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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张丽 秦泽荣 徐镔蕊 刘尚高 尹燕博
利用乳链菌肽抗性菌株中乳链菌肽抗性和乳糖发酵紧密连锁的原理,在含有乳链菌肽、乳糖和溴甲酚紫的选择培养基上,从205个新鲜的牛奶样品中定向筛选乳链菌肽抗性菌株。对筛选到的4株菌分析鉴定结果表明:4株菌均为革兰氏阳性菌,产乳酸,过氧化氢酶试验阴性;通过质粒的抽提和电泳,发现Lactococcuslactissubsp.lactisZL2009,ZL2010,ZL2024,ZL2030分别含有1,7,5,3条质粒带,且4株菌的质粒DAN分子大小不完全相同。
关键词：
乳酸乳球菌 乳链菌肽抗性 定向筛选 鉴定
[期刊] 西南农业学报
[作者]
谭悠久 钟娟 周金燕 谭红
对实验室分离保存的40株毛壳菌菌株代谢产物进行抗真菌活性筛选,5个菌株代谢产物对植物病原真菌具有选择性抑制效果。其中,菌株CH08、CH23发酵液对芒果炭疽菌、苹果炭疽菌、小麦根腐菌有较强的抑制作用;菌株CH16、CH17发酵液对芒果炭疽菌、苹果炭疽病具有较强的抑制作用;菌株CH21发酵液对西瓜枯萎菌、辣椒炭疽菌有较强的抑制作用。经形态学鉴定,CH08、CH16、CH17、CH23为球毛壳菌,CH21为角毛壳菌。
关键词：
抗真菌活性筛选 球毛壳菌 角毛壳菌
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张磊 李林
为获得高效抗除草剂的基因,提高转基因作物的应用能力,本研究使用含硝磺草酮的酪氨酸无机盐培养基(TMSM)平板筛选法,筛选得到一株能够耐受5 000μmol/L硝磺草酮的革兰氏阴性细菌MST-5,经过16S rRNA序列分析鉴定为嗜麦芽窄食单胞菌属(Stenotrophomonas sp.)。根据4-羟基苯丙酮酸双加氧酶(4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase,HPPD)同源基因设计引物,从MST-5中克隆到编码HPPD的基因Sthppd,序列分析发现Sthppd序列长度为1 071bp,编码356个氨基酸。同源比对发现,St HPPD与已报道的HPPD相似性仅为47%～51%。在大肠杆菌中进行原核表达Sthppd并通过Co2+亲和层析纯化获得St HPPD纯蛋白,活性检测表明此蛋白具有4-羟苯基丙酮酸双加氧酶活性,抗性分析显示其对硝磺草酮具有较高的抗性,IC50为15.5μmol/L,同时对其它HPPD抑制剂类除草剂如苯吡唑草酮和二酮腈也有较强抗性,IC50分别达到10.8和28.2μmol/L。St HPPD的最适反应温度为30℃,最适pH为7.0,大部分金属离子和某些化学添加剂严重抑制St HPPD的活性,Fe3+、Mg2+和Urea对St HPPD酶活基本没有影响。综上,St HPPD具备较高硝磺草酮抗性,在构建抗除草剂转基因作物、与HPPD抑制剂类除草剂搭配在相关转基因作物的田间应用中,具有一定价值。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
奚家勤 林碧莲 莫明和 薛超群 王广山 郭建华 方敦煌
烟草内生菌种类丰富,其在烟草病害生物防治中的作用近年来日益受到关注。本文从烤烟品种K326叶片中分离的内生细菌ZY-9-13菌株对供试的6种植物病原真菌均有拮抗作用,表现出对真菌病原菌的广谱抗菌活性。菌株ZY-9-13发酵液对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)、香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cuben)、腐皮镰孢菌(F.solani)、黄瓜枯萎病菌(F.omysporum f.sp.cucumerinum)、小麦赤霉病菌(Gibberella sanbinetti)和立枯丝核病菌(Rhizoctonia ...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
邵铁梅 宋福平 李卓夫 张杰 姜声华 刘大群 黄大昉
通过PCR方法筛选160株苏云金芽孢杆菌,其中94株含有zmaR基因。测定了含zmaR基因的菌株培养物上清液对草生欧文氏杆菌(Erwiniaherbicola)的抑菌活性,结果表明有67株菌有抑菌活性,其中21株抑菌活性较高。经鉴定,抑菌活性较高的G03菌株含有cry1Ac、cry1Aa、cry1Ca和cry2Ab等高毒力杀虫基因,并从G03中克隆了zmaR全长基因,完成了序列测定。该基因编码区为1125bp,由核苷酸序列推导的氨基酸残基组成为375个,分子量为43.5kD,等电点pI4.945。通过载体pET-21b将zmaR基因导入大肠杆菌BL21,可正常表达43.5kD蛋白,并使宿主菌产...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
王欢 丛斌 董辉 钱海涛
以亚洲玉米螟作为供试昆虫,利用生物测定的方法筛选高毒力菌株并对其抗逆性进行了研究。筛选获得2株对亚洲玉米螟具有高胃毒活性的共生菌菌株-X.sp.5-5B和24-6R,对其抗逆性的研究结果表明,50℃处理10min及18W紫外灯照射60min对高毒力菌株的杀虫活性无明显影响。利用生物测定对28个线虫品系的152株共生菌进行了评价,其中共生菌品系5的杀虫活性最高,而且高毒力共生菌菌株具有一定的抗逆性。
关键词：
昆虫病原线虫 共生菌 紫外线,杀虫活性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张荣胜 刘永锋 刘邮洲 罗楚平 刘长河 李美荣 陈志谊
通过离子注入技术对枯草芽孢杆菌生防菌Bs-916突变选育,得到一株拮抗性能比出发菌Bs-916提高15%以上的突变菌株H-74。通过对其抗菌物质的高效液相色谱(HPLC)分析表明,H-74分泌的脂肽类抗菌物质主要是表面活性素。在PDA平板上的水稻纹枯病菌菌丝抑制试验中,它能有效抑制新生菌丝的生长,并使细胞内含物外泄。盆栽控病试验表明,它对水稻纹枯病菌的相对防效达到73.35%。将H-74分泌的脂肽类抗菌物质单喷于水稻植株上,测定与植物抗病相关的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性的变化,发现其对植物抗病相关酶活性表达有明显的诱导作用。结果还显示同时接种脂肽类...
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
邱炜 黄惠琴 叶建军 鲍时翔
从土壤样品中共分离放线菌398株,用纸片法对其进行抗古巴尖孢镰刀菌4号生理小种活性筛选,结果发现共有8株具有活性,其中分离于海南儋州植物园土壤的菌株DA07408活性最强。经形态与生理生化特征、16S rDNA序列测定及其系统发育分析,将菌株DA07408初步鉴定为橄榄产色链霉菌Streptomyces olivochromogenes。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
程心怡 孙正祥 苏应兵 周燚
为筛选对维氏气单胞菌(Aeromonas Veronii)有潜在抑菌作用的菌株，本研究从湖北公安县泥鳅养殖池塘底泥中分离一株细菌J2-2，对其特性进行了研究，并对抑菌活性物质进行了初步分析。结果显示菌株J2-2为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，具有抑菌广谱性，对米尔伊丽莎白菌(Elizabethkingia miricola) 、嗜水气单胞(A. hydrophila)等6种水产病原菌的抑菌直径在9.6～29.5 mm。菌株J2-2的抑菌物质具有较好的酸碱稳定性、热稳定性和蛋白酶K处理的稳定性。电镜结果显示菌株J2-2的发酵产物对维氏气单胞菌的细胞膜结构具有破坏作用。通过LC-MC分析该拮抗细菌可产生至少15种不同的脂肽类化合物如杆菌霉素等。药敏试验结果显示，菌株J2-2除了对氨苄西林、青霉素具有耐药性，对克林霉素中度敏感，对大多数抗生素高度敏感。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
彭开蔓 邓子新 周启
吸水链霉菌应城亚种１０－２２对外源载体ＤＮＡ显示强烈的限制性，来自变铅青链霉菌高拷贝质粒ｐＩＪ１０１的衍生载体ｐＩＪ７０２，能以较低频率转化吸水链霉菌应城亚种１０－２２的衍生菌株Ｑ１５１０。本研究先用质粒ＤＮＡ转化Ｑ１５１０，以获得一些硫链丝菌素的抗性转化子，再对这些混合转化子进行亚硝基胍和吖啶橙的多轮诱变。从经诱变后的单菌落群体中筛选获得６株对Ｃ３１敏感的个体，经鉴定均为限制和修饰基因的双突变子（Ｒ－Ｍ－）。进一步的研究证明，某些本不能转化出发菌株的质粒载体可以转化这些菌株，Ｃ３１能以高频率感染这些衍生菌株；另一个不能感染出发菌株的链霉菌噬菌体Ｒ４，也可以高频率感染这些衍生菌株；Ｃ３１和Ｒ４...
关键词：
限制-修饰 链霉菌 筛选 鉴定
[期刊] 西南农业学报
[作者]
熊艳 张晓喻 李敏 黄春萍 刘刚 张宏
从农田土壤中分离得到1株对多种植物病原真菌有拮抗作用的菌株Loq18,经生理生化及分子鉴定确定为一株枯草芽孢杆菌,其无菌发酵液经硫酸铵沉淀得抗菌粗蛋白。为明确此抗菌粗蛋白的理化性质,研究了温度、pH变化、UV照射、有机溶剂和蛋白酶对抗菌蛋白稳定性的影响。结果表明,该抗菌粗蛋白具有良好的热稳定性,121℃高压灭菌处理20 min后仍具有对照活性的95%以上;对酸碱不敏感,在pH值4～11范围内相对稳定;对紫外线稳定,在紫外光下照射10 h以上时,其活性基本不受影响;经乙醚、丙酮等有机溶剂处理后仍具有对照活性的90%以上;对蛋白酶较稳定。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
谭云 谭著明 沈宝明 申爱荣 刘丽娜
【目的】筛选用于菌根苗接种的高质量红汁乳菇菌株,为提高红汁乳菇产量提供支持。【方法】以10个红汁乳菇菌株(JH1、JH2、JH4、JH5、JH7、JH8、JH10、JH11、JH12、JH13)为研究对象,将菌株分别在PDA和BAF培养基上培养后,测定菌株生长势指标(菌丝生长速度、菌丝生物量);将红汁乳菇液体菌种接种于马尾松幼苗根部合成菌根苗,以不接种为对照(CK),培养210 d后对菌根合成能力(菌根数量、菌根侵染率、菌根化率)和宿主植物生长量(苗高、主根长、地径、干质量)进行测定。对上述9个参数进行相关性分析,并用隶属函数法对菌株性状进行综合评价。【结果】(1)在PDA固体培养基上,以菌株JH1菌丝生长速度最快,达到3.17 mm/d;在BAF液体培养基上,以菌株JH5的菌丝生物量最大,为3.28 g/L。(2)所有菌株均能与马尾松根系形成外生菌根,但菌根形态并不相同。接种红汁乳菇菌株JH5的马尾松苗的菌根数量为45.65个/株,菌根化率为90.67%,菌根侵染率为79.60%,显著高于其他9个菌株,表现出较强的合成菌根苗能力。(3)接种不同红汁乳菇菌株的马尾松苗,在苗高、主根长、地径和干质量等指标上表现各异。接种菌株JH4的马尾松苗高、主根长和干质量表现最优,较对照分别提高24.45%,16.72%和53.33%;接种菌株JH5的马尾松苗地径生长量表现最优,较对照提高5.19%。(4)相关性分析表明,菌丝生物量与菌根化率和菌根苗干质量呈极显著正相关(P<0.01),菌根数量与菌根化率和菌根苗地径呈极显著正相关(P<0.01)。(5)基于隶属函数法的综合评价结果表明,红汁乳菇JH5为适合培育菌根苗的最佳菌株,JH4和JH7为次优菌株。【结论】筛选出1个优良红汁乳菇菌株JH5,该菌株的生长势和菌根苗品质整体表现较好。
关键词：
红汁乳菇 菌根苗 菌根合成 隶属函数法
[期刊] 华北农学报
[作者]
江诗洋 黎冬华 张艳欣 王林海 高媛 张秀荣
为鉴定芝麻种质对不同病源区茎点枯病原菌的抗性差异，用来源于河南南阳、河南平舆和湖北武汉３个病区的芝麻茎点枯菌株，采用牙签接种法于芝麻生长苗期对３０份芝麻种质材料进行接菌试验。结果显示：平舆菌株接种的供试材料发病最严重，３０份供试材料中共有２３份材料的病斑长度均值大于南阳和武汉菌株接种引起的病斑长度值，感病种质所占比例较大，鉴定出４份抗平舆菌株且与其他材料差异显著的抗性种质，而未发现对南阳菌株和武汉菌株表现抗性且差异显著的抗性种质。聚类分析表明：由３种菌株接种的供试材料中病斑长度１０ ｃｍ以下的种质都聚在Ⅰ类，大于１０ ｃｍ的都聚在Ⅱ类，可视病斑长度１０ ｃｍ为抗性与敏感之间的分界线；对南阳和武．．．
关键词：
芝麻 茎点枯病 抗病性 鉴定
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈武 彭曙光 周清明 黎定军 罗宽
采用75%乙醇沉淀、阴离子交换色谱层析和阳离子交换色谱层析等方法,分离并纯化侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterospours)2-Q-9菌株外泌抗菌肽BL2Q9。结果表明,BL2Q9的相对分子质量为7 800,等电点为10.2。Edman降解测序发现其N末端封闭,串联质谱测序结果表明其与细菌第Ⅳ类鞭毛合成蛋白pilQ的前体蛋白以及转录抑制子CodY蛋白的部分序列相似,但与已知抗菌肽的序列相似性较低。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
赵春燕 王源 孟晓曦 孙军德
根据乳链菌肽编码基因、乳链菌肽抗性基因和蔗糖发酵基因紧密连锁的原理,筛选乳链菌肽产生菌。将新鲜牛奶样品涂布在添加乳链菌肽、蔗糖及溴甲酚紫的选择培养基上,定向筛选乳链菌肽产生菌。对筛选到的乳酸链球菌肽菌株进行了生理生化指标鉴定以及发酵产物的抑菌性质研究。结果表明:该菌株属于乳酸乳球菌乳酸亚种,其发酵产物对多种革兰氏阳性菌有抑制作用,对革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌无抑制作用,并且在低pH值条件下对热稳定,在高盐浓度下抑菌效果稳定。
关键词：
乳链菌肽 筛选 抑菌作用
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