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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
马世敏 吴迪宗 旭日花 李平兰
在嗜热链球菌单菌发酵剂或保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混合发酵剂2种常规发酵剂的基础上添加产胞外多糖(EPS)副干酪乳杆菌HCT共同发酵,研究HCT对酸乳理化、质构以及流变学特性的影响。结果表明:与不加HCT的对照相比,在混合发酵剂中添加质量分数为1%的HCT菌株,凝乳时间可缩短0.5h,酸乳成品的硬度和黏着性分别提高了0.23N和3.81N;而在单菌发酵剂中添加则产酸较慢,延长发酵时间,酸乳成品的硬度和黏着性分别降低0.12N和1.0N,但内聚性增加了0.15。此外,在2种发酵剂中添加HCT均能显著提高酸乳成品的黏度,具有一定的抗剪切破坏作用,同时赋予酸乳良好的色泽、口感和组织状态,对持水力的影...
关键词：
副干酪乳杆菌 胞外多糖 酸乳品质
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘翠平 叶蕾 吴正钧 王荫榆 郭本恒
对影响干酪乳杆菌LC2W胞外多糖提取的主要工艺参数进行了研究。发酵液经超滤浓缩,三氯乙酸脱蛋白,乙醇沉淀等处理,得到粗多糖。单因素和正交试验结果表明,用截留分子量为10 kDa的超滤膜将发酵上清液浓缩4倍后,用终浓度6%的三氯乙酸脱蛋白,再用5倍体积95%乙醇4℃沉淀24 h,多糖提取效果较佳。在此条件下,蛋白脱除率可达88.35%,EPS提取率可达92.17%。
关键词：
干酪乳杆菌 胞外多糖 提取
[期刊] 华北农学报
[作者]
余叶红 郭本恒 吴正钧 王荫榆
探讨干酪乳杆菌LC2W细胞壁组分体外对小鼠巨噬细胞功能的影响。以培养液单纯培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞作为对照,研究干酪乳杆菌LC2W细胞壁主要组分磷壁酸和肽聚糖对RAW264.7细胞代谢水平、吞噬中性红能力及释放NO的影响。不同浓度磷壁酸和肽聚糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞代谢MTT能力、吞噬中性红能力有明显增强作用,并呈一定的剂量效应,在相同质量浓度时,两种细胞壁组分激活巨噬细胞能力无显著差异。同时诱导产生NO量也随着浓度增大而增加,当浓度达到50μg/mL时,磷壁酸诱导能力显现出较高的水平。干酪乳杆菌LC2W细胞壁主要组分磷壁酸和肽聚糖能激活小鼠巨噬细胞RAW264.7细...
[期刊] 华北农学报
[作者]
苗君莅 莫蓓红 赵建 刘振民 肖杨 高红艳 张锋华
将一株筛选到的高产肽酶的植物乳杆菌SP-3,运用于能够快速成熟的干酪模型中,通过研究蛋白质水解特性,进一步衡量SP-3在干酪促熟、改善品质等方面的能力。通过水溶性氮浓度测定及干酪电泳分析,植物乳杆菌SP-3对干酪中蛋白质的初级水解无显著影响;12%TCASN测定及RP-HPLC对干酪水溶性提取物的分析表明,SP-3影响了干酪中小肽的形成;总游离氨基酸浓度测定表明SP-3促进了体系中游离氨基酸的产生。
关键词：
乳杆菌 干酪 促熟
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨兰 杨洋 李伟勋 Obaroakpo JOY 逄晓阳 吕加平
【目的】目前基于酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)spCas9为核心的CRISPR/Cas9基因编辑系统在乳酸菌上的应用受到很多限制,亟待开发适合于乳酸菌的基因编辑系统。对6株干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)的CRISPR系统进行深入分析,并预测激活干酪乳杆菌自身Cas9蛋白所识别的PAM序列,为开发适用于乳酸菌的CRISPR/lcCas9基因编辑系统奠定基础。【方法】以已完成全基因组测序的6株干酪乳杆菌为研究对象,利用生物信息学方法对其CRISPR系统进行深入分析,重点对不同菌株的CRISPR系统结构进行解析,并且对Cas蛋白以及spacer的同源性进行分析,最后对CRISPR区重复序列的二级结构以及Cas9蛋白识别的PAM序列进行预测。【结果】6株干酪乳杆菌CRISPR系统具有相似的结构,均具有特征性的Cas9蛋白,并且Cas基因序列保守。预测到tracrRNA位于Cas9和Cas1之间,重复序列可以形成茎部长达7个碱基的二级结构。根据CRISPR的间隔区序列,6株干酪乳杆菌可被分为3个基因型,将间隔区逐一进行blast比对,结果表明6个间隔区比对上14个来源不同的原间隔序列,这些间隔序列均来源于不同质粒。干酪乳杆菌lcCas9蛋白识别PAM序列的1、3位碱基偏好T/C、A/C,2、4位碱基对G、A的偏好性比较大。【结论】6株干酪乳杆菌CRISPR系统均为type-ⅡA型,Cas序列和重复序列高度保守。DR序列可以形成稳定的二级结构,TGMA为干酪乳杆菌Cas9蛋白高效识别的PAM序列。
[期刊] 水产学报
[作者]
赵林辉 田佳鑫 孔祎頔 彭思博 单晓枫 王桂芹
为构建嗜水气单胞菌OmpA、flaA基因重组干酪乳杆菌并分别检测其表达产物的对鲤的生长及免疫效果的影响；实验将目的基因克隆至乳酸菌穿梭表达质粒pPG612中，并电转至干酪乳杆菌中，经诱导后包被饲料对鲤进行饲养56 d，称重并采集血清及组织，分析生长指标及免疫指标变化。在56d饲养免疫结束后结果显示，生长指标表明重组干酪乳杆菌与对照组相比无显著性差异，其表明对生长无影响；免疫效果分析显示，血清中IgM 表达水平显著上升；血清中AKP、LZM、SOD、CAT、C3和C4也均有显著性升高，荧光定量PCR检测发现免疫后肝、脾、肾及肠组织中的细胞因子IL-1β、IL-8、TNF-α、NF-kB、TLR5及MYD88的基因表达水平有明显的不同程度提升；其TLR5及MYD88表达量Lc-mcs-flaA组高于Lc-mcs-OmpA组；攻毒后Lc-mcs-OmpA与Lc-mcs-flaA免疫保护率分别为59%与54%，显著高于对照组。研究表明，本实验构建的重组干酪乳杆菌Lc-mcs-OmpA与Lc-mcs-flaA免疫鲤能刺激机体产生免疫应答反应，进而提高自身存活率，其为预防鱼类嗜水气单胞菌感染的口服免疫制剂的研发奠定了基础并提供科学理论依据。
[期刊] 水产学报
[作者]
冯军厂 蔡忠良 陈永艳 常绪路 刘慧芬 赵燕静 张建新
为研究乳酸乳球菌Q-9胞外多糖(exopolysaccharides from Lactococcus lactis Q-9, EPS-9)对鲤免疫应答、抗氧化活性以及抗嗜水气单胞菌性能的影响，本实验将提取并纯化的EPS-9 (250、500和1 000 μg/mL)与鲤头肾细胞体外共培养，检测头肾细胞的增殖能力和吞噬活性，以及孵育液中一氧化氮(NO)和细胞因子的合成量。将300尾健康鲤[(47.66±0.43) g]随机分为5组，对照组(阴性和阳性)灌喂无菌的磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline, PBS)，处理组分别灌喂不同浓度的EPS-9 (250、500和1 000 μg/mL)，1次/天，连续处理7 d后取血液和肝胰腺组织。随后，阳性组和处理组腹腔注射嗜水气单胞菌，阴性组用无菌PBS处理，感染24 h后取血液和肝胰腺组织。分别检测血清中NO和细胞因子的合成量，及溶菌酶(LZM)和碱性磷酸酶(AKP)的活性；肝胰腺组织中的抗氧化(T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px和MDA)指标。体外结果显示，EPS-9能显著增强鲤头肾细胞的增殖能力和吞噬活性，并提高NO、促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)和抗炎细胞因子(IL-10和TGF-β)的合成量。体内结果显示，与阴性对照组相比，EPS-9灌喂处理能显著上调血清中NO和促炎细胞因子的合成量，LZM和AKP活性，以及肝胰腺的抗氧化水平。嗜水气单胞菌感染后，NO、促炎细胞因子的合成量及LZM、AKP的活性均显著低于阳性对照组。但无论感染与否，EPS-9处理组血清中抗炎细胞因子的合成量均显著升高。上述结果表明，EPS-9在体内和体外均具备提高鲤的非特异性免疫、抗氧化活性和抗病原菌感染的能力，可作为一种安全有效的添加剂应用于水产养殖中。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张魏伟 王安如 滕可导 王利利 苏华荔 马彤辉 汤林杰 俞明远 马云飞
为研究干酪乳杆菌对断奶仔猪十二指肠黏膜组织结构和功能及发育的影响,采用组织化学和免疫组织化学方法,以168头14日龄断奶仔猪为试验对象,随机分成7组,每组4个重复。研究结果显示:1)干酪乳杆菌预防组(E组)、预防治疗组(F组)的肠绒毛高度分别比大肠杆菌K88攻毒组(D组)明显增高了11.6%(P<0.01)和11.2%(P<0.01)和20.5%(P<0.01)。3)E组、F组的肌层厚度分别比D组增加了11.8%(P<0.05)和10.2%(P<0.05)。4)D组、E组、F组和直接治疗组(G组...
关键词：
仔猪 干酪乳杆菌 十二指肠 发育 组织学
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王誉颖 刘雪连 卢斯婷 闫雪 韩德平 马云飞
为探究干酪乳杆菌对雏鸡十二指肠黏膜组织结构和功能及发育的影响,采用组织化学和免疫组织化学方法,以450只1日龄SPF健康雏鸡为试验对象,随机分成6个组,每组5个重复,每个重复15只雏鸡。结果表明:1)干酪乳杆菌预防组、治疗组及预防治疗组的肠绒毛高度分别比沙门氏菌攻毒组显著增高了19.04%、10.68%和12.21%;2)与鸡白痢沙门氏菌攻毒组相比,干酪乳杆菌预防组的绒毛高度与隐窝深度的比值(V/C)显著升高23.94%;3)干酪乳杆菌预防组、治疗组的增殖细胞核抗原(PCNA)含量显著高于沙门氏菌攻毒组;4)干酪乳杆菌预防组、治疗组、预防治疗组杯状细胞数量分别比沙门氏菌攻毒组显著升高72.26%、67.74%、65.32%。综上,饲喂干酪乳杆菌进行预防能够显著提高雏鸡十二指肠绒毛高度、V/C值、PCNA含量及杯状细胞数量,提示干酪乳杆菌能有效维护雏鸡肠道健康,减轻鸡白痢沙门氏菌对肠道黏膜组织结构的损害,促进肠道发育。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王秋珍 邓自腾 兰静 刘雪连 范祥伟 薛毅 马云飞
为研究干酪乳杆菌对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性结肠炎小鼠焦虑样行为的影响及对结肠的保护作用，本研究分为对照组、DSS组、干酪乳杆菌组和干酪乳杆菌预防组，通过旷场试验比较各组小鼠行为学差异；统计并比较不同组小鼠体重、结肠长度、肠道上皮、炎性浸润、粪便潜血等的变化；HE染色法检测各组小鼠肠道结构的变化。结果显示：1)干酪乳杆菌预防组小鼠在旷场箱中活动的距离及在中央区域停留的时间显著增加(P<0.05);2)与DSS组相比，干酪乳杆菌预防组结肠长度、小鼠体重显著增加，组织学评分和疾病活跃指数显著降低(P<0.05),结肠肠道结构更加完整。综上，干酪乳杆菌可减轻小鼠焦虑样行为，缓解DSS对小鼠结肠的损伤，发挥对急性肠炎的保护作用。
关键词：
干酪乳杆菌 结肠炎 小鼠 行为学
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王秋珍 邓自腾 刘雪连 闫雪 宋维平 韩德平 马云飞
为研究干酪乳杆菌对沙门菌感染雏鸡空肠黏膜上皮损伤的保护作用,以450只1日龄SPF健康雏鸡为研究对象,随机分成正常对照组、沙门菌组、干酪乳杆菌组、预防组、治疗组和预防治疗组,每组5个重复,每个重复15只鸡。分别用HE染色和酶联免疫吸附(ELISA)法检测雏鸡肠道黏膜结构变化和肠道中炎性因子表达量的变化情况。结果显示:1)与沙门菌组相比,饲喂干酪乳杆菌预防使肠绒毛上皮柱状细胞排列整齐,维持肠绒毛的完整性。2)饲喂干酪乳杆菌使得沙门菌感染组的促炎因子IL-17、IFN-γ和TNF-α的表达量显著减少(P<0.05),而抗炎因子IL-10的表达量显著增多(P<0.05)。综上,饲喂干酪乳杆菌能保护雏鸡肠道健康,减轻沙门菌对雏鸡空肠黏膜的损害,加强肠道的免疫功能。本研究为干酪乳杆菌预防畜禽沙门菌感染并应用于生产实践提供理论依据。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
温啸 贺大方 倪学勤 张丹 丁艳东 辛金鸽 李利杰 曾东
【目的】研究干酪乳杆菌与银杏叶提取物协同的降血脂及抗氧化作用。【方法】将体质量为(20±1.0)g/只的60只健康雌性小鼠随机分成5组,即空白对照组、高脂对照组、干酪乳杆菌组、银杏叶提取物组及干酪乳杆菌与银杏叶提取物混合组,除空白对照组外,其余4组均给予高脂饲料,建立肥胖模型,试验期为30d。试验结束后测定各组小鼠体质量,血清中的总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)浓度及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)等的活性。【结果】干酪乳杆菌与银杏叶提取物协同作用,能明显降低肥胖小鼠体质量、TC、TG和MDA,与高脂对照组相比,小鼠...
关键词：
干酪乳杆菌 银杏叶提取物 降血脂 抗氧化
[期刊] 水产学报
[作者]
孟欣 于鹏 单晓枫 钱爱东
为了研究干酪乳杆菌发酵人参茎叶提取物对锦鲫的免疫及抗氧化功能的影响，实验先用3%、4%、5%、6% (记为L3、L4、L5、L6)的干酪乳杆菌菌液发酵人参茎叶提取物，再分别添加到基础饲料(记为L0)中，对初始平均体质量为(25.00± 0.05) g 的锦鲫进行为期5周的饲喂实验。周期性取样，采集锦鲫血清、肝胰脏、中肾、脾脏和全肠，以检测相关免疫指标的变化。在饲喂实验结束后进行嗜水气单胞菌攻毒保护性实验。结果显示，与L0组相比，L5组碱性磷酸酶(AKP)、免疫球蛋白M (IgM）、溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量显著升高，L5组丙二醛(MDA)含量显著低于L0组。各组织中IL-10、TNF-α、TGF-β、IFN-γ、IL-1β基因表达水平均有不同程度的升高，表现出时空差异，其中IL-10的基因水平表达升高更为敏感。在攻毒保护性实验中，L5组的存活率达到30%，相较于其他组而言存活率最高。研究表明，本实验条件下，当干酪乳杆菌的接种量为5%时，人参茎叶提取物发酵对锦鲫的应用效果最好，能够提高锦鲫抗氧化能力及免疫相关基因的表达，并对降低嗜水气单胞菌的感染有较好的预防作用。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
赵瑞香 李元瑞 罗磊
以质量浓度 10 0 g/ L 脱脂乳为培养基 ,对嗜酸乳杆菌在乳中的生长能力、产酸能力、产香能力以及蛋白质分解能力进行了研究。结果表明 :在 37℃条件下 ,嗜酸乳杆菌可在乳中生长、繁殖 ,对数期细菌数达 10 9m L- 1 以上。在 10 %接种量条件下 ,36 h嗜酸乳杆菌可在乳中产生 10 3.2 5～ 10 8.5 6°T的酸度 ,p H值达 3.83～3.91,2 4～ 30 h产生 1.8716～ 2 .14 4 0 m mol/ m L双乙酰 ,3.2 32 2～ 3.6 84 4 m mol/ m L乙醛 ,使发酵乳具有良好的风味。同时 ,嗜酸乳杆菌具有较强的蛋白质分解能力...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
白东宁 齐雪峰 赵献军 段连茂 靳亚平 李义 王大会 王芳
【目的】优化嗜酸乳杆菌对永生化山羊子宫内膜上皮细胞体外黏附的条件。【方法】通过革兰氏染色法,研究山羊子宫内膜上皮细胞的生长状态,嗜酸乳杆菌菌液浓度、菌体生长状态和pH值以及孵育时间对菌体黏附性能的影响。【结果】当山羊子宫内膜上皮细胞培养48 h,嗜酸乳杆菌菌液浓度为1.0×109mL-1,pH值为4.0,孵育时间120 min,嗜酸乳杆菌培养24 h时,嗜酸乳杆菌对山羊子宫内膜上皮细胞的黏附性最好。【结论】永生化山羊子宫内膜上皮细胞作为细菌黏附性能研究的体外模型是有效可行的。
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