ;用常规方法催熟的鳗鲡排卵率为 55%。注射复乳制剂后 ,鳗鲡血清GtH含量可较长时间的保持较高水平 ,血清GtH的变化较常规注射方法缓和。注射乳剂还可使鳗鲡脑垂体GtH含量升高。
[期刊] 水产学报  [作者] 谢骏  余德光  王广军  刘晓春  朱宏友  林浩然  
降海鳗鲡一直是作为研究鳗鲡人工繁殖的材料,由于降海鳗鲡的资源衰退,选用池塘养殖鳗鲡作为亲本的研究成为热点。尽管人工诱导野生降海鳗鲡获得的胚胎发育过程的研究已报道,但人工诱导池塘养殖鳗鲡的胚胎及仔鱼早期发育未见报道。本文应用池塘养殖日本鳗鲡取代野生降海日本鳗鲡进行人工繁殖,2002年的孵化批次共80次,其中大部分为人工授精卵(60次),一部分(20次)为自然产卵。受精率为(44.03±21.99)%,孵化率为(65.76±19.48)%,共计获得苗种349.9万尾。连续记录了鳗鲡的胚胎和早期仔鱼的发育过程。在水温为20.5℃时,胚胎发育需要时间为49h,所需积温1005℃.h;在水温为22.5℃...
[期刊] 水产学报  [作者] 方琼珊  翁幼竹  刘志刚  王涵生  方永强  
用兔抗血清对抗促黄体素生成素受体(LHR)或称绒毛膜促性腺激素受体(CGR)和雄激素受体(AR)进行LHR和AR免疫组织化学定位,以揭示外源性促性腺激素(鲤脑垂体激素和hCG)诱发日本鳗鲡精子发生及其内分泌机制。结果表明,经过注射激素处理后的实验组与注射前的对照组相比较,其精巢发育和精子发生出现十分显著的变化。组织学切片观察显示,激素处理前鳗鲡精巢处于精原细胞增殖期,而两种激素混合注射后第10天,实验组可见精小叶中精原细胞的有丝分裂和初级与次级精母细胞的数量显著的增加。注射后第35天,靠近生殖上皮除有少量精原细胞外,精小叶中有大量初级精母细胞和次级精母细胞和少数精子细胞以及管腔中存在少量精子。...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 蒲金成  湛嘉  刘登攀  杜力  黎原谷  刘利平  
[期刊] 水产学报  [作者] 何智  李依雪  张碧鱼  张为民  张利红  
为探讨黄鳝卵巢发育规律,观察了实验室养殖条件下黄鳝卵巢初次性成熟过程,采用定量PCR分析了gdf 9(growth differentiation factor 9)、cyp19a1a(P-450 aromatase)、amh(anti-Müllerian hormone)和amhrII(anti-Müllerian hormone type II receptor)基因表达水平。结果显示,4至9月龄黄鳝卵巢中卵母细胞处于初级生长期,胞质中嗜碱性巴尔比尼小体数量先增后减,形状由点变为大团块状,后又缩小。10月龄时,黄鳝卵巢青春期启动,进入次级生长期;部分卵母细胞出现皮质小泡,巴尔比尼小体消失或...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 温海深  林浩然  
综述促性腺素释放激素类似物 (GnRH a)缓释制剂 (SRDS)、人绒毛膜促性腺激素 (HCG)SRDS、类固醇激素SRDS :雄烯二酮 (ADSD)和 17α 甲基睾丸酮 (MT)以及鲤垂体匀浆 (CPE)混合SRDS诱导海水养殖鱼类性腺发育成熟和生殖行为的效果。认为采用GnRH aSRDS处理性腺发育良好的鲈形目鱼类和鲆鲽鱼类 ,可以显著提高血液促性腺激素 (GtH)水平 ,且持续时间长 ,诱导排卵成功 ;HCG乳胶SRDS可诱导日本鳗鲡 (Anguilajaponicus)血液GtH持续升高 ,性成熟系数明显升高并且性腺发育成熟 ;HCG和CPE水 /油 /水 (W /O/W )复乳S...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 张洁明  柳凌  郭峰  张涛  
从人工诱导日本鳗鲡(Anguill japonica)性腺成熟的角度,采用对亲鳗群体外形和解剖观察,以及性腺组织切片的方法,对日本鳗鲡从下海鳗到性腺发育成熟的全过程进行了组织学和细胞学研究。结果表明,人工诱导的日本鳗鲡精巢发育仍可分为5个时相,即精原细胞前增殖期(Ⅰ);精原细胞后增殖期(Ⅱ),精母细胞生长期(Ⅲ),精子出现期(Ⅳ)和精子成熟期(Ⅴ)。除日本鳗鲡下海鳗的精巢有73.3%的个体处在第Ⅰ时相外,其整个精巢的发育过程和细胞学特征与以前的研究无太大差异。在下海鳗群体中未观察到第Ⅰ时相的卵巢。因此,人工诱导日本鳗鲡的卵巢发育只有卵母细胞单层滤泡期(Ⅱ);脂肪泡出现期(Ⅲ);卵黄充满期(Ⅳ)...
[期刊] 水产学报  [作者] 王桂香   李慷   刘如聪   姜之信   巴旭冰   宋宗诚   刘利平  
星康吉鳗(Conger myriaster)是我国东海等近海常见鱼类,但随着过度捕捞和海洋环境的污染,星康吉鳗野生资源面临枯竭的风险,然而目前对于星康吉鳗繁殖的研究较少,缺乏星康吉鳗卵巢发育过程中的脂质需求的研究,因此本研究对人工诱导星康吉鳗卵巢发育组织脂质代谢进行了分析,以期为星康吉鳗人工繁殖提供理论基础。本研究使用超高效液相色谱四极杆轨道阱质谱(UHPLC/Q-Orbitrap MS)对人工诱导星康吉鳗卵巢发育不同时期肝脏、卵巢、肌肉和血浆进行了脂质组学分析,并测定了肝脏代谢酶活。通过对不同发育阶段星康吉鳗组织脂质成分分析,在肝脏、肌肉、卵巢和血浆中各鉴定出68、27、63和212种脂质标志物,主要包括磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)、甘油三酯(TG)和鞘磷脂(SM)等。四种组织中TG、甘油二酯(DG)和神经酰胺(Cer)等脂类物质在发育过程中呈现出不同的变化趋势。肝脏代谢中,脂肪酸合成酶、肝脂酶和脂蛋白脂酶浓度呈现先升高后降低的过程,主要参与了TG、磷脂和脂肪酸的代谢。结果表明,星康吉鳗卵巢发育过程中主要组织的TG、磷脂发生了不同程度的变化,脂质代谢相关酶活性变化也与脂质代谢特征相对应。本实验初步探究了星康吉鳗卵巢发育过程中主要组织脂质调动情况,为星康吉鳗人工繁殖和可持续发展提供基础的参考。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 李晓龙  李慷  汝高盟  江兴龙  刘利平  
通过分析星康吉鳗人工催熟过程中其外表形态、性腺发育和性类固醇激素含量的变化关系,以期为星康吉鳗的人工繁殖提供数据支撑。实验共收集野生星康吉鳗105尾(288.30±62.34 g),分为对照组和3个激素注射组:实验组A (CPE: 2 mg/kg),实验组B (HCG: 200 IU/kg)和实验组C (CPE: 1mg/kg和HCG: 100 IU/kg)。每周进行一次激素注射,一共注射12次激素,对照组不做处理。结果表明,实验组C亲鱼卵母细胞发育至细胞核移位阶段,实验组C中星康吉鳗性腺发育状态最佳。完成12次激素注射后,所有的实验组星康吉鳗卵母细胞发育均达到Ⅲ期,而对照组卵母细胞发育仍停滞在第Ⅱ期。通过对类固醇激素进行ELISA检测表明,在第12次注射后,实验组C星康吉鳗性腺中睾酮含量[(217±31.76) ng/g]显著高于对照组[(123.24±21.05) ng/g]。与对照组相比,注射激素实验组星康吉鳗性腺中17α-羟基孕酮含量呈现缓慢上升趋势。至实验结束时,CPE和HCG组合激素注射的星康吉鳗性腺发育到第Ⅴ期。综上所述,CPE+HCG能够有效的促进星康吉鳗的性腺发育,可作为首选催熟激素用于星康吉鳗的人工繁殖研究。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 帅滇  张利娜  蒲金成  唐肖峰  刘利平  
通过组织切片和电子显微镜观察经多次注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)和鲤鱼脑垂体匀浆液(carp pituitary extract,CPE)促熟的雄性鳗鲡(Anguilla japonica)精巢和脑垂体超微结构的变化,并采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC/MS/MS)联用的方法,观察性腺和血液中7种类固醇激素含量的变化。结果发现:成熟组鳗鲡精巢发育至第Ⅴ期,排精10 d时鳗鲡精巢进入退化吸收期。性成熟雄性鳗鲡的脑垂体GtH分泌细胞代谢活动旺盛
[期刊] 中国水产科学  [作者] 柳凌  郭峰  张洁明  鲁大椿  
对日本鳗鲡(Anguillajaponica)卵巢发育的时间与催产率的关系进行研究,对卵母细胞在体内胚泡破裂(GVBD)的发生过程、以及用17α-OHP和17α,20β-DHP诱导日本鳗鲡排卵的方式、时机和催产效果进行观察,结果表明,卵巢发育时间越长,催产率越低。造成催产率低的原因主要是由于日本鳗鲡在卵母细胞成熟后期,雌鳗个体对催产药物敏感性差异较大,催产时机难以掌握。通过采用适合日本鳗鲡卵母细胞的透明液观察GVBD的发生过程,并根据每个个体GVBD的发生速度,制订适宜的催产方案基本解决了上述难题。本实验采用CP、HCG、17α-OHP或17α,20β-DHP混合催产,使其平均催产率由35 4...
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