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[期刊] 西南农业学报  [作者] 姜世丹  李璐茜  潘俊  唐美玲  朱泽娇  胡瑜  李益盛  曲媛  
【目的】比较6种不同人参属药材提取物的体内外抗炎活性差异,并探讨其抗炎活性机制。【方法】采用CCK-8法检测RAW264.7细胞活力,Griess法检测NO释放,ELISA法检测细胞分泌炎症因子情况,Western blot法检测NF-κB信号通路中关键蛋白表达情况。采用二甲苯所致小鼠耳肿胀模型,检测耳肿胀度及HE染色的病理切片情况。【结果】在给药浓度为0.02、0.20 mg/mL时,6种人参属药材提取物对RAW264.7细胞活力无显著抑制作用(P>0.05)。6种人参属药材提取物在0.2 mg/mL浓度下均显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞上清液中NO含量的升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001),其中屏边三七抑制作用最强。与LPS组相比,6种人参属药材提取物均显著降低细胞分泌的TNF-α含量(P<0.01或P<0.001)。屏边三七组和竹节参组均显著逆转LPS诱导的细胞中p-NF-κB、IκBα蛋白表达量的升高;而珠子参组和竹节参组均显著抑制NF-κB蛋白表达。此外,6种人参属药材提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀具有剂量依赖性抑制作用,其中屏边三七组、三七组、西洋参组及竹节参组对小鼠耳肿胀的抑制率分别为91.11%、68.89%、82.22%、64.44%。小鼠耳组织HE染色结果表明,模型组小鼠耳组织出现明显结缔组织水肿,间隙增加及炎性细胞浸润。6种人参属药材提取物组与模型组相比水肿反应和炎性细胞浸润减少,其中屏边三七改善效果最好。【结论】6种人参属药材具有体内外抗炎作用,且活性存在差异,其机制作用可能与调节NF-κB信号通路相关。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 周洋  郑文燕  胡帝宇  童智子  蒋松宏  王怡丹  
含半胱天冬酶募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白3(caspase recruitment domain and membrane-associated guanylate kinase-like domain protein 3,CARMA3)属于CARMA家族,是一个新型的骨架蛋白。CARMA3通过调控NF-κB信号通路的激活,影响细胞的周期进程、增殖和信号转导,从而影响癌症的发生和细胞应答。论文介绍了NF-κB信号通路的激活过程、G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)的配体、DNA损伤和感染可激活CARMA3介导的NF-κB信号通路、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的活性水平受CARMA3介导的NF-κB信号通路的影响、A20负调控CARMA3介导的NF-κB信号通路,以及CARMA3与癌症发生的关联,旨在为基于NF-κB信号通路的细胞周期进程、增殖和细胞应答方面的研究提供参考。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王华夏  顾峰  廖瑛  茅翔  丁铲  范红结  
[目的]本文旨在探究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染过程中细胞因子显著上调的机制。[方法]NDV感染He La细胞,用RT-PCR法检测IFN-β、IL-6、IL-8 mRNA水平。Western blot分析和免疫荧光分析检测NDV对双链RNA激活的蛋白激酶(PKR)与NF-κB信号通路的影响。[结果]与未感染组相比,IFN-β、IL-6、IL-8 mRNA水平显著上调。NF-κB信号通路在感染后1224 h被激活,转录因子p65入核,而使用NF-κB信号通路抑制
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 白贵斌  王媛  燕超  刘晓明  李勇  
【目的】探讨在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染小鼠早期,其肺脏上皮细胞中NF-κB和p53信号通路参与机体的免疫调控作用。【方法】将C57BL/6 Cnc小鼠30只(雄、雌各15只),按5只/组设空白对照组、阴性对照组(腹腔注射生理盐水)和MTB感染组(腹腔注射牛结核分枝杆菌减毒株(卡介苗,BCG)),感染4 d后经安乐死处死小鼠,摘取小鼠肺脏和脾脏进行形态学观察;将小鼠肺脏进行冰冻超薄切片,HE染色分析其肺脏病理变化;利用免疫组织荧光技术和激光共聚焦显微镜,标记SP-C阳性肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的位置,观察NF-κB和p53蛋白在肺泡上皮细胞中的表达情况。提取小鼠肺脏组织细胞总蛋白,以β-actin为内参,通过Western blot分析NF-κB和p53信号通路相关因子TLR4、TRAF6、NF-κB、p53、MDM2和CBP在蛋白水平上的变化。【结果】在MTB感染小鼠4 d后,小鼠肺脏形态无明显变化,脾脏1/3尖部瘀血变黑;HE染色发现肺脏组织炎性细胞浸润。在小鼠肺脏上皮细胞中NF-κB与p53蛋白免疫荧光表达较空白对照组和阴性对照组增强。TLR4、NF-κB、p53、MDM2和CBP蛋白在雄性与雌性小鼠中都呈现出显著上调。【结论】当结核分枝杆菌感染小鼠时,小鼠肺脏上皮细胞通过NF-κB和p53信号通路活化来参与宿主抗结核分枝杆菌病感染的免疫调控作用。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 黄敏  程珂  马春松  王猛  王春芳  
为探究6-姜烯酚对鱼类的免疫调节作用,用不同浓度的6-姜烯酚孵育斑马鱼肝脏细胞48 h后,检测其生长率、胞内活性氧(ROS)水平、抗氧化酶活性,并进行抗炎、抗氧化基因表达量的检测。结果显示:高浓度的6-姜烯酚抑制肝脏细胞的增殖(P<0.05),而活性氧ROS和脂质过氧化产物MDA含量最低(P
[期刊] 水产学报  [作者] 冯伟  李健  李吉涛  陈萍  廖梅杰  
为了解Vc的免疫机制,以中国对虾为实验动物,对其投喂添加不同Vc含量(0%、0.5%、1%、2%)的饲料,进行存活率、iNOS、CAT、LZM酶活性及TLR、NF-κB表达水平的比较。结果发现:(1)饲喂Vc的不同处理组提高了中国对虾的存活率、iNOS、CAT及LZM活性,其中1%添加组存活率达90.28%,显著高于其他组。(2)Vc可以调节TLR、NF-κB在血清及鳃中的表达水平。1%添加组血清、鳃中TLR的表达水平相对于各自的对照组表现出显著性差异(P<0.05)。TLR、NF-κB在组织中的表达趋势并不一致。1%组血清中NF-κB的表达水平高于对照组,其他两组的表达水平始终位于对照组之下...
[期刊] 价格理论与实践  [作者] 原静  冯晓涛  邓绍勇  王美霞  李康琴  
为分析近期中药材市场价格总体上扬现象的本质,了解新冠肺炎疫情对中药材价格波动的影响情况,本文在分析近两年中药材价格涨跌情况的基础上,基于灰色关联度排序和相关性分析等方法对2020年1月至2022年1月共25个月度中药材价格数据进行实证分析。研究结果表明:与新冠新增确诊人数呈正相关的多为清热类药材和止咳化痰平喘类药材,部分如金银花、板蓝根、连翘等清热解毒类中药材的价格波动受新冠肺炎疫情影响最大。然而,中药材综合价格指数的波动与新冠新增确诊人数变化之间的相关性并不显著,表明中药材市场价格总体波动情况受新冠肺炎疫情影响有限。应继承好传统中药,并创新发展利用;鼓励人工种植中药材,实现科学合理可持续利用;加强政府部门的统筹规划,保障中药材产业良性发展。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 段滇宁  郭华  李晓琳  陈萌萌  张亚群  韩俊源  张书霞  
选取8头猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)血清抗原、抗体阴性的普通断奶仔猪,无菌取其脾脏制成单细胞悬液后,随机分为4组:对照组、NF-κB抑制剂组(抑制剂组)、PCV2组和NF-κB抑制剂-PCV2组(抑制剂-PCV2组),体外培养24 h后收获淋巴细胞及培养上清液。ELISA方法检测培养上清液中IL-4和IL-12的含量;间接免疫荧光定位检测PCV2感染淋巴细胞的情况和核因子κB(NF-κB)蛋白入核情况,Western blot定量检测细胞浆中髓样分化因子88(MyD88)、磷酸化抑制性核因子кB(p-IкB)及NF-κB/p65和细胞核中NF-κB/p65蛋...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 顾忠盈  张孝羲  耿济国  
在5种温度(22,24,26,30,32℃),76%相对湿度条件下,组建药材甲实验种群生命表.结果表明,温度与发育速率呈逻辑斯谛曲线关系,32℃时雌雄虫发育均最快,世代发育起点温度为12.0℃;卵的孵化率和幼虫、蛹、世代存活率均以26℃为最高,温度与世代存活率呈显著的抛物线型关系;24℃时成虫产卵量最高,环境温度在26.1℃时理论种群增长指数最大(7.43);组建特定时间繁殖生命表,内禀增长力(r_m)在26℃时最大(0.029).
[期刊] 水产学报  [作者] 周泽斌  丁少青  程沛茹  任建峰  李伟明  张庆华  
核转录因子NF-κB (nuclear factor kappa B)对机体的免疫反应、炎症反应等起重要的调控作用。为了获得NF-κB基因启动子的活性报告基因,进一步研究原始脊椎动物免疫应答的机制,我们根据此前克隆得到的东北七鳃鳗NF-κB基因的编码序列 (coding sequence,CDS),以与东北七鳃鳗高度同源的日本七鳃鳗同源基因 5’上游启动子特征序列为模板设计引物,克隆获得了东北七鳃鳗NF-κB启动子序列,该序列全长3 169 bp,提交至NCBI 数据库Genbank获得登录号MN368861。经AliBaba2.1软件预测该序列包含CREB (cgtgacttca)、Oct-1 (aatatgaatt)、GATA-1 (gaacctatct)、AP-1 (ggttgagtca)、NF-kappa B (ctttcctgtt)、IRF-1 (tttcctgttc)、Sp-1 (tgtgaggggt)、c-Jun (acgtgacttc)和c-Fos (ggttgagtca) 等多个转录因子结合位点,并包含TATA box转录核心元件。通过MethPrimer软件预测在序列1 207-1 402 bp处存在CG含量大于50%,长196 bp的CpG岛。利用双酶切技术构建了pGL3-NF-κB-pro重组质粒,并将其转染至人胚肾细胞(human embryonal kidney, HEK293T)和鲤上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprinid, EPC)中。双荧光素酶报告基因系统检测结果显示该片段序列在哺乳动物细胞系和鱼类细胞系中均具有启动子活性,同时在HEK293T中经过Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)的配体LPS刺激后启动子活性显著上升。本研究成功构建了东北七鳃鳗NF-κB启动子报告基因,并在不同细胞系中证实了其活性。LPS刺激后的检测结果揭示东北七鳃鳗NF-κB参与了TLR信号通路的免疫应答。东北七鳃鳗NF-κB报告基因的构建为探究原始脊椎动物免疫系统信号传导机制奠定了基础。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 陈彩霞  李艾莲  谢赛萍  
为探讨延胡索种茎分级与药材产量和质量的关系,通过相关分析、主成分分析确定延胡索种茎的分级指标,利用K-均值聚类分析将32份延胡索材料分为3级。以各等级种茎为处理连续2年进行田间对比试验,于生长期测定延胡索植株的生长指标、光合效率及产量参数,收获后室内测定延胡索药材有效成分含量,确定净度和最大直径为延胡索种茎的分级指标,初步确立了延胡索种茎的质量分级标准。结果表明:其中Ⅰ级延胡索种茎,净度≥98%,直径≥1.85cm;Ⅱ级延胡索种茎,净度≥95%,种苗直径≥1.50cm;Ⅲ级延胡索种茎,净度≥92%,种苗直
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张秀娟  孙运  郭华  张书霞  
选取31头经检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原和抗体均为阴性的5周龄断奶仔猪,随机分为对照组16头和试验组15头,对照组仔猪每头滴鼻4 mL PBS,试验组仔猪每头滴鼻4 mL 5×105TCID50.mL-1PCV2悬液。于PCV2接种当天剖杀4头仔猪作为对照组,分别于14、21和35 d剖杀4头对照组和5头试验组仔猪,采集肝脏。用激光共聚焦显微镜检测核因子κB/P65(NF-κB/P65)蛋白的核易位变化;蛋白提取法分别提取肝脏细胞核蛋白和胞浆蛋白,Western blot定量检测细胞核中NF-κB/P65和细胞浆中p-IκBα、MyD88蛋白含量的变...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 金修哲  何雷  程相朝  张春杰  余祖华  韩海锋  杨丹芳  梅京京  李银聚  
【目的】为探讨连翘苷等6种中药成分抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的作用机制,明确其体外抗病毒作用效果,为抗TGEV的药物筛选提供依据。【方法】利用动物细胞培养技术,采用MTT比色法和细胞病变(CPE)观察法相结合,测定连翘苷、连翘苷元、绿原酸、咖啡酸、丁香酚、丹皮酚6种中药成分不同浓度下对猪睾丸细胞(ST)的毒性作用,通过观察细胞CPE情况,确定药物对细胞作用的最大安全浓度;同时测定病毒的TCID_(50),用细胞维持液配成100·TCID_(50)病毒悬液备用;将6种药物在最大安全浓度范围内连续2倍倍比稀释后,分别采用先感染病毒后加药、先加药后感染病毒、药与病毒混合后感染细胞3种不同作用方...
[期刊] 价格理论与实践  [作者] 申远  张海波  袁盼  申俊龙  
近年来,我国中药材价格呈现持续不规则上涨态势,为深入探究引起中药材价格异常波动的影响因素,本文采用市场价格趋势分析的方法,对2001-2015年的中药材价格波动进行数据分析。结果表明:中药材价格波动不单由市场的供求关系决定,更主要是受到一些非市场因素的影响。因此,需要强化社会治理机制来完善中药资源价格波动的市场均衡机制,运用政策调节中药资源保护与利用关系,保障中药产业的可持续发展。
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