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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 郑金双  张蜀宁  孙成振  王建军  侯喜林  
以二倍体不结球白菜及其同源四倍体为材料,采用常规染色压片法进行核型分析。结果表明:二倍体不结球白菜核型公式为2n=2x=20=10m+8sm(2SAT)+2st,其中第1、2、3、4、6对为中着丝粒染色体,第5、7、8、9对为近中着丝粒染色体,第10对为近端着丝粒染色体,第5对染色体具有随体,核型类型属于2A型,为基本对称型;四倍体不结球白菜核型公式为2n=4x=20m+16sm(4SAT)+4st,核型特征与二倍体基本一致,仅染色体长度变异范围与二倍体相比略大。表明四倍体不结球白菜是由其二倍体加倍得到的,为同源四倍体。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王红娟  韩盼盼  李雅婷  向增旭  
[目的]本文旨在探索白术同源四倍体基因组在分子水平上的变化规律。[方法]以二倍体及其同源四倍体白术的试管苗为试验材料,应用MSAP和ISSR技术研究其DNA甲基化情况及遗传差异性。[结果]白术二倍体及其同源四倍体MSAP扩增总条带数均为373条,四倍体半甲基化率高于二倍体,而总甲基化率和全甲基化率却低于二倍体,54.96%的四倍体DNA甲基化模式发生了变化。采用5条ISSR引物检测1个白术二倍体和5个同源四倍体株系,共发现25个清晰的扩增位点,多态性位点13个,多态性为52.0%。[结论]白术二倍体人工加倍后遗传机制发生了变化。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘惠吉  王华  高丽红  
测定了在18℃的生长箱内培养的5个白菜同源四倍体及2个二倍体品种子叶期幼苗的过氧化物酶(PER)、酯酶(EST)及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果显示,耐寒生态型四倍体品种的PER和EST比相应二倍体品种增加1~2条特有的酶带,SOD谱带无显著的差异;耐热四倍体品种则相反,3种酶带皆较二倍体品种减少1或2条。对3种酶进行聚类分析的结果表明,相同生态型和染色体倍数相同的品种归为同类,与按表型分类的结果基本一致。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 胡金良  徐汉卿  刘惠吉  王华  
在现蕾期和开花期对二倍体矮脚黄白菜自交、四倍体矮脚黄白莱自交和以四倍体矮脚黄白菜为母本、二倍体矮脚黄为父本杂交的白菜进行胚胎学观察。结果表明,二倍体和四倍体白莱自交的均能正常受精和进行胚胎发育,最终形成正常的种子,但四倍体白菜的受精和胚胎发育均落后于二倍体白菜;四倍体白菜和二倍体白菜杂交的受精和早期胚胎发育正常,但胚乳一般在游离核阶段发生退化,到授粉后16d,胚乳完全消失.由于胚乳过早解体,胚发育到球形原胚时发生退化,因而无法获得成熟的三倍体种子。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 汤伟华   刘叶琼   张子楠   王金鸽   刘同坤  
[目的] 不结球白菜地方品种具有品质优但产量低的特点,利用秋水仙素加倍的方法可以获得高产优质的同源四倍体不结球白菜新种质。[方法] 以浓度0.2%的秋水仙素诱变剂滴定处理二倍体不结球白菜子叶生长点,经过形态学、解剖学、细胞学鉴定及流式细胞仪倍性分析,筛选诱变植株,成功获得同源四倍体不结球白菜新材料,并比较分析二、四倍体农艺性状指标、营养品质、光合特性、光合作用相关基因表达量差异。[结果] 结果表明,四倍体株型呈现出聚拢型,叶片趋于近圆形,花器官明显变大;叶表皮气孔变大,相同面积下气孔密度减小;花粉粒不同于二倍体规则的椭圆形,呈现出明显不规则形;根尖细胞内染色体数目为二倍体的两倍;细胞内相对DNA含量为二倍体的两倍;植株的可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、纤维素含量及叶绿素含量比二倍体显著增加,可溶性糖含量达到极显著水平,维生素C含量和硝态氮含量分别比二倍体显著降低;最大光合速率(P_(max))、光饱和点(LSP)和表观量子效率(AQY)与二倍体相比增长了60.46%、54.10%和8.33%,光合能力更强;调控光合作用多种基因相对表达量显著高于二倍体。[结论] 本研究成功获得了具有高产、优质潜力的同源四倍体不结球白菜新材料。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张咪  宋莹  王夏  刘金平  张昌伟  李英  侯喜林  柳李旺  刘同坤  
[目的]本文旨在创制高产抗病的四倍体不结球白菜‘五月慢’新材料。[方法]利用2 g·L~(-1)秋水仙素溶液处理不结球白菜‘五月慢’二倍体幼苗子叶生长点,通过形态学、细胞学、解剖学、流式细胞仪分析等方法鉴定筛选出同源四倍体植株,并对二、四倍体植株的形态学指标、农艺性状、营养品质、光合特性、抗病能力等方面进行比较分析。[结果]与二倍体相比,四倍体植株开展度降低,叶片的长宽比明显变小,叶型扁圆形,叶柄显著增厚,种子、花器官、种荚等明显增大;叶片气孔变大,气孔密度减小;花粉粒呈现矩形、菱形等不规则形状;细胞染色体数目和DNA荧光强度为二倍体的2倍;可溶性糖、纤维素含量显著性提高,硝态氮、叶绿素含量显著减少,可溶性蛋白、有机酸含量无显著变化;光饱和点、光补偿点、暗呼吸速率分别增加了13.47%、24.02%、12.12%,光合能力更强;相同培养条件下灰霉菌表达量更低,抗病性更强。[结论]获得了具有高产、抗病潜力的同源四倍体不结球白菜‘五月慢’新材料。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 韩业飞  张蜀宁  张宇  侯喜林  
采用不同浓度的秋水仙素对二倍体不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis)子叶期生长点进行诱导,经过筛选鉴定,选育优质、矮紧型白梗同源四倍体不结球白菜。结果表明:2.0 mg·g-1秋水仙素处理6次获得的同源四倍体植株的加倍率最高,为7.02%。与二倍体相比,四倍体在营养体、气孔、花器、果实上均有显著差异,且株高降低、叶宽增加、叶柄长变短、展开度减小、叶色亮绿、株型束腰紧凑。四倍体的可溶性糖、可溶性蛋白和维生素C含量分别比二倍体显著提高11.14%、25.98%和11.70%。经两代选育,四倍体纯度达到100%,整齐度95%,小区产量比二倍体提高18.10%...
[期刊] 林业科学  [作者] 张晓申  范国强  赵振利  曹喜兵  赵改丽  邓敏捷  董焱鹏  
植物多倍化既是对自然环境适应的结果,也是推动其进化和物种形成的重要因素。自然界大约70%的被子植物在进化史中经历过一次或多次多倍化过程(Masterson,1994;Wendel,2000)。多倍体植物具有器官和生物量增大的特征及较强适应生物和非生物胁迫的能力(Hilu,1993;Liu et al.,2002)。植物多倍化过程中,在染色体结构(Swapna et al.,
[期刊] 西南农业学报  [作者] 林强  祁广军  赵卫国  朱方容  邱长玉  陈小青  方荣俊  
利用SRAP分子标记技术,对8份桑树二倍体品种和经秋水仙碱化学诱变得到的同源四倍体进行DNA遗传差异研究和聚类分析。结果表明:桑树不同材料二倍体及其同源四倍体间的SRAP多态性有明显差异。农桑8号、璜桑37号、湖桑197号、湖桑199号和国桑20号的二倍体及其同源四倍体间的扩增条带完全一致,无差异,而育71-1二倍体及其同源四倍体的SRAP多态性最高,达到1.41%,所有的二倍体及其同源四倍体材料均聚在一起,不同材料间亲缘关系近的聚为一大类。说明不同桑树材料经秋水仙素诱变后产生的遗传差异较大,桑树二倍体及其同源四倍体产生变异的原因可能是染色体上的等位基因积加效应造成DNA分子遗传结构的改变。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 翟晓巧  张晓申  范国强  赵振利  曹喜兵  
分别用AFLP和MSAP分子标记技术,研究了毛泡桐二倍体及其同源四倍体幼苗DNA碱基序列及其甲基化的变化。结果表明,毛泡桐二倍体及其同源四倍体DNA碱基序列在AFLP水平上没有发生变化;在MSAP扩增电泳凝胶上,毛泡桐二倍体及其同源四倍体分别检测到2 262和2 180个扩增位点,DNA甲基化位点占总扩增位点的比例分别为35.32%和38.58%,其中DNA全甲基化比例则为12.86%和14.13%;毛泡桐同源四倍体DNA甲基化和去甲基化频率高于其二倍体,总DNA甲基化多态性低于二倍体。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 李萌  郭烨  刘松珊  庞晓明  李颖岳  
【目的】研究酸枣基因组复制后分子水平的变异机制,为深入探讨枣树多倍体性状、关键调控基因的克隆及基因工程育种提供参考。【方法】本实验以二倍体及其同源四倍体酸枣为研究材料,比较了二者的叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性糖含量以及可溶性蛋白质含量,对两种材料进行了转录组测序,并参考GO Ontology、KEGG等数据库对差异基因和转录因子进行功能分类与富集分析。【结果】四倍体的叶绿素含量、可溶性糖含量和可溶性蛋白质含量均显著高于二倍体植株,叶片相对含水量在两种材料中没有显著差异。二倍体与四倍体酸枣共1 329个基因具有显著差异,GO功能分析表明这些差异基因主要参与生长发育和胁迫耐受相关功能。KEGG通路分析显示,大部分差异基因富集在碳水化合物代谢、氨基酸代谢和信号传递过程,其中16个关键基因参与糖和氨基酸的代谢与转运过程,如SPS2、GAE6和PGDH3,这些基因在四倍体中具有较高的表达量;23个基因参与激素信号传导通路,其中与生长素传导、应答相关的基因如ARG7,GH3.6和IAA26在四倍体植株中表达量较高,而与油菜素内酯合成酶(CYP)、乙烯不敏感蛋白(EIN)相关的基因在四倍体植株中表达量较低。在对二倍体与四倍体差异转录因子的分析中发现,四倍体MYB转录因子家族基因表达量高于二倍体。【结论】四倍体叶片叶绿素含量高是植株叶色加深的原因之一,可溶性糖、可溶性蛋白质含量高为四倍体叶片变大、茎加粗提供了更多能源物质。参与糖、氨基酸代谢和激素合成、信号传导的关键基因在二倍体与四倍体中差异表达,可能与四倍体植株体内能源物质含量高、生长势强的性状相关;具有渗透调节功能的基因在四倍体中表达量较高暗示着四倍体可能具有较强的抗性。进一步对差异转录因子的分析表明,MYB转录因子在二倍体与四倍体植株中的差异表达可能会导致植物在生长发育、形态建成和抗逆过程中的差异,但二者的具体差异性状还需进一步的实验研究。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 户秋稳1  吕炜1  张蜀宁1*  李艳艳2  侯喜林1  刘惠吉1  
摘要:[目的]用秋水仙素来诱导晚抽薹不结球白菜二倍体,以期创制抽薹晚、优质、高产的不结球白菜四倍体新种质。[方法]采用 1.5 和 2.0 g·L-1秋水仙素分别对二倍体不结球白菜茎尖生长点进行 4 次和 6 次点滴处理,并鉴定筛选同源四倍体。利用实时荧光定量(RT-PCR)检测抽薹基因的表达,测定营养品质和农艺性状筛选晚抽薹且优质四倍体材料。[结果]用 2.0 g·L-1秋水仙素处理二倍体茎尖 6 次的效果最好,四倍体的诱导率为 5.90%;与二倍体相比,四倍体的叶片、花器、角果和种子都呈现明显差异。流式细胞仪鉴定二倍体(2n=2x=20)DNA 含量为 200,四倍体(2n=4x=40)为...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 户秋稳  吕炜  张蜀宁  李艳艳  侯喜林  刘惠吉  
[目的]用秋水仙素诱导晚抽薹不结球白菜二倍体,以期创制抽薹晚、优质、高产的不结球白菜四倍体新种质。[方法]采用1.5和2.0 g·L-1秋水仙素分别对二倍体不结球白菜茎尖生长点进行4次和6次点滴处理,并鉴定筛选同源四倍体。利用实时荧光定量(qRT-PCR)技术检测抽薹基因的表达,测定营养品质和农艺性状,筛选晚抽薹且优质四倍体材料。[结果]用2.0 g·L-1秋水仙素处理二倍体茎尖6次的效果最好,四倍体的诱导率为5.90%;与二倍体相比,四倍体的叶片、花器、角果和种子都呈现明显差异。流式细胞仪鉴定二倍体(2n=2x=20)DNA相对含量为200,四倍体(2n=4x=40)为400。四倍体抽薹时间...
[期刊] 林业科学  [作者] 董琳琳   张国成   刘立辉   计家宝   白向东   顾宸瑞   姜静   刘桂丰  
【目的】基于白桦四倍体与二倍体杂交产生的子代(三倍体)测定分析结果,选出生长与材质性状兼优的杂交优势亲本及组合,为种子园的亲本选配提供理论依据。【方法】以白桦测交系交配设计获得的40个杂交组合10年生杂种试验林为研究对象,测定各杂交组合的生长、材性和保存率等性状,利用SPSS22.0、WinNCⅡ等软件对各性状进行方差、配合力及效应值分析,采用隶属函数法并结合主成分分析综合评价各性状,选择杂交优势亲本及组合。【结果】1)不同亲本杂交组合间的生长、材性和保存率等性状方差分析显示(除木材密度和保存率性状外),7个性状的组合间方差、配合力方差均达显著或极显著水平;7个性状的变异系数在6.34%~55.29%之间,广义遗传力和狭义遗传力分别在38.83%~73.72%和22.23%~68.48%之间,其中部分性状家系间变异较大、遗传能力较强。2)树高、胸径、材积、木质素含量和纤维长宽比5个性状的一般配合力(GCA)效应以及特殊配合力(SCA)效应差异均达显著或极显著水平。双亲的加性效应对胸径、材积等生长性状以及纤维素、半纤维素、纤维长宽比等材质性状具有明显影响,母本的加性效应远大于父本,且占主导地位,各性状中母本的方差分量在43.11%~94.15%之间,父本在0~4.86%之间。由特殊配合力效应分析发现,SCA仅对木质素含量和树高的控制较强,分别为52.03%和44.55%。3)根据亲本及杂交组合间各性状配合力效应值,采用隶属函数并结合主成分分析对各亲本及组合进行综合评价发现,父本F4、F7和F10为优异父本,Q19和Q103为生长或木材纤维性状的优异母本,其中Q103的材积遗传增益达8.60%。选择Q33×F1、Q103×F10、Q13×F12和Q19×F11为生长或纤维性状的优异杂交组合,其中Q33×F1和Q103×F10组合的材积遗传增益分别为16.33%和15.62%。【结论】白桦母本加性效应为本研究性状表现的主要贡献者;依据白桦三倍体家系生长、材性的各配合力效应值,最终选出优异父本3个(F4、F7和F10)、母本2个(Q19和Q103),优良杂交组合4个(Q33×F1、Q103×F10、Q13×F12和Q19×F11)。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 孙敏红  张蜀宁  
以6个同源四倍体和2个二倍体不结球白菜(Brassica campestrisssp.chinensisM ak ino)的子叶为外植体,正交设计筛选不定芽诱导优化培养基,测定二、四倍体不结球白菜子叶内源生长素IAA(吲哚-3-乙酸)和细胞分裂素ZRS(玉米素核苷类)的含量及ZRS/IAA比值大小,探讨再生能力与内源激素的相关性。结果表明:四倍体不定芽再生率变化范围是33.4%~83.3%,2个二倍体材料的最高再生率分别是33.3%和80.3%。四倍体白菜内源激素ZRS和IAA含量高于其相应二倍体白菜。用2种方法确定四倍体材料再生能力与内源激素含量的相关性,结果表明再生能力与ZRS/IAA比值...
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