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[期刊] 华北农学报
[作者]
柳荣 张中庸 张天翔 付金凤 雷钧
由于雄性配子（精子）有性染色体的差异，哺乳动物Ｘ、Ｙ精子在质量或密度上存在着微小的差别。为了突出这微小的质量差，实验先将两性精子共有的顶体和尾部都去掉，然后再将精子细胞核在氯化铯密度梯度条件下离心，成功地将乳牛精子细胞核分成明显的两个区带。
关键词：
乳牛,X-精子,Y-精子,细胞核,分离
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
史彬林 李如治 黄昌澍 林全曾 金穗华
分别在热应激和非热应激期间对6头种公牛和40对母女牛采血,测定红细胞钾的遗传性,并用其他耐热性指标检验红细胞钾作为耐热性选择指标的遗传可靠性。结果,红细胞钾的遗传力,用公牛内半同胞法估计为0.248,用公牛内母女回归法估计为0.387。双亲协同遗传效应较单亲明显。双亲红细胞钾对女儿红细胞钾、直肠温度、呼吸率、血红蛋白、皮质醇和产奶量均有一定影响,红细胞钾作为耐热性选择指标是可靠的。
关键词：
乳牛 耐热性 红细胞 钾 遗传性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
侯思名 张薇 白现广 钟巧芳 高月芬 黄兴奇 程在全
药用野生稻是中国最具利用价值的野生稻资源之一,具有许多优良的性状和有利基因,是改良栽培稻培育新品种的宝贵基因库,而其CC基因组的优良基因有望以大片段形式通过B IBAC等载体转化到栽培稻中。B IBAC文库不仅能作为大片段基因组文库的载体,而且能通过根癌农杆菌介导将克隆片段导入植物基因组直接进行转化,可用于筛选分离基因等研究。如何获得基因组DNA大片段非常关键,本研究采取琼脂糖包埋基因组的方法获得大片段DNA,并对其中的一些步骤进行了优化,为构建药用野生稻B IBAC文库打下了很好的基础,值得在其它植物类似研究中参考。
[期刊] 华北农学报
[作者]
王郁铨 纪玉忠 李召虎
利用食荚豌豆核不育突变体选育出育性稳定的细胞核雄性不育两用系93002AB,该两用系生育期92 d,株高98.3 cm,12~13节位现蕾,1~3个有效分枝,白花,圆荚,无限生长习性,种子绿色皱粒,百粒重30.49 g。
关键词：
食荚豌豆 核不育两用系 育种
[期刊] 中国农业科学
[作者]
马帆 周宇 高亚可 朱鹏 雷小灿 刘庆友 石德顺
【目的】探讨在水牛中增殖细胞核抗原(PCNA)参与卵泡发生的时期及其在卵巢组织不同时期卵泡中的表达定位;【方法】采用石蜡切片结合免疫组化的方法对PCNA在卵巢组织中进行定位,利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)技术检测PCNA在腔前卵泡中的表达情况。【结果】免疫组化结果显示:原始卵泡中的卵母细胞能检测到PCNA的表达,但颗粒细胞并未观察到PCNA的免疫染色;初级卵泡到次级卵泡,卵母细胞和颗粒细胞中均可检测到PCNA的表达,且在颗粒细胞中的表达有增强的趋势;有腔卵泡中,颗粒细胞、卵泡膜细胞及包围卵母细胞的卵丘细胞中都能观察到很强的免疫染色。定量表达检测结果显示:PCNA在原始卵泡、初级卵泡及...
关键词：
水牛 PCNA 卵巢定位 定量表达
[期刊] 林业科学研究
[作者]
冯锦霞 王敏杰 闫伟
本文采用ITS序列分析方法和ITS-RFLP分子标记方法对内蒙古大青山地区分离获得的27个乳牛肝菌属(Suillusspp.)真菌菌株进行了分子鉴定和遗传关系研究。通过ITS序列比对鉴定出SP1、SP2、SP3、SP4、SP5、SP6、SP7、SP8、SP9、SF1、SF2、SF3、P.Lac-1、P.Lac-2、3′、3″、3#菌株属于褐环乳牛肝菌(Suillus luteus)。27株乳牛肝菌属真菌分为3个遗传类型,且每个遗传类型在分类上属于同一个种。樟Ⅱ和1"与其余菌株的遗传距离较大,其原因可能是宿主和生境的影响。序列分析方法能够更准确地分析出遗传差异,但ITS-RFLP方法更简单、实用...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
曹俊伟 马利兵 张弛 毕聪明 赛务加甫 舒建洪 华松 张涌
以牛外耳皮肤成纤维细胞为核供体细胞,比较了不同同步化诱导方式(血清饥饿法与接触抑制法)、供体细胞冷冻与否、供体动物性别与年龄等因素对体细胞核移植效率的影响。结果表明,接触抑制法处理的供体细胞核移植胚囊胚率显著高于饥饿法(P<0.05);未冷冻的供体细胞核移植胚囊胚率显著高于冷冻供体细胞(P<0.05);成年母牛供体的囊胚率显著高于成年公牛(P0.05)。试验表明,以接触抑制法诱导未冷冻成年母牛外耳皮肤成纤维细胞为核供体,有利于核移植胚囊胚的发育。
关键词：
牛 供体细胞 体细胞核移植 胚胎发育
[期刊] 华北农学报
[作者]
贾瑞贞 李煜 杨利军 黄翔华
研究了牛体细胞核移植过程的去核方法、融合条件等对重构胚发育的影响,旨在探索一种简化的核移植操作程序。结果表明,添加FSH,LH,最高成熟率为81.7%。在电压为2.6 kV/cm时,融合率为93.96%。激活后重构胚在压制的WOW内进行培养,采用半卵法去核的卵裂率和8-细胞发育率分别为61.2%和3.27%,盲切法去核的卵裂率和8-细胞发育率分别是70.8%和7.56%。
关键词：
体细胞 核移植 徒手克隆 牛
[期刊] 华北农学报
[作者]
严慧玲 范妍芹 严立斌 赵付江 周龙海
以甜椒隐性细胞核雄性不育两用系AB91为材料,采用混合集群分析法(BSA)构建了不育池与可育池。利用SRAP分子标记技术,筛选了225对SRAP引物组合及1 393对EcoRⅠ和MseⅠ引物组合,获得了与隐性核不育基因连锁的2个SRAP标记:E37M39、E44M93,片段长度约为200 bp和500 bp,与育性基因的遗传距离为6 cm和12 cm。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张慧 张淑江 武剑 李菲 章时蕃 王晓武 张新梅 孙日飞
【目的】筛选大白菜细胞核隐性雄性不育(RGMS)育性基因(Mf)的连锁标记,通过定位该基因,为克隆雄性不育基因打下基础。【方法】939A不育系与YQD56A杂交F1S4后代为试材,利用混合分组分析法(BSA),应用SRAP和SRAP-AFLP标记技术筛选引物1256对。【结果】获得与大白菜细胞核隐性雄性不育恢复基因连锁的标记2个,PM8K4和Me2M49,与恢复基因的遗传距离分别为2.98cM和10.92cM。通过调查PM8K4标记在大白菜DH作图群体中的多态性,将该基因定位在A8连锁群,即大白菜第9染色体。【结论】标记PM8K4可以在苗期对大白菜细胞核雄性不育性状进行标记辅助选择。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
杨光圣 傅廷栋 马朝芝 杨小牛
甘蓝型油菜波里马细胞质雄性不育与隐性细胞核雄性不育受２套完全不同的基因系统控制。所被研究的波里马细胞质雄性不育的保持系和恢复系均带有隐性细胞核雄性不育的２对主效恢复基因Ｍｓ１和Ｍｓ２。２个隐性细胞核雄性不育系均是波里马细胞质雄性不育的保持系，不带有主效恢复基因Ｒｆｃ，但带有一定数目的温度敏感基因Ｔｓ。Ｍｓ１或Ｍｓ２与Ｒｆｃ是独立遗传的
[期刊] 水产学报
[作者]
郑倩 乔亚明 毕燕会 周志刚
在人工培养条件下，海带配子体能够进行有丝分裂以形成无性繁殖系（克隆）。但目前对其配子体克隆有丝分裂的细胞学特征鲜有报道。本实验首先制备海带配子体石蜡切片，利用免疫荧光技术，结合DAPI染色，获得其核分裂各期的细胞结构变化图像。通过DAPI染色，清晰展示出不同分裂期核大小及形态的变化；通过免疫荧光技术，成功观察到由中心体发射出的纺锤丝及“钟罩”状纺锤体。随后，制备海带配子体的超薄切片，透射电镜下，于细胞板的形成位置，观察到由质膜内陷产生的向内生长的分裂沟。分裂沟的最前端呈现封闭的弯曲状，其中无或仅少量细胞壁成分，以促成向心式生长，直至最后接触、融合和形成新的细胞壁，完成胞质分裂。最后通过压片法制备染色体，苏木素染色后利用DAPI进行复染，获得配子体完整细胞的染色体图像，从而进一步明确海带配子体具有31条染色体。本实验首次获得海带配子体有丝分裂完整过程（核分裂和胞质分裂）的图像和结构特征，同时完成海带配子体完整细胞的核型分析。这些结果为海带细胞遗传学研究提供了更多准确数据，也为褐藻胞质分裂方式及机制的探讨提供了新的材料和证据。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
祁金玉 尹大川 宋瑞清
为研究外生菌根真菌褐环乳牛肝菌(Suillus luteus)对樟子松苗木耐盐性的影响,采用打孔灌根的接种方法对樟子松苗木接种褐环乳牛肝菌,用盆栽试验研究不同含盐量(0.1g·kg-1和0.2g·kg-1NaCl)胁迫10d后褐环乳牛肝菌对樟子松苗木的菌根侵染情况以及樟子松苗木针叶电导率、丙二醛、保护酶活性、可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸等生理指标的变化,以相同浓度盐胁迫下不接种褐环乳牛肝菌的樟子松苗木为对照。结果表明:试验选用的不同浓度NaCl胁迫,并未影响樟子松外生菌根的合成。接种褐环乳牛肝菌樟子松苗木不同盐浓度处理间苗高、地径、鲜重、干重差异不显著,与不接种樟子松苗木盐胁迫的苗高、鲜重、干重差异显著,地径无显著性差异。接种褐环乳牛肝菌樟子松苗木针叶的相对电导率低于不接种苗木,盐胁迫下接种处理与不接种处理间差异显著;盐胁迫下不接种苗木丙二醛含量高于接种苗木92%以上;盐处理中,接种褐环乳牛肝菌樟子松苗木过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性均高于不接种处理,增幅分别为10.70%～407.69%,84.45%～158%,4.79%～8.57%;盐胁迫增加了苗木可溶性糖、可溶性蛋白含量,可溶性糖增加13.20%～29.53%,可溶性蛋白增加9.64%～13.43%;接种处理降低了苗木脯氨酸含量,降低幅度为18.24%～25.30%。可见,外生菌根菌褐环乳牛肝菌与樟子松形成菌根后提高了樟子松苗木对NaCl的耐受性。
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
李快芬 刘海燕 丁贵杰
【目的】探讨外生菌根真菌增强马尾松耐铝性的机制，为马尾松抗铝机理研究提供理论依据。【方法】采用水培法，设置不同Al3+浓度处理（0、0.2、0.4、0.8、1.2 mmol·L-1），测定2种马尾松幼苗的生长、渗透调节物质、丙二醛、叶绿素含量和抗氧化酶活性。【结果】1）铝胁迫抑制马尾松幼苗的生长，接种褐环乳牛肝菌（简称Sl）显著促进了马尾松幼苗高生长和生物量的积累。2）与未接种相比，接种Sl降低了丙二醛（MDA）含量，并随Al3+浓度的增加呈先降后升再降的趋势；增加了过氧化物酶（POD）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性，分别在Al3+浓度为0.2、0.4 mmol·L-1时增幅最大。3）与未接种相比，接种Sl显著增加了马尾松幼苗的叶绿素含量，在0.2 mmol·L~(-1)时增幅最大，达50.88%，之后随Al~(3+)浓度的增加呈先增后降的趋势。Al~(3+)浓度为0.2 mmol·L-1时，接种Sl的马尾松幼苗叶绿素含量较无铝处理增加了108.06%。4）与未接种相比，接种Sl显著降低了马尾松幼苗叶片中可溶性糖含量和脯氨酸含量（0.4 mmol·L~(-1)除外），均在0.2 mmol·L~(-1)时降幅最大，之后随Al~(3+)浓度的增加总体呈先降后升的趋势；增加了对可溶性蛋白的积累，在1.2 mmol·L~(-1)时促进作用最大，较无铝处理增加了30.13%。另外，MDA与POD活性、脯氨酸、可溶性糖呈极显著正相关（P <0.01），其中与可溶性糖的相关性最高，达0.775;SOD与叶绿素呈极显著正相关（P <0.01），与脯氨酸和可溶性糖呈极显著负相关（P <0.01）。【结论】在一定浓度范围内，接种Sl显著增强宿主植物的酶活性，改善叶片光能利用效率和渗透物质含量，增强其抗铝性，进而促进菌根化马尾松幼苗的生长。Al~(3+)浓度为0.2 mmol·L~(-1)时促进作用最大。
关键词：
马尾松 褐环乳牛肝菌 铝浓度 生理
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
吴俊波 杨璐茜 曹立朋 田宇 杜宁宁 金一
【目的】探究获能和低温冷冻对猪精子细胞骨架中微管蛋白和肌动蛋白表达量的影响。【方法】利用SDS-PAGE、Western blot技术,分析获能和低温冷冻(-80和-196℃)后猪精子总蛋白质种类以及猪精子细胞骨架微管蛋白和肌动蛋白表达量的变化。【结果】低温处理后,猪精子总蛋白质的种类与新鲜精子相比发生变化,而获能处理后几乎没有差异。低温冷冻导致猪精子细胞骨架微管蛋白和肌动蛋白的表达量较新鲜精子下降,且-196℃冷冻组肌动蛋白的表达量要略高于-80℃冷冻组,但二者微管蛋白的表达量基本没有差异。获能处理后猪精子肌动蛋白表达量略有下降,而微管蛋白表达量基本没有变化。【结论】低温冷冻处理对猪精子总蛋...
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