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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王雅美 张蜀宁 郑于莉 徐丽娟 侯喜林
对低温胁迫下二、四倍体不结球白菜的抗寒基因表达及相关生理生长特性进行比较,为耐寒四倍体品种的生产提供理论依据。对二、四倍体不结球白菜进行(4±1)℃低温处理,比较其在0、2、6、12和24 h时3个抗寒相关基因CBF3、COR15和ZAT10的表达差异以及保护酶活性和渗透调节物质含量,在田间自然条件下比较其光合特性、冻害指数和农艺性状。结果表明:抗寒相关基因CBF3、COR15和ZAT10在四倍体叶片中的表达量显著高于二倍体。低温胁迫下,二、四倍体的保护酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性及渗透调节物质含量变化均表现为先升后降的单峰曲线,12 h达到峰值,...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
郑金双 张蜀宁 孙成振 王建军 侯喜林
以二倍体不结球白菜及其同源四倍体为材料,采用常规染色压片法进行核型分析。结果表明:二倍体不结球白菜核型公式为2n=2x=20=10m+8sm(2SAT)+2st,其中第1、2、3、4、6对为中着丝粒染色体,第5、7、8、9对为近中着丝粒染色体,第10对为近端着丝粒染色体,第5对染色体具有随体,核型类型属于2A型,为基本对称型;四倍体不结球白菜核型公式为2n=4x=20m+16sm(4SAT)+4st,核型特征与二倍体基本一致,仅染色体长度变异范围与二倍体相比略大。表明四倍体不结球白菜是由其二倍体加倍得到的,为同源四倍体。
关键词：
不结球白菜 二倍体 四倍体 核型分析
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
户秋稳1 吕炜1 张蜀宁1* 李艳艳2 侯喜林1 刘惠吉1
摘要：[目的]用秋水仙素来诱导晚抽薹不结球白菜二倍体，以期创制抽薹晚、优质、高产的不结球白菜四倍体新种质。[方法]采用 1.5 和 2.0 g·L-1秋水仙素分别对二倍体不结球白菜茎尖生长点进行 4 次和 6 次点滴处理，并鉴定筛选同源四倍体。利用实时荧光定量(RT-PCR)检测抽薹基因的表达，测定营养品质和农艺性状筛选晚抽薹且优质四倍体材料。[结果]用 2.0 g·L-1秋水仙素处理二倍体茎尖 6 次的效果最好，四倍体的诱导率为 5.90%；与二倍体相比，四倍体的叶片、花器、角果和种子都呈现明显差异。流式细胞仪鉴定二倍体(2n=2x=20)DNA 含量为 200，四倍体(2n=4x=40)为...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
户秋稳 吕炜 张蜀宁 李艳艳 侯喜林 刘惠吉
[目的]用秋水仙素诱导晚抽薹不结球白菜二倍体,以期创制抽薹晚、优质、高产的不结球白菜四倍体新种质。[方法]采用1.5和2.0 g·L-1秋水仙素分别对二倍体不结球白菜茎尖生长点进行4次和6次点滴处理,并鉴定筛选同源四倍体。利用实时荧光定量(qRT-PCR)技术检测抽薹基因的表达,测定营养品质和农艺性状,筛选晚抽薹且优质四倍体材料。[结果]用2.0 g·L-1秋水仙素处理二倍体茎尖6次的效果最好,四倍体的诱导率为5.90%;与二倍体相比,四倍体的叶片、花器、角果和种子都呈现明显差异。流式细胞仪鉴定二倍体(2n=2x=20)DNA相对含量为200,四倍体(2n=4x=40)为400。四倍体抽薹时间...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张咪 宋莹 王夏 刘金平 张昌伟 李英 侯喜林 柳李旺 刘同坤
[目的]本文旨在创制高产抗病的四倍体不结球白菜‘五月慢’新材料。[方法]利用2 g·L~(-1)秋水仙素溶液处理不结球白菜‘五月慢’二倍体幼苗子叶生长点，通过形态学、细胞学、解剖学、流式细胞仪分析等方法鉴定筛选出同源四倍体植株，并对二、四倍体植株的形态学指标、农艺性状、营养品质、光合特性、抗病能力等方面进行比较分析。[结果]与二倍体相比，四倍体植株开展度降低，叶片的长宽比明显变小，叶型扁圆形，叶柄显著增厚，种子、花器官、种荚等明显增大；叶片气孔变大，气孔密度减小；花粉粒呈现矩形、菱形等不规则形状；细胞染色体数目和DNA荧光强度为二倍体的2倍；可溶性糖、纤维素含量显著性提高，硝态氮、叶绿素含量显著减少，可溶性蛋白、有机酸含量无显著变化；光饱和点、光补偿点、暗呼吸速率分别增加了13.47%、24.02%、12.12%,光合能力更强；相同培养条件下灰霉菌表达量更低，抗病性更强。[结论]获得了具有高产、抗病潜力的同源四倍体不结球白菜‘五月慢’新材料。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孙敏红 张蜀宁
以6个同源四倍体和2个二倍体不结球白菜(Brassica campestrisssp.chinensisM ak ino)的子叶为外植体,正交设计筛选不定芽诱导优化培养基,测定二、四倍体不结球白菜子叶内源生长素IAA(吲哚-3-乙酸)和细胞分裂素ZRS(玉米素核苷类)的含量及ZRS/IAA比值大小,探讨再生能力与内源激素的相关性。结果表明:四倍体不定芽再生率变化范围是33.4%~83.3%,2个二倍体材料的最高再生率分别是33.3%和80.3%。四倍体白菜内源激素ZRS和IAA含量高于其相应二倍体白菜。用2种方法确定四倍体材料再生能力与内源激素含量的相关性,结果表明再生能力与ZRS/IAA比值...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
汤伟华 刘叶琼 张子楠 王金鸽 刘同坤
[目的] 不结球白菜地方品种具有品质优但产量低的特点，利用秋水仙素加倍的方法可以获得高产优质的同源四倍体不结球白菜新种质。[方法] 以浓度0.2%的秋水仙素诱变剂滴定处理二倍体不结球白菜子叶生长点，经过形态学、解剖学、细胞学鉴定及流式细胞仪倍性分析，筛选诱变植株，成功获得同源四倍体不结球白菜新材料，并比较分析二、四倍体农艺性状指标、营养品质、光合特性、光合作用相关基因表达量差异。[结果] 结果表明，四倍体株型呈现出聚拢型，叶片趋于近圆形，花器官明显变大；叶表皮气孔变大，相同面积下气孔密度减小；花粉粒不同于二倍体规则的椭圆形，呈现出明显不规则形；根尖细胞内染色体数目为二倍体的两倍；细胞内相对DNA含量为二倍体的两倍；植株的可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、纤维素含量及叶绿素含量比二倍体显著增加，可溶性糖含量达到极显著水平，维生素C含量和硝态氮含量分别比二倍体显著降低；最大光合速率（P_(max)）、光饱和点（LSP）和表观量子效率（AQY）与二倍体相比增长了60.46%、54.10%和8.33%，光合能力更强；调控光合作用多种基因相对表达量显著高于二倍体。[结论] 本研究成功获得了具有高产、优质潜力的同源四倍体不结球白菜新材料。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
韩业飞 张蜀宁 张宇 侯喜林
采用不同浓度的秋水仙素对二倍体不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis)子叶期生长点进行诱导,经过筛选鉴定,选育优质、矮紧型白梗同源四倍体不结球白菜。结果表明:2.0 mg·g-1秋水仙素处理6次获得的同源四倍体植株的加倍率最高,为7.02%。与二倍体相比,四倍体在营养体、气孔、花器、果实上均有显著差异,且株高降低、叶宽增加、叶柄长变短、展开度减小、叶色亮绿、株型束腰紧凑。四倍体的可溶性糖、可溶性蛋白和维生素C含量分别比二倍体显著提高11.14%、25.98%和11.70%。经两代选育,四倍体纯度达到100%,整齐度95%,小区产量比二倍体提高18.10%...
关键词：
秋水仙素 不结球白菜 同源四倍体 选育
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
宋晓然 詹凡玢 王卫民
试验以泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus,Ma)为研究对象,采用PCR技术克隆获得trim63a基因(tripartite motif containing 63,又名肌肉环状指基因1)的cDNA部分序列,生物信息学分析结果显示,Matrim63a基因cDNA的编码序列(coding sequence,CDs)为1 035bp,编码344个氨基酸,与硬骨鱼类相似度较高。采用荧光定量PCR技术检测人工繁殖获得的二倍体(D×D)和四倍体(T×T)胚胎不同发育时期Matrim63a的表达量以及泥鳅二倍体(D)和四倍体(T)成鱼不同组织中Ma-trim63a的表达量,基因表达分析结果显示,Ma-trim63a在泥鳅二倍体和四倍体成鱼肌肉中的相对表达量最高,其次是心脏;Ma-trim63a在泥鳅二倍体和四倍体胚胎的13个发育时期均有表达,但是不同倍性的胚胎表达差异较大。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李妍 王雪花 陈忠文 段伟科 侯喜林 李英
［目的］本文旨在探究逆境下ＢｃＧＭＥ基因与抗坏血酸（Ａｓ Ａ）含量的关系，为培育高品质的不结球白菜品种奠定理论基础。［方法］以不结球白菜‘苏州青’为材料，同源克隆了ＢｃＧＭＥ基因的全长，应用生物信息学分析了其氨基酸序列，通过实时荧光定量ＰｃＲ技术测定了ＢｃＧＭＥ基因在过氧化氢胁迫和水淹胁迫下的表达水平，利用高效液相色谱（ＨＰＬｃ）测定了相应的抗坏血酸含量。［结果］ＢｃＧＭＥ基因包含一个长度为１ １３７ ＢＰ的开放式阅读框（ＯＲＦ），编码３７９个氨基酸。推测其蛋白理论相对分子质量为４２．９７×１０３，理论等电点Ｐ Ｉ值为５．８４，分子式为ｃ１９０７Ｈ２９４９Ｎ５１９Ｏ５７０ｓ２２，属于不稳定蛋白．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
王子欣 齐秀菊 褚玉萍 刘志荣
利用二倍体和四倍体大白菜,通过正反交,连续6年共做52个组合,从1985年的水仙花(四倍体)×后36高(二倍体)和1987年的BP058(二倍体)×水仙花(四倍体)两个组合得到了少量杂交种,经系谱选择并在人工气候室加代,提高孕性,均于第四代基本稳定。1989年将这两个杂交种分别定名为翠宝和翠绿。它们具有多倍体植物叶厚、叶面有泡状突起、蕾大、花大、气孔也大的特点,经染色体镜检,染色体数2n=4x=40。这两个品种生长速度快,生育期80天左右,包球紧实,抗病性强,品质优良,适口性好,耐贮藏运输,亩产7000～7500kg。
关键词：
大白菜 二倍体 四倍体 杂交种 育种
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张娅 黄天虹 张西林 刘同坤 侯喜林 李英
[目的]本文旨在研究不结球白菜BcSERK1基因及其在胚胎发生中的作用。[方法]采用同源克隆的方法从不结球白菜‘二桩白’中克隆到BcSERK1基因全长序列,利用生物信息学分析其结构特征,并与其他物种进行氨基酸序列比对和进化分析,同时利用基因枪介导的方法进行亚细胞定位;利用小孢子培养技术研究不结球白菜‘二桩白’和‘四九菜心’小孢子培养出胚情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析BcSERK1基因在2个品种不同组织和在小孢子胚胎发生早期的表达特征。[结果]BcSERK1含有1个1 878 bp开放阅读框,编码625个氨基酸。与其他物种的氨基酸序列比对和系统进化分析结果显示:BcSERK1在进化过程中保守程度较高,与甘蓝型油菜亲缘关系最近。亚细胞定位结果显示:BcSERK1蛋白定位于细胞膜上。游离小孢子培养结果显示:‘二桩白’出胚率较高,每蕾6.67个胚,而‘四九菜心’不出胚。RT-qPCR结果表明:BcSERK1在2个品种不同组织中均有表达,除根外‘四九菜心’的组织中其表达量均低于‘二桩白’;在小孢子胚胎发生早期,BcSERK1基因在‘二桩白’不同培养时间的表达量均高于‘四九菜心’。[结论]BcSERK1蛋白在进化过程中保守性较高,定位于细胞膜上;SERK1基因在2个不结球白菜品种中的差异表达表明该基因对胚胎发生具有重要作用。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
荣子龙 侯喜林 史公军 肖栋 郝慧楠
采用RT-PCR、5'RACE和3'RACE方法,克隆得到了不结球白菜NJ074晚抽薹基因(BcFLC1)的cDNA全长序列。对BcFLC1基因所编码氨基酸序列的理化性质进行分析推测得到:该基因cDNA全长909bp,包含576bp的开放阅读框,编码191个氨基酸。不结球白菜BcFLC1蛋白功能域预测分析结果表明:该基因为MADS盒基因,其编码蛋白的1～60氨基酸属于MADS盒基因蛋白。荧光定量PCR分析表明:BcFLC1基因在不同生长发育阶段叶片中的表达情况不同,抽薹前高于抽薹后叶片中的表达量。BcFLC1基因在不同部位表达也存在差异,表达量从高到低依次为:叶、茎、花蕾、花和根。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张爱芬 王立 侯喜林 刘同坤 李英
以不结球白菜自交不亲和系03的基因组DNA和柱头cDNA为模板,利用引物SRKF/SRKR扩增获得长度为964 bp和646 bp的SRK基因片段。序列比较分析表明,克隆的基因片段属于SRK基因的激酶域,该序列包含4个外显子和3个内含子,编码215个氨基酸,与芜菁、甘蓝、芥蓝等SRK基因有90%以上的相似性。荧光定量PCR分析结果表明:自交不亲和系03和自交亲和系105不同组织中SRK基因的表达水平存在显著的差异,SRK基因主要在自交不亲和系的柱头中高度表达,自交亲和系中该基因的表达主要分布于叶片、花蕾和柱头组织中。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
胡金良 徐汉卿 刘惠吉 王华
在现蕾期和开花期对二倍体矮脚黄白菜自交、四倍体矮脚黄白莱自交和以四倍体矮脚黄白菜为母本、二倍体矮脚黄为父本杂交的白菜进行胚胎学观察。结果表明，二倍体和四倍体白莱自交的均能正常受精和进行胚胎发育，最终形成正常的种子，但四倍体白菜的受精和胚胎发育均落后于二倍体白菜；四倍体白菜和二倍体白菜杂交的受精和早期胚胎发育正常，但胚乳一般在游离核阶段发生退化，到授粉后１６ｄ，胚乳完全消失．由于胚乳过早解体，胚发育到球形原胚时发生退化，因而无法获得成熟的三倍体种子。
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