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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李发弟  夏东  陈杰  赵茹茜  
随机选取0、3、20、30、90、120和180日龄二花脸公猪和大白公猪各4头,用相对定量RT-PCR法研究睾丸组织中生长激素受体(GHR)基因表达的发育性变化。结果表明,二花脸猪与大白猪睾丸GHR mRNA表达的发育模式不同,二花脸猪GHR mRNA相对表达量从0到30日龄逐渐上升,在90和120日龄呈阶段性降低(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 陈伟华  姜礼胜  陈杰  韩正康  
采用慢性颈静脉导管连续取样和放射免疫分析法研究了二花脸公猪生长激素(GH)的分泌特点。实验期从13:00~16:00每15nin采血一次。结果:二花脸公猪GH的总体水平、基线水平、3h峰频率,峰持续时间和峰强度分别为3.13±0.60ng/ml,2.05±0.46ng/ml,1.30±0.16个,41.25±4.48min和8.41±1.88ng/ml。去势后GH分泌模式未见有变化,但总体和基线水平分别提高53.21%(P<0.05)和101.39%(P<0.01)。185日龄去势公猪与140日龄的去势公猪比较,GH分泌模式和水平都无显著差异。结果表明:二花脸生长公猪的生长激素呈脉冲式分泌,去...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 马细兰  张勇  刘晓春  林浩然  
选取同一批30日龄的尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)鱼苗置于水泥池中自然饲养,分别于30、60、80、110、140日龄取样测定不同发育阶段雄鱼的特定生长率。用实时荧光定量PCR方法检测雄鱼肝脏中两种生长激素受体(GHR1和GHR2)的mRNA丰度。结果表明,30~110日龄,雄鱼特定生长率呈不断上升趋势,至80~110日龄达到最高,之后开始下降;雄鱼肝脏中2种GHR基因表达的发育性变化趋势不相同,30~110日龄,GHR1mRNA表达逐渐上升,110日龄达到最高,随后开始下降,其发育性变化与特定生长率显著正相关(R=0.96,P<0.01);GHR2mRNA表达在60...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 杨晓静  陈杰  胥清富  韦习会  赵茹茜  
用相对定量RT-PCR方法研究大白猪和二花脸猪背最长肌中肌肉生长抑制素(Myostatin)和生肌调节因子(Myo-gen in)基因表达的发育性变化并进行品种及性别间比较。研究结果表明:大白猪公猪MyostatinmRNA表达水平在20日龄时达到高峰且显著高于相同日龄二花脸公猪(P<0.05),而二花脸公猪在45日龄时才显著升高,其他日龄品种间差异不显著。二花脸公猪和母猪出生后MyostatinmRNA表达水平均表现为上升,45日龄时达到高峰,120日龄时公母猪间差异显著(P<0.05)。二花脸公猪与大白猪公猪MyogeninmRNA的表达发育模式基本相同,均在20日龄达到最高值,品种间差异...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张汤杰  何孔泉  陈伟华  陈杰  
用苯甲酸雌二醇 ( E B) 肌肉注射泌乳21 d 的二花脸母猪4头和大白猪3头, 结果4头二花脸母猪有3头发情, 大白猪只有1头发情。测定了注射 E B 后两品种母猪血浆中的雌二醇 ( E2 )、促性腺激素释放激素 ( Gn R H)、促黄体素 ( L H) 和孕酮 ( P4 )。结果显示, 外源性雌激素可使发情母猪 Gn R H 升高, 垂体活动加强, 促进了 L H 分泌, 剌激卵巢雌激素生成, 血浆 P4 水平升高; 未发情的母猪未见有明显变化。二花脸母猪垂体的敏感性要比大白母猪高。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 邵康  周杰  吴小雪  盛晟  殷宗俊  舒宝屏  罗联辉  
为探讨皖南花猪卵巢组织脂联素受体mRNA与雌二醇(E2)合成相关因子mRNA表达的发育性变化及其相关性,用ELISA法测定0、30、45、90和180日龄(n=5)皖南花猪雌性仔猪血液脂联素(Adp)和E2水平,荧光实时定量PCR法检测卵巢组织脂联素受体1、2(adiponectin receptor 1,2;AdpR1,AdpR2)和卵泡刺激素受体(FSHR)、芳香化酶P450(aromatase P450arom)基因CYP19 mRNA的表达水平。试验结果显示:雌性仔猪血液E2质量浓度、卵巢组织AdpR1、AdpR2和FSHR mRNA表达均有显著或极显著的发育性变化(P<0.05或P<...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 储明星  吴常信  张建生  顾建平  孙士铨  
对二花脸猪、大白猪及其杂交一代和回交一代 4个群体共计 2 0 10窝产仔数的资料进行了加性—显性遗传模型以及基因效应的研究。方差分析结果显示 ,窝产仔数 (总产仔数和活产仔数 )具有极显著的群体间差异 ,表明不同群体的遗传结构不同。多元回归结果表明 :加性效应平方和占总产仔数和活产仔数总遗传变异平方和的比例分别为 75 4%和6 9 8% ,可见加性效应是群体间遗传变异的主导因素。显性效应平方和占总产仔数和活产仔数总遗传变异平方和的比例分别为 18 3%和 2 3 7% ,表明显性效应在群体间遗传变异中是相当重要的。上位效应平方和占总产仔数和活产仔数总遗传变异平方和的比例分别为 6 3%...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 马骞  柳淑芳  庄志猛  唐启升  
根据已克隆的半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)生长激素(GH)基因和生长激素受体Ⅰ(GHR-Ⅰ)基因的cDNA序列信息设计引物,用于扩增半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ基因序列。随后,分别利用表达载体pET-32a和pGEX-6P-1成功构建了包含半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ基因ORF全序列及不同ORF片段的6个重组质粒,并将获得的重组质粒在表达宿主菌大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳结果显示:重组GH的pET-32a-CSGH质粒在40 kD处有特异性的蛋白条带,重组GHR-Ⅰ胞内区的pGEX-6P-1-CSG...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 赵永祥  刘吉英  潘增祥  张久峰  姚勇  周吉隆  谢庄  徐银学  刘红林  李齐发  
【目的】了解二花脸猪Smad4(common-mediator Sma4)基因的序列特征和组织表达特征,分析二花脸猪与商品猪卵巢组织中Smad4基因mRNA表达水平的差异。【方法】采用克隆测序技术获得二花脸猪Smad4基因cDNA序列,利用生物信息学方法分析二花脸猪Smad4基因的序列特征和蛋白的理化性质、高级结构,RT-PCR检测其组织表达特征,并采用real-time PCR技术检测二花脸猪与商品猪卵巢组织中Smad4基因mRNA的表达水平。【结果】二花脸猪Smad4基因编码区序列全长1 659 bp,编码一个含有552个氨基酸残基的蛋白质,氨基酸序列与其它哺乳动物的同源性均在98%以上;...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李发弟  赵茹茜  胥清富  陈伟华  马友记  陈杰  
随机选取 3,2 0 ,30 ,90 ,12 0和 180日龄纯种二花脸和大约克夏公猪各 4头 ,屠宰后采取血样和睾丸组织样 ,测定血清和睾丸组织中睾酮含量。结果表明 ,90日龄前 ,两品种公猪血清睾酮水平均维持在较低水平 ,血清睾酮水平从 90日龄开始 ,随日龄增加二花脸公猪极显著升高 (P〈0 0 1) ,而大约克夏公猪的则从 12 0日龄开始显著上升 (P〈0 0 5 )。二花脸公猪的血清睾酮水平显著高于大约克夏公猪 (P〈0 0 5 )。不同日龄的公猪睾丸组织中睾酮含量的变化与血清睾酮水平的变化趋势相反 ,3日龄时睾丸组织中睾酮含量最高 ,以后随日龄增加而下降 ,二花脸公猪在 2...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 姜志华  刘红林  李齐贤  胡秀义  
利用二花脸、大约克及其F1、F2和回交世代共8个猪群的最小二乘均数,采用多元回归分析程序,对猪的初生重、20日龄重和60日龄重的母体效应和基因效应进行了研究。结果表明,大约克猪初生重、20日龄重及60日龄重平均比二花脸猪依次高04613,13643和20890kg。初生重受母体效应影响最大,而到60日龄时加性基因效应则占主导地位。在总变异中,母体效应由初生时的8889%降至60日龄时的449%;而加性效应则由初生时的561%升至60日龄时的6547%。60日龄时的个体重,大约克对二花脸猪的加性效应为23184kg,显性效应为01128kg。
[期刊] 华北农学报  [作者] 杨国伟  吴赛辉  马红  刘娣  
采用RT-PCR方法对大白猪的RXRβ基因在1,90,180,270和360日龄的心、肝、胃、脾、肾、肺、大肠、小肠、肌肉、子宫、卵巢共11个组织的表达情况进行了研究。结果表明,RXRβmRNA在大白猪的脾脏、子宫和卵巢中持续表达,1日龄时表达的组织最多且表达水平较高,但该基因在所检的11个组织中存在明显的时间和空间变化。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张倩  方宇瑜  李平华  马翔  蒋能静  黄媛  陆志强  季铮渝  黄瑞华  
[目的]本文旨在通过研究猪ESR、FSHβ和AHR基因多态性对二花脸群体产仔数的影响,鉴别出影响二花脸猪产仔数变异的关键基因。[方法]对303头二花脸猪进行ESR基因g.14418786、FSHβ基因g.30398474_30398475ins292(292 bp大片段插入)、AHR基因g.86550830位点分型(Sscrofa11.1),用Excel 2003软件进行基因多态性分布的分析和卡方检验,并利用SAS 9.2软件混合模型对ESR、FSHβ、AHR基因及其合并基因型与产仔数进行关联性分析。[结果]ESR基因g.14418786、FSHβ基因g.30398474_30398475ins292以及AHR基因g.86550830位点在二花脸群体中均具有多态性,且3个基因的不同等位基因频率差异很大,ESR基因g.14418786位点A、B等位基因频率分别为0.173和0.827,FSHβ基因g.30398474_30398475ins292位点A、B等位基因频率分别为0.889和0.111,而AHR基因g.86550830位点G、T等位基因频率分别为0.889和0.111。ESR基因g.14418786位点的AA、AB和BB基因型频率分别为0.050、0.248和0.703,FSHβ基因g.30398474_30398475ins292的AA、AB和BB基因型频率分别为0.808、0.162和0.030,AHR基因g.86550830位点的GG、GT和TT基因型频率则为0.792、0.194和0.013。ESR基因g.14418786与FSHβ基因g.30398474_30398475ins292位点显著偏离哈代-温伯格平衡(P0.05)。关联性分析未发现ESR、FSHβ、AHR基因以及3个基因的合并基因型显著影响二花脸猪的产仔数(P>0.05)。[结论]本试验未能证明ESR、FSHβ和AHR基因是影响二花脸猪产仔数的主效基因,二花脸猪产仔数变异可能受其他基因影响。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 夏荣欣  李悦  刘婷婷  孙宣  钟黄欣  郭文晴  曾诚  张国敏  
[目的]本实验旨在探究神经介素B(neuromedin B, NMB)及其受体[神经介素B受体(neuromedin B receptor, NMBR)、胃泌素释放肽受体(gastrin releasing peptide receptor, GRPR)和蛙皮素受体(bombesin receptor subtype 3, BRS3)]在山羊不同发育阶段睾丸组织中的差异表达,为解析哺乳动物睾丸发育及功能调节的机制提供参考。[方法]选取系谱清晰和体况良好的雄性山羊12只(3和9月龄,各6只)进行阉割并采集睾丸组织,在NMB及其受体基因克隆与序列分析的基础上,采用免疫组化技术检测NMB及其受体在睾丸组织中的表达定位,利用RT-qPCR和western blot检测NMB及其受体在不同发育阶段山羊睾丸组织中的表达变化。[结果]NMB及其受体基因与绵羊和牛的进化关系最近,NMB及其受体基因编码区的核苷酸序列与牛和绵羊的同源性达96%以上,结构分析发现NMBR、GRPR和BRS3均属于七次跨膜受体。NMB及其受体在3月龄和9月龄山羊睾丸组织中广泛表达,其中在间质细胞、肌样细胞和精子细胞中呈高表达。与3月龄山羊相比,9月龄山羊睾丸组织中NMB与GRPR的mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05),而NMBR与BRS3的mRNA和蛋白表达量显著增高(P<0.05)。[结论]NMB及其受体可能参与山羊睾丸发育的调节,丰富了家畜生殖生理学的研究。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 曾诚  夏荣欣  李悦  刘婷婷  孙宣  钟黄欣  郭文晴  张国敏  
[目的]本试验旨在探究神经介素B(NMB)及其受体NMBR[还包括胃泌素释放肽受体(GRPR)和蛙皮素受体(BRS3)]在山羊不同发育阶段睾丸组织中的差异表达,为解析哺乳动物睾丸发育及功能调节机制提供参考。[方法]选取系谱清晰和体况良好的雄性山羊12只(3月龄和9月龄,各6只)进行阉割并采集睾丸组织,在克隆NMB及其受体基因与分析序列的基础上,采用免疫组化技术检测NMB及其受体在睾丸组织中的表达定位,利用RT-qPCR和Western blot检测NMB及其受体在不同发育阶段山羊睾丸组织中的表达变化。[结果]NMB及其受体基因与绵羊和牛的进化关系最近,NMB及其受体基因编码区的核苷酸序列与牛和绵羊的同源性达96%以上,结构分析发现NMBR、GRPR和BRS3均属于7次跨膜受体。NMB及其受体在3月龄和9月龄山羊睾丸组织中广泛表达,其中在间质细胞、肌样细胞和精子细胞中呈高表达。与3月龄山羊相比,9月龄山羊睾丸组织中NMB与GRPR的mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05),而NMBR与BRS3的mRNA和蛋白表达量显著增加(P<0.05)。[结论]NMB及其受体可能参与山羊睾丸发育的调节。
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