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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 赵欢欢  WANTANA Sinsiri  黄继光  吴娇  张卫云  周利娟  
用MTT法测定20种泰国植物乙醇提取物对斜纹夜蛾(SpodopTera liTura)卵巢细胞系Sl-1的增殖抑制作用,用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,用流式细胞术测定细胞线粒体膜电位变化。结果表明:5种植物(姜(Zingiber officinale roScoe)、高良姜(alpinia galangl(l.)Willd.)、印楝泰国变种(aZadirachTa indica a.JuSS var.SiaMenSiS valeTon)、姜黄(curcuMa longa dennST)、泰国青柠(ciTruS hySTrix dc))乙醇提取物的细胞增殖抑制效果较好,抑制率明显大于阳性对照...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王玉健  胡林  张志祥  徐汉虹  廖美德  廖绍裕  
【目的】研究光敏剂α-三联噻吩(α-terthienyl,α-T)对斜纹夜蛾(Spodoptera litura,SL)细胞的毒杀活性及其机理。【方法】MTT法测定α-T对离体培养的SL细胞的细胞毒力,并与鱼藤酮进行比较。用硫代巴比妥酸(TBA)法测定细胞内丙二醛(MDA)的生成量,5,5′-二硫代双-(2-硝基)苯甲酸(DTNB)法测定细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)的相对含量,通过透射电子显微镜观察α-T对SL生物膜及细胞器的影响。【结果】光活化后的α-T对SL细胞48h的IC50值为0.21μg·ml-1,而鱼藤酮为12.25μg·ml-1。同时发现α-T光照处理后细胞内MDA生成量与药剂...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王玉健  张志祥  徐汉虹  廖美德  张前锋  
【目的】研究α-三联噻吩(α-T)对斜纹夜蛾(Spodoptera litura)SL细胞线粒体膜电位及细胞周期的影响。【方法】通过Rhodamine123染色和流式细胞术(flow cytometry,FCM)研究α-T处理SL细胞24h和48h后细胞线粒体膜电位的变化,并通过PI染色和FCM,测定α-T处理SL细胞24h和48h后细胞周期各时相百分率的变化。【结果】光活化后的α-T处理SL细胞24h后,0.0625μg·mL-1浓度和0.1250μg·mL-1浓度处理组细胞线粒体膜电位的变化幅度不大,而0.5000μg·mL-1浓度处理组细胞线粒体膜电位明显升高,48h后高浓度处理组(1....
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 赵海珍  张志祥  廖美德  胡珊  徐汉虹  
以80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL浓度的丙环唑处理斜纹夜蛾(Spodoptera litura)细胞,48 h后细胞中蛋白质含量分别降低了95.39%、89.87%、61.30%、35.79%。以每虫0.5μg剂量的丙环唑注射斜纹夜蛾4龄幼虫,处理后48 h,试虫血淋巴总糖量及蛋白质含量分别降低了20.11%、12.12%;每虫1.0μg剂量下,则分别降低了51.94%、43.23%;每虫0.5μg和1.0μg剂量的丙环唑注射处理后,斜纹夜蛾幼虫体重显著降低。结果表明,丙环唑对斜纹夜蛾细胞和幼虫的生理指标均有影响。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 黄劲飞  贾建文  罗建军  翁群芳  钟国华  
通过倒置显微镜观察斜纹夜蛾细胞凋亡小体,采用MTT法测定细胞增殖抑制作用,并使用流式细胞仪检测细胞周期时相,研究了骆驼蓬碱、喜树碱、蓖麻碱、苦参碱、博落回碱和烟碱对斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1的作用方式和细胞毒理。结果表明:骆驼蓬碱5.0μg/mL、20.0μg/mL和喜树碱0.5μmol/L、1.0μmol/L处理后48~60 h,斜纹夜蛾离体培养细胞系SL-1表现出明显的细胞凋亡诱导作用,处理后12~48 h,明显抑制SL-1细胞增殖,流式细胞仪检测显示细胞阻滞于G2/M期;博落回碱和蓖麻碱5.0μg/mL、20.0μg/mL对SL-1具有细胞增殖抑制作用,以20.0μg/mL处理具有细...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 金丰良  董小林  许小霞  任顺祥  
【目的】克隆、序列分析和原核表达编码斜纹夜蛾(Spodoptera litura)GOBPⅠ(SlGOBPⅠ)的cDNA。【方法】采用同源克隆结合RACE的方法克隆SlGOBPⅠ基因的cDNA序列,并在pET-32a/BL21(DE3)系统中进行原核表达。【结果】从斜纹夜蛾触角中克隆了GOBPⅠ的cDNA序列(GenBank登录号为EU086372),序列分析表明,SlGOBPⅠ开放阅读框序列为495bp,编码164个氨基酸,分子量为19.3kD,等电点为5.54。SlGOBPⅠ具有昆虫气味结合蛋白的典型特征,即氨基酸序列中具有6个半胱氨酸残基,呈酸性。SlGOBPⅠ氨基酸序列与鳞翅目昆虫的气...
[期刊] 草业科学  [作者] 李晶  刘锦霞  李娜  丁品  杜文静  武建荣  张建军  
黄帚橐吾(Ligularia virgaurea)是一种在甘南草原上广泛分布的毒杂草,但同时其乙醇提取物有很强的生物农药活性,具备开发成为生物农药的潜力。本研究通过昆明小鼠(Mus musculus)的经皮、经口急性毒性试验对黄帚橐吾乙醇提取物的安全性进行评估。结果显示,黄帚橐吾乙醇提取物对小鼠的经皮急性毒性半致死剂量LD50>30g·kg-1,经口急性毒性LD50为6.983 1g·kg-1,均符合低毒农药登记的毒性标准,可以按照低毒农药进行开发应用。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王庆涛  高琛  刘畅  赵红琼  郝智慧  
对比分析盐补骨脂不同种提取物对3种细胞的毒性,本研究使用HK-2细胞、Hep-G2细胞及LLC-PK1细胞作为评价模型,采用CCK-8方法检测盐补骨脂水、醇提取物及其主要成分对3种细胞活力的影响。结果表明:1)盐补骨脂乙醇提取物对HK-2、Hep-G2及LLC-PK1细胞毒性均强于其水提取物。2)补骨脂甲素、补骨脂乙素、补骨脂定、异补骨脂定、甲基补骨脂黄酮A对HK-2、Hep-G2细胞毒性较强,且补骨脂甲素对HK-2细胞和Hep-G2细胞毒性要强于其他主要成分,而补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂宁对HK-2、Hep-G2细胞毒性相对较小。综上,盐补骨脂水提取物、乙醇提取物对HK-2细胞、Hep-G2细胞及LLC-PK1细胞均具有一定的细胞毒性,且盐补骨脂乙醇提取物毒性更大;补骨脂甲素、补骨脂乙素、甲基补骨脂黄酮A、补骨脂素、异补骨脂素、异补骨脂定、补骨脂定对HK-2细胞、Hep-G2细胞具有一定的细胞毒性,且补骨脂甲素的毒性要大于补骨脂其他主要成分。本研究可为后续开展补骨脂或补骨脂有效成分的相关研究提供科学依据,在发挥其药理作用的同时,减少其毒性。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 郑露  朱海  郭爱珍  范放  李金峰  赵芳  杨小夏  洪小柳  马淑棉  司徒翠华  
小鼠神经母细胞瘤细胞经体外培养后,加入不同剂量的太平洋西加毒素(Pacific ciguatoxin-1,P-CTX-1)、箭毒苷和藜芦定,在不同时间点终止培养,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)标定活细胞量,分析西加毒素剂量与细胞活性之间的线性关系。结果发现,细胞与毒素作用不同时间,西加毒素剂量(x)与光密度值(y)之间的线性关系呈现差异。在10 h、15 h及20 h等不同时间,其线性方程分别为y=-0.082 6x+0.923 0(R2=0.978 9)、y=-0.044 3x+0.601 5(R2=0.962 1)、y=-0.020 4x+0.323 7(R2=0.928 1)。以10 h的检...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 魏世娜  简纪常  吴灶和  鲁义善  闫秀英  
自然杀伤细胞(NK)进化上的前体细胞在鱼类中被称作非特异性细胞毒性细胞(NCC),主要来源于血液和淋巴器官,是防御细菌、病毒、寄生性原生动物等入侵的第一道防线,在非特异性免疫中起重要作用,还具有体外杀伤肿瘤细胞的功能。近年来免疫荧光显微镜技术表明NCAMP-1和NCCRP-1两种受体蛋白均表达于NCC膜上,并且这种免疫细胞从鱼类到哺乳动物上的进化是保守的,这些膜蛋白在鱼类炎症反应期可能通过颗粒胞吐途径参与抗菌的先天性免疫。本文就NCC的分离鉴定、形态结构、功能受体作用机制等方面的研究成果作一综述,旨在为深入研究NCC在鱼类先天性防御中的作用提供依据。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 张宁  杨先乐  王翔凌  林茂  喻文娟  张书俊  
以乙醇为细胞色素P450 2E1的诱导剂,在CHSE-1细胞中研究了该诱导剂与酶活性之间的时间效应关系和剂量效应关系。细胞传代后培养48 h,加入含有不同浓度乙醇的新鲜培养基,孵育诱导24 h,之后加入底物苯胺反应30 min。以苯胺的代谢产物4-氨基酚的生成量来反映CYP2E1活性。苯胺浓度为10~16 mmol/L时CYP2E1活性最大,可达(0.152±0.095)nmol.min-1.mg-1,该浓度范围的苯胺适合用于指示CYP2E1的活性。以Gentox模型对诱导的剂量效应进行拟合,得到一个先升高后降低的曲线,说明乙醇对CHSE-1细胞中CYP2E1有先诱导后抑制作用。拟合方程F(x...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李金梅  木魁  姜双林  李登坤  李文雍  马同富  李永民  
【目的】研究骆驼蓬总碱对草地贪夜蛾幼虫的杀虫作用机理,为此类生物碱作为新型植物杀虫剂的开发应用提供理论依据。【方法】从骆驼蓬成熟种子中提取骆驼蓬总碱,采用MTT法测定0,1,5,10和20μg/mL骆驼蓬总碱对草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢细胞系(Sf9)的毒性;测定5μg/mL骆驼蓬总碱在处理10,30,50,70和90min时对Sf9细胞Na+和K+吸收的影响,并测定5μg/mL骆驼蓬总碱在处理1,2,3,4,5d后对葡萄糖吸收的影响;最后采用叶碟法(叶碟在20μg/mL
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王立峰  陈静宜  谢慧慧  王玉梅  石嘉怿  梁正昌  刘瑞海  鞠兴荣  袁建  
【目的】了解薏米多酚的体内抗氧化能力,着重分析薏米结合多酚的抗氧化能力,确定结合多酚对总抗氧化能力的贡献;研究薏米多酚对肝癌细胞的毒性和抗增殖作用,在细胞层面上对薏米多酚的功能作用进行评价分析。【方法】以贵州黑谷薏米、辽宁5号薏米、龙薏1号薏米为原料,通过对薏米样品多酚类物质游离型和结合型部分构建细胞模型,评价细胞内抗氧化能力指数,以HepG2细胞为研究对象,测定分析薏米多酚提取物对细胞毒性的中位浓度CC50值和细胞抗增殖作用的半最大效应浓度EC50值。【结果】薏米结合型多酚抗氧化能力显著高于游离型多酚。不同品种间总多酚含量和抗氧化能力差异显著,辽宁5号薏米和龙薏1号薏米明显优于贵州黑谷薏米。...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 李文平  何理平  崔建国  李香鑫  罗国良  
为检测采用海狸鼠尾部肌腱经过脱脂、脱水、两次固定等一系列加工过程而制成的新型可吸收手术缝合线的细胞毒性,将它与鸡胚成纤维细胞共同体外培养,观察其对细胞形态和增殖率的影响.结果表明,这种缝合线对细胞形态无影响,对细胞增殖有一定的促进作用,细胞相容性好,符合医用缝合线的要求.
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 刘恩  郑楠  范彩云  张养东  王尚  黄帅  程建波  
为研究砷(Arsenic,As)和铅(LeAd,Pb)单独以及联合作用对人肝癌细胞(HumAn Liver cArcinomA ceLLs,HePG2)毒性作用和细胞氧化损伤的机制,采用不同质量浓度的As(2.65、3.15、3.65、4.15和4.65μG/mL)和Pb(160、190、220、250和280μG/mL)以及质量浓度比为1∶55的As+Pb分别或联合处理HePG2细胞24、48和72H,使用mTT法检测细胞活力;细胞培养24H后测定细胞活性氧(ros)、乳酸脱氢酶(LdH)、丙二醛(mdA)和还原性谷胱甘肽(GsH)的相对含量。mTT结果表明:As、Pb和As+Pb的24、4...
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