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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨玉霞 张慧玲 汪艳 陈勇
为实现瘤胃细菌产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因(FsGLU)的高效表达,开发新的饲用β-葡聚糖酶资源,根据毕赤酵母对密码子的偏爱性、G+C含量等特点,对FsGLU基因进行密码子优化,然后合成优化后的1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因(FsGLUm),转化毕赤酵母GS115,以甲醇诱导表达并对重组FsGLUm的酶学特性、底物特异性和对消化酶的耐受性进行了研究。结果表明:摇瓶水平条件下,以甲醇诱导表达48 h时,重组FsGLUm酶活性提高25.1%(P
[期刊] 中国水产科学
[作者]
万夕和 李筠 张美如 荆燕 裴鸿生 纪伟尚 徐怀恕 许璞
从江苏省如东县中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)苗期暴发丝状细菌病的蚤状幼体分离得到丝状细菌HL 1,经感染试验证实其为中华绒螯蟹苗期丝状细菌病的病原。对HL 1的细胞形态、生理生化特征、致病性及药物敏感性研究结果表明,HL 1为无色、不分枝的丝状体,在固体培养基上形成指纹状菌落,菌丝可断裂形成微生子,在液体培养基中所形成的微生子可聚集成玫瑰花环样结构;HL 1过氧化氢酶阳性,几丁质酶阴性,需氧,鉴定为毛霉亮发菌(Leucothrixmucor),其生长的pH适宜范围为5.0～10.0,盐度最适范围为10～40;在常用的32种抗生素中,HL 1仅对乙基西羧霉素高度敏感,而对其他3...
关键词：
丝状细菌病 毛霉亮发菌 中华绒螯蟹
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王慧飞 孙艳香 冯雪 张一名 杨江涛 马梅芳 陈光
【目的】克隆棉花精氨琥珀酸合成酶基因Ｇｈ ＡＳＳ１的ｃ ＤＮＡ序列，并利用原核表达系统高效表达融合蛋白，检测融合蛋白的精氨琥珀酸合成酶活性及其表达对工程菌生长、耐盐能力及与游离Ｌ－瓜氨酸（Ｌ－ｃｉｔ）和Ｌ－精氨酸（Ｌ－ＡｒＧ）含量的影响，为解析该基因的功能及作用机制奠定基础。【方法】以拟南芥推断的精氨琥珀酸合成酶ｃ ＤＮＡ序列作为探针，利用电子克隆和ｒｔ－Ｐｃｒ技术，从棉花幼叶中获得ｃ ＤＮＡ片段，ｔ／Ａ克隆测序后得其序列信息，利用生物信息学软件分析其ＤＮＡ结构、蛋白质结构、功能域和同源性，并构建系统进化树。利用ｑ ｒｔ－Ｐｃｒ检测其在盐胁迫下的表达模式；将Ｇｈ ＡＳＳ１的开放阅读框连接到原核．．．
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
曹迪军 梁凇
研究了不同生物反应器体系中丝状真菌产生γ-亚麻酸的工艺,结果表明:气升式发酵体系明显优于搅拌式发酵体系,二者γ-亚麻酸含量相差6％。并最终确定了气升式发酵体系下的工艺参数:pH 6.0、通气量1:1.7、发酵温度28℃,在此条件下γ-亚麻酸最终含量达到15％～18％。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张晓艳 杨忠仁 张凤兰 郝丽珍 赵宏宇 王彩霞 龙祥
【目的】研究干旱胁迫对地梢瓜琥珀酸合成代谢的影响,为其琥珀酸开发利用提供理论依据。【方法】以地梢瓜和雀瓢幼苗为试材,设对照(土壤含水量为田间最大持水量(24.44%)的65%～70%,下同)、轻度(45%～50%)、中度(25%～30%)和重度(5%～10%)4个干旱胁迫处理,测定不同处理根、茎、叶中琥珀酸含量和琥珀酸合成酶活性,比较不同处理各指标的变化,分析琥珀酸与其合成酶的关联性。【结果】(1)琥珀酸在地梢瓜和雀瓢的根、茎、叶中均有分布,地梢瓜不同器官中的琥珀酸含量表现为叶>根>茎,而雀瓢则表现为叶>茎>根。(2)随着干旱程度的加重,地梢瓜和雀瓢叶、根中的琥珀酸含量先增加后减少,以中度干旱胁迫处理下最大。(3)地梢瓜和雀瓢叶中α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)、琥珀硫激酶(STK)、琥珀酸脱氢酶(SD)、谷氨酸脱羧酶(GAD)活性和γ-氨基丁酸(GABA)含量均在重度干旱胁迫处理下最大。(4)相关性分析表明,地梢瓜和雀瓢叶中琥珀酸含量与GABA和SD活性呈负相关。【结论】适度干旱胁迫能够促进地梢瓜和雀瓢琥珀酸的积累。轻度和中度干旱胁迫下,琥珀酸合成以三羧酸循环途径(TCA)为主,重度干旱胁迫下以γ-氨基丁酸代谢支路(GABA shunt)为主。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
吴晓萍 廖艳 章超桦 徐慧
以琥珀酸和柠檬酸提取牡蛎匀浆液中的镉,并利用单因素试验和正交试验优化提取条件。结果表明,有机酸的pH对牡蛎匀浆液中镉的提取率影响最大,其次是料液比和时间。浓度和温度的影响因有机酸类型不同而有差异。琥珀酸提取镉的最佳条件如下:时间为2 h,温度为35℃,酸浓度为0.02 mol/L,料液比为1∶15,pH为2.0;柠檬酸提取镉的最佳条件如下:时间为2 h,温度为35℃,酸浓度为0.04 mol/L,料液比为1∶15,pH为2.5。在最佳条件下两种有机酸对牡蛎匀浆液中镉的提取率达到90.2%~91.8%。研究亮点:目前利用有机酸等螯合剂去除土壤、底泥中的重金属等已做了大量研究,而直接对生物原料进行...
关键词：
柠檬酸 琥珀酸 镉 提取 牡蛎
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张震 张岩 杨朋坤 任双慧 高雅欣 孙玉娇 王永芬
【目的】对1株产脂肪酶细菌MY016进行鉴定并对其产脂肪酶特性进行研究,为后期规模化发酵生产脂肪酶及其在畜牧业中的实际应用奠定基础。【方法】采用形态学观察、生理生化鉴定、16S rDNA测序分析,对实验室分离保存的1株产脂肪酶细菌MY016进行鉴定;通过菌落和芽胞计数、生长曲线测定,对MY016的生长特性进行分析;通过产脂肪酶量和酶活检测、脂肪酶基因扩增和系统进化分析,对MY016菌株的产脂肪酶特性进行探讨。【结果 】产脂肪酶细菌MY016经形态观察、生理生化鉴定和16S rDNA分析,被鉴定为枯草芽胞杆菌。MY016在培养2h后进入对数生长期,生长迅速;培养10 h其菌液600 nm吸光度最高达到4.7,随后进入稳定期;12 h时活菌数约为5.3×10~9 CFU/mL;培养22 h后开始二次生长,吸光度最高达5.2;培养46 h后进入衰退期。芽胞观察和计数结果显示,MY016菌株在接种16 h后开始形成芽胞,随着培养时间延长,芽胞形成率逐渐升高,直至72 h完全形成芽胞,芽胞数最高为1.9×10~9 CFU/mL。产脂肪酶能力检测结果显示,MY016菌株在培养36 h时产酶量达到最大,为246.918 mg/L,然后总酶量逐步降低;48 h时总酶活达到最高,约为281.883 U/L。成功扩增了MY016菌株的脂肪酶基因,并构建系统进化树,结果显示MY016脂肪酶基因与其他芽胞杆菌的脂肪酶基因亲缘关系最近,表明其脂肪酶基因进化保守。【结论】产脂肪酶枯草芽胞杆菌MY016生长迅速、产酶量稳定,总酶活较高,适合后期规模化生产和在畜牧业中推广应用。
关键词：
枯草芽胞杆菌 菌株鉴定 脂肪酶
[期刊] 华北农学报
[作者]
李锐 贺亮 吴俐勤
旨在建立丝状真菌蛋白质组的分析方法,对丝状真菌蛋质白学进行初步探索。使用液氮冷冻研磨、蜗牛酶消化、尿素裂解、硫酸铵沉淀预分级和二维液相色谱分离相结合的蛋白质组研究方法进行丝状真菌的蛋白质组分析;建立的丝状真菌蛋白提取分级分离方法有效的提高了蛋白的分离效率和提取数量,可以应用在丝状真菌蛋白质组研究中,共鉴定了396个蛋白,包括了参与各种细胞生理过程的蛋白,为进一步开展丝状真菌蛋白质组的研究打下了良好的基础。研究中建立的蜗牛酶消化破壁、尿素裂解的蛋白提取方法,可以显著提高丝状真菌胞浆蛋白的鉴定数量,特别是对于那些功能重要但丰度低的蛋白,适合于丝状真菌蛋白质组的研究。
关键词：
丝状真菌 蜗牛酶 尿素裂解 蛋白质组
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李宇航 马家海 林秋生
对附着在条斑紫菜上的丝状细菌进行了详细的观察,结果表明,丝状细菌为无色、不分枝的丝状体,成熟的菌丝呈串珠状。菌丝体的基部可以进入细胞壁的表层,但不能穿透细胞壁。从大量附着丝状细菌的藻体上分离得到了丝状细菌菌株YL,经感染试验证实发病症状与自然海区患病紫菜的症状一致,说明该菌为条斑紫菜丝状细菌附着症的致病菌。对菌株YL的形态及致病性的研究结果表明,该菌为需氧革兰氏阴性菌,不能水解淀粉,接触酶呈阳性,在淡水中不能生长。在固体培养基上形成指纹状菌落;在液体培养基中所形成的微生子可聚集成玫瑰花环样结构及绳结状拓扑结构,初步确定其为毛霉亮发菌(Leucothrix mucor)。该菌最适生长条件为盐度2...
关键词：
条斑紫菜 丝状细菌附着症 毛霉亮发菌
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
吕燕妮 李平兰 孙成虎 周伟
研究了本组纯化的戊糖乳杆菌31-1菌株所产细菌素的理化和生物学特性及其对敏感菌株的抑菌作用,发现该细菌素在80℃热处理15 min后活性基本不变,121℃处理15 min仍保持一定活性;在pH 2~8范围内37℃处理4 h保持稳定,当pH≥9时活性逐渐降低。胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白酶K、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶均可使该细菌素完全失活;α-淀粉酶可使其部分失活;酸性蛋白酶、溶菌酶不能使其失活。该细菌素抑菌效果明显,在3~5h内可减少敏感菌细胞数102~103个。测定了其抑菌谱,该细菌素可抑制乳杆菌属、链球菌属、片球菌属中的大部分菌株,还可抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、芽孢杆菌中的部分菌株。该细菌素...
关键词：
戊糖乳杆菌 细菌素 理化特性
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孙得发 董丽 屈长波 吕佳琪 钟翔 王恬
[目的]研究不同油脂水平日粮中添加α-生育酚琥珀酸酯(α-tocopherol succinate,TOS)对肉鸡过氧化及脂代谢的影响。[方法]选用1日龄AA肉鸡480只,随机分为8组各6个重复,每个重复10只,采用2×4因子设计,即基础日粮(N)和高脂日粮(H),4个生育酚处理:50 mg·kg-1α-生育酚醋酸酯(α-tocopherol acetate,TOA),50 mg·kg-1(TOS1)、100 mg·kg-1(TOS2)和150 mg·kg-1(TOS3)TOS,试验分前后两期共42 d。[结果]与基础日粮对照组比,高脂日粮组油脂极显著降低料肉比(P<0.01),生育酚的添加极...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张雪春 王振兴 郑为完 阚欢 刘云
为开发新型的乳化剂和高值化利用玉米糖浆,以低DE值的玉米糖浆为原料,采用单因素试验和响应面优化制备辛烯基琥珀酸糖浆酯的最佳条件,并研究辛烯基琥珀酸糖浆酯的黏度、表面张力和乳化性能。结果表明,辛烯基琥珀酸糖浆酯的最佳制备工艺为糖浆浓度51%、pH 8.0、反应温度36℃、反应时间4 h,测得取代度为1.77%。辛烯基琥珀酸糖浆酯相比糖浆具有较高的黏度,且随着取代度的增大,辛烯基琥珀酸糖浆酯的黏度和乳化性能呈升高的趋势,而表面张力有降低的趋势,说明糖浆经辛烯基琥珀酸酐酯化后具有适宜的黏度,良好的乳化性能,可作为表面活性剂或乳化剂开发应用于食品和化工领域。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
苏勇 毛胜勇 姚文 朱伟云
通过体外实验研究了大豆黄酮和脱脂乳对芽孢乳杆菌S1在不同pH值和不同浓度胆盐下存活能力的影响。结果表明, 与对照组相比, 添加 10mg·mL-1的脱脂乳显著提高了S1在pH分别为 2 6、3 7条件下的存活数量, 并且也能显著提高S1在 1、2和 3mg·mL-1胆盐浓度条件下的存活数量, 说明脱脂乳对S1有显著的保护作用。添加 50mg·L-1的大豆黄酮也显著提高S1耐胆盐的能力, 但对S1耐受酸能力有负效应。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
曹冬梅 张洪英 何成华 景晟 张海彬
用厌氧培养法对1株具霉菌抑制活性的弯曲乳酸杆菌(HB02)进行了培养,用气相色谱和比色法测定了培养物中挥发性脂肪酸(VFA)及乳酸的含量,并通过共培养法检测了该菌对黄曲霉生长和产毒的抑制效果。试验结果显示:该菌在双层固体培养基上生长缓慢,而在改良MRS液体培养基中生长较快。37℃培养48 h后培养液中乙酸51.75mmol.L-1、丙酸0.77 mmol.L-1、丁酸0.37 mmol.L-1、乳酸28.06 mmol.L-1。乳酸试验表明,培养基中添加的乳酸越多,培养基pH值越低,黄曲霉菌丝产量越低,而黄曲霉毒素B1的产量则有增加的趋势,表明乳酸所致低pH值只能抑制黄曲霉生长而不能抑制其产毒...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李宝庆 鹿秀云 郭庆港 钱常娣 李社增 马平
【目的】对枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株BAB-1产生的脂肽类物质和挥发性物质进行分离鉴定和抑菌活性研究。【方法】采用HPLC和MALDI-TOF-MS对脂肽类物质进行分离纯化和鉴定;采用GC-MS对挥发性物质进行鉴定。【结果】HPLC分析表明,菌株BAB-1产生的脂肽类物质由LP-1、LP-2、LP-3三类组分组成,其中LP-2起主要抑菌作用。MALDI-TOF-MS质谱分析表明,LP-1为surfactin(C13—C15),LP-2为fengycin A(C14—C15)和fengycin B(C14—C18),LP-3成分未能确定。GC-MS结果表明,菌株BAB-1...
关键词：
枯草芽孢杆菌 脂肽 挥发性物质 抑菌活性
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