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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
沈硕
采用平板对峙法和牛津杯法测定菌株ST77及其3种有机溶剂(氯仿、乙酸乙酯、正丁醇)萃取物对马铃薯干腐病的抑菌活性;通过活体试验,测定菌株ST77发酵液及其3种有机溶剂萃取物对马铃薯干腐病的活体防效,并进行安全性评价;采用形态学观察、生理生化特征鉴定及分子生物学方法对菌株ST77进行鉴定.结果表明:中度嗜盐菌ST77及其萃取物对马铃薯干腐病病原真菌青9A-4-13、青9A-5-2和65B-2-6具有不同程度的抑制作用,抑菌圈直径最大为0.60 cm;中度嗜盐菌ST77发酵液及其萃取物能够完全抑制马铃薯活体上病原真菌65B-2-6的生长,坏果率为零,对其他病原真菌具有不同程度的抑制作用.其中,中度嗜盐菌ST77正丁醇萃取物对马铃薯干腐病病原真菌的抑制活性较高;同时,ST77发酵液及其正丁醇萃取物对马铃薯储藏安全.经鉴定,菌株ST77为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus).
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨志敏 毕阳 李永才 寇宗红 包改红 刘成琨 王毅 王蒂
【目的】探讨干腐病菌(Fusarium sulphureum Schlechlendahl)侵染过程中马铃薯切片组织主要细胞壁降解酶(cell wall degrading enzymes,CWDEs)活性的动态变化。【方法】陇薯3号马铃薯块茎组织切片接种F.sulphureum后,不同培养天数取样测定并比较分析主要CWDEs活性变化。【结果】F.sulphureum侵染的组织均能产生多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、纤维素酶(Cx)、β-葡萄糖苷酶、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)、果胶甲基反式消除酶(PMTE)、果胶甲基酯酶(PME)、果胶裂解酶(PML),但P...
[期刊] 草业科学
[作者]
陈书珍 陈泰祥 季绪霞 杨成德 陈秀蓉
通过对甘肃省岷县马铃薯(Solanum tuberosum)窖藏干腐病的病原形态学鉴定,明确了其主要病原有7种,分别是木贼镰孢菌(Fusarium equiseti)、茄腐镰孢菌(F.solani)、三线镰孢菌(F.tricinctum)和尖孢镰孢菌(F.oxysporum)及3个待定种Fusarium spp.,其中茄腐镰孢和木贼镰孢菌为主要病原,分离频率分别为41.67%和28.57%,且尖孢镰孢菌和木贼镰孢菌引起马铃薯干腐病属甘肃省首次报道。在窖藏期间使用32.5%苯醚甲环唑·嘧菌酯浓度为1.252
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王怡凡 刘巍 朱其立 孙敏 李延锋 朱建强
【目的】筛选及开发对马铃薯早疫病具有生防效果的菌株，以期丰富该病的生防菌种资源。【方法】从马铃薯种植区该病害发生严重的地块根际土壤中分离筛选生防菌株，利用形态学特征观察、生理生化特性检测及16S rDNA和gyrB基因序列同源性分析，对其种属进行分类鉴定。通过测定菌株对马铃薯块茎切片的防病效果、抑菌广谱性与生物学功能初步验证其防效功能，并设置盆栽试验印证菌株对马铃薯早疫病的防效及对土壤微生物菌群的影响。【结果】获得1株对马铃薯早疫病菌平板抑制率达89%的生防菌株WK-1，经鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。该菌株对马铃薯离体块茎切片的防效为88.39%，其抑菌效果具有广谱性，有溶解无机磷及产铁载体的能力，盆栽防效为74.49%，且有助于土壤微生物群落结构得到改善。【结论】生防菌株WK-1在马铃薯早疫病的防治方面具有较大的开发应用潜能，可以作为高效复合功能菌剂的候选菌株。
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
王璇 马良进 吕全 孟娴静 张星耀
葡萄座腔菌科Botryosphaeriaceae真菌是很多木本植物溃疡病和枯梢病的重要病原菌。已有报道认为:山核桃干腐病病原菌为茶藨子葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea,但对于葡萄座腔菌科其他真菌与山核桃干腐病的关系还没有深入研究。分离得到了山核桃干腐病相关病原菌,通过比较其形态学特征和核糖体DNA内转录间隔区(rDNA ITS)序列特征,将分离得到的供试菌株分为3组。根据形态学特征和基于ITS序列的系统发育分析,3组菌株分别鉴定为Botryosphaeria dothidea,B.fabicercianum和B.obtusa。其中B.dothidea为优势菌株,分离频率...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
罗华东 严加林 余洋 谭万忠
【目的】分离筛选对马铃薯甲虫(Colorado potato beetle,CPB)具强致病性的细菌生防菌株并对其鉴定。【方法】从CPB虫体上分离病原细菌,利用几丁质酶和蛋白酶活性初步筛选致病菌株,然后通过室内和田间试验筛选出可导致CPB大量死亡的生防菌。根据形态学、生理生化特性和16S rDNA序列分析等进行鉴定,确定生防菌株的分类学地位。【结果】从新疆CPB分布区采集的CPB发病成虫虫体上分离纯化获得126个细菌菌株,其中36个菌株对昆虫体壁几丁质和蛋白质具有降解活性。在室内马铃薯叶片饲养的CPB各龄幼虫和成虫上测试,11个菌株对1—2龄幼虫表现出不同程度致病力,在接种后1—3 d始见幼虫...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
丁传雨 张国漪 沈其荣 冉炜 陈巍
从马铃薯、番茄、茄子、香蕉的根际土壤中筛选出140株对青枯菌(Ralstonia solanacearum)有拮抗作用的菌株,其中24株拮抗菌对青枯菌的抑菌圈直径大于等于15 mm。从中选出2株菌株的单菌落及其发酵上清液对4株青枯菌的抑菌圈直径均大于等于20 mm的拮抗菌株LH23和LH36,结合形态特征、生理生化及16S rDNA同源性分析,将LH23和LH36菌株鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。通过分别单独施用拮抗菌LH23、LH36及其制成的生物有机肥(BIO23和BIO36)进行盆栽试验,观测其对马铃薯苗生长的促进作用以及对青枯病的防治作用。拮抗菌株及其制成的生物有机肥均...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
罗华东 王利君 谭万忠 周军 杜喜翠
采用常规组织分离法,从新疆石河子、伊宁和昌吉等地区采集的马铃薯甲虫发病成虫虫体上分离并纯化出36个真菌菌株。经形态学初步观察,这些菌株分属于白僵菌(Beauveria)、轮枝菌(Verticillium)、镰刀菌(Fusarium)、青霉(Penicillium)、木霉(Trichoderma)和曲霉(Aspergillus)等属。用这些菌株的悬浮液喷雾接种家蚕(Bombyx mori)幼虫后显示,有26个菌株(白僵菌19株,轮枝菌4株,镰刀菌2株,木霉1株)对家蚕幼虫表现出不同程度致病力,并在接种后5~9 d始见虫体死亡。白僵菌的19个菌株的致病力都非常强,接菌后11 d幼虫累计死亡率(LR...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
霍超 曹继芬 韩伟君 胡慧芬 王乾 徐小波 赵志坚
【目的】筛选马铃薯晚疫病防控新型高效绿色杀菌剂及生物农药，为科学合理使用高效杀菌剂开展马铃薯晚疫病绿色防控提供指导。【方法】在优化的马铃薯晚疫病CARAH预警系统指导下，随机区组设计对6种新型杀菌剂及2种植物源农药在马铃薯主栽品种合作88上进行大春马铃薯晚疫病田间药效评估，评价不同杀菌剂对马铃薯叶部和茎部的晚疫病防效。从预测中心病株开始，晚疫病每完成一代侵染进行一次防控。【结果】预警系统预测合作88将在7月2日至7月4日出现中心病株，田间调查显示，对照处理7月3日出现马铃薯晚疫病中心病株，优化的预警系统预测中心病株出现时间的准确率达到100%；根据预警系统指导，从7月1日第一次施药至8月30日最后一次施药共开展9次防控。对马铃薯叶部和茎部晚疫病调查显示：所有8种杀菌剂对马铃薯叶部和茎部晚疫病的防效分别在85.5%和87.5%以上，其中31%噁酮·氟噻唑的防效最高，分别达到95.00%和96.75%；植物源杀菌剂0.3%丁子香酚的防效较高，分别达到90.50%和92.50%。预警系统指导下应用8种杀菌剂对马铃薯增产显著，杀菌剂防控的商品薯率为71.60% ～ 79.94%，增产幅度在116.29% ～ 257.69%之间，对照处理的商品薯率仅为38.27%。【结论】CARAH系统测报与田间晚疫病的实际发生高度吻合，可精准指导晚疫病防控。评价的6种化学杀菌剂和2种植物源农药对马铃薯晚疫病均有较高防效，推荐在生产中用于晚疫病防控，尤其是植物源农药丁子香酚替代化学杀菌剂的应用可以显著减少化学杀菌剂的使用量。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
胡林刚 李渐鹏 李永才 毕阳 葛永红 王毅
【目的】研究外源过氧化氢(H2O2)处理对采后马铃薯块茎干腐病的控制效果及作用机理。【方法】在离体条件下通过扫描电镜、透射电镜等方法观察分析外源H2O2对马铃薯干腐病菌(Fusarium sulphureum)生长、菌落形态及其超微结构的影响,并以陇薯3号马铃薯为试材,分别在处理前后接种F.sulphureum,研究外源H2O2对病害的治愈和预防作用。【结果】外源H2O2处理强烈抑制了F.sulphureum的菌丝生长和孢子萌发且表现出明显的浓度效应,显著增大了F.sulphureum的细胞膜透性;扫描电镜观察发现H2O2处理过的F.sulphureum菌落分布不均匀,菌丝缠绕、扭曲在一起,部...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
于水清 杨毅清 张岱 庞民好 杨志辉 朱杰华
【目的】为获得拮抗马铃薯早疫病菌的优良生防菌株,研究其抑菌活性物质对马铃薯早疫病菌的影响。【方法】利用平板对峙法对生防菌进行筛选,通过形态学特征和分子生物学的方法对生防菌进行鉴定,并检测其分泌生防作用相关的酶的能力。通过扫描电镜观察生防菌次级代谢产物对早疫病菌丝影响,利用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)技术对生防菌次级代谢产物的活性成分进行鉴定,结合琼脂扩散法进一步验证活性成分。【结果】将筛选得到的生防菌株鉴定为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis),命名为C16。菌株C16能分泌淀粉酶和表面活性素,具有固氮能力,发酵液和脂肽粗提物能显著抑制马铃薯早疫病菌丝的生长,发酵液的抑菌圈可达31.5 mm, 10 mg/mL脂肽粗提物的抑菌带可达12.67 mm。早疫病菌分别与发酵液和脂肽粗提物共培养后,经扫描电镜观察发现,菌丝扭曲变形,表面产生褶皱,以及出现囊泡化等现象。对脂肽粗提物进行成分分析,发现其含有表面活性素Surfactin和伊枯草素Iturin两种物质,通过琼脂扩散法测定两种活性物质的抑菌活性,发现伊枯草素Iturin为主要抑菌活性成分。【结论】本研究筛选获得拮抗马铃薯早疫病菌的优良生防菌株为贝莱斯芽胞杆菌C16,其主要抑菌物质为伊枯草素Iturin。本研究结果为利用微生物菌剂防治马铃薯早疫病提供了备选菌种资源,同时为菌株C16的开发利用奠定了基础。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
赵伟全 杨文香 李亚宁 刘大群 孟庆芳 张汀
【目的】对采自中国10个省(区)的马铃薯疮痂病菌进行分子水平鉴定。【方法】采用结合生物学特性和16SrDNA序列特点的方法对获得的菌株进行分析。【结果】中国的Streptomycesscabies菌株与美国的S.scabies标准菌株ATCC49173的16SrDNA序列同源性为100%,但中国的菌株不能以甘露醇为单一碳源,对10IU·ml-1青霉素不敏感,能产生硫化氢。而中国的S.acidiscabies菌株与美国的S.acidiscabies标准菌株ATCC49003的16SrDNA序列同源性为99.8%,但能以棉子糖为单一碳源,对苯酚(0.1%)和结晶紫(0.5μg·ml-1)敏感,不产...
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
宋烨 向君亮 申永瑞 王佳琦 刘权 殷奎德
为改善马铃薯Solanum tuberosum疮痂病日益加重的情况,以疮痂链霉菌Streptomyces scrabies为指示菌筛选拮抗菌,优化菌株的发酵条件,检测菌株对马铃薯疮痂病的抑制情况。首先,利用稀释涂布法、平板划线法和抑菌圈法分离筛选到了1株对疮痂链霉菌具有抑制作用的拮抗菌株,通过形态学观察和16S rDNA序列比对鉴定为芽孢杆菌Bacillus,并命名为BU108。随后,采用单因素多水平试验设计方法,对该菌株培养条件进行了优化,确定最适培养条件为:碳源为葡萄糖,氮源为酵母浸粉,碳氮比为1∶2,磷酸二氢钾(KH_2PO_4)为0.5 g·L~(-1),硫酸镁(MgSO_4·7H_2O)为0.5 g·L~(-1),氯化钠(NaCl)为5.0 g·L~(-1),培养温度为28℃,pH 8,培养时间为22 h。最后,通过盆栽实验检验了芽孢杆菌BU108对马铃薯疮痂病的实际抑制效果,结果显示:BU108施用浓度为1×10~(10)cfu·m~(-2)时效果最好,抑制率为91.6%,差异达极显著水平(P<0.01)。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
高学策 张岱 魏笑薇 杨志辉 朱杰华 韩志校
【目的】获得有效防治马铃薯黑痣病的芽胞杆菌，并明确其次级代谢产物的抑菌作用。【方法】利用平板对峙法筛选马铃薯黑痣病菌拮抗菌株，通过形态学特征及gyrB序列分析进行鉴定；通过带毒培养基法和平皿对扣法测定脂肽类物质和挥发性有机物抑菌活性；利用特异性引物对菌株G32次级代谢产物5种脂肽类抗生素合成的相关基因sfp、ituA、fenB、bacD、mycB进行检测。通过顶空固相微萃取技术（HS-SPME）富集G32挥发性有机物，利用全二维气相色谱-质谱联用法（GC×GC-MS）进行成分鉴定。【结果】从河北农业大学实验基地采集得到的根际土中共分离得到50株芽胞杆菌，成功筛选得到一株对马铃薯黑痣病菌具有良好拮抗作用的芽胞杆菌菌株G32，抑菌圈为（20.68±0.42）mm。经形态学和分子生物学鉴定为解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。B. amyloliquefaciens G32分泌的脂肽类活性物质和挥发性化合物均可抑制黑痣病菌的生长，造成菌丝扭曲变形，出现囊泡等畸形现象。对B. amyloliquefaciens G32分泌的次级代谢产物进一步分析表明，B. amyloliquefaciens G32具有表面活性素（Suffactins）、伊枯草素（IturinA）、杆菌毒素（BacillomycinD）、抗霉菌枯草菌素（Mycosubtilin）等脂肽类化合物的基因簇；B. amyloliquefaciens G32能产生13种6类挥发性物质，包括酮类、醇类、芳香族类、醚类、有机酸类，其中3-羟基-2-丁酮含量最高为48.90%，其次是2-壬酮（11.33%）和正辛醇（10.84%）；B. amyloliquefaciens G32具有产淀粉酶和纤维素酶的能力。【结论】B. amyloliquefaciens G32可分泌脂肽、挥发性有机物和纤维素酶等多种抑菌物质，对马铃薯黑痣病的防治具有一定潜力，同时为多种抑菌物质的协同增效作用提供了理论基础。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
孙睿揆 王志远 飞兴文 吴毅歆 吴兴兴 毛自朝 何月秋
从40份农田土壤中分离筛选出了69株芽孢杆菌对Fusarium oxysporum、Botrytis cinerea、Colletotrichum gloeosporioides、Cylin-drocarpon具有拮抗作用,其中Bs2菌株发酵液稀释50倍(5.6×107cfu/mL)后处理,连续用3次后的第7天,对辣椒白粉病的防治效果达到60.77%,略低于化学农药粉锈灵(0.8 g/L)的防治效果。通过形态特征观察,生理生化试验及16S rDNA序列分析,Bs2与菌株Bacillus pumilusSBT2-9的相同,其16S rDNA序列同源性高达99.41%,被鉴定为短小芽孢杆菌。
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