- 年份
- 2024(9025)
- 2023(13232)
- 2022(11436)
- 2021(11026)
- 2020(9223)
- 2019(21349)
- 2018(21122)
- 2017(39877)
- 2016(21703)
- 2015(24780)
- 2014(24669)
- 2013(24528)
- 2012(22551)
- 2011(20562)
- 2010(20187)
- 2009(18587)
- 2008(18016)
- 2007(15598)
- 2006(13506)
- 2005(12134)
- 学科
- 济(88428)
- 经济(88306)
- 管理(61584)
- 业(58290)
- 企(48150)
- 企业(48150)
- 方法(40923)
- 数学(35682)
- 数学方法(35317)
- 中国(25403)
- 农(22627)
- 学(22543)
- 财(20062)
- 业经(18243)
- 技术(17831)
- 贸(17657)
- 贸易(17647)
- 易(17248)
- 制(16525)
- 地方(14969)
- 农业(14945)
- 理论(14284)
- 和(13928)
- 环境(13715)
- 银(13107)
- 银行(13056)
- 融(12573)
- 金融(12571)
- 行(12540)
- 划(11867)
- 机构
- 大学(317275)
- 学院(311043)
- 济(128357)
- 经济(125807)
- 管理(122524)
- 研究(110568)
- 理学(106367)
- 理学院(105140)
- 管理学(103493)
- 管理学院(102910)
- 中国(81417)
- 科学(68815)
- 京(68446)
- 所(56033)
- 财(55772)
- 研究所(51553)
- 农(50868)
- 中心(48470)
- 业大(47009)
- 财经(45373)
- 北京(43869)
- 江(42826)
- 范(41680)
- 经(41556)
- 师范(41230)
- 农业(40243)
- 院(39938)
- 经济学(39503)
- 经济学院(35504)
- 州(34737)
- 基金
- 项目(216115)
- 科学(169651)
- 基金(158149)
- 研究(157458)
- 家(139031)
- 国家(137962)
- 科学基金(117158)
- 社会(99230)
- 社会科(93985)
- 社会科学(93962)
- 基金项目(83602)
- 省(81334)
- 自然(76057)
- 自然科(74268)
- 自然科学(74249)
- 自然科学基金(72954)
- 教育(71596)
- 划(69986)
- 资助(65376)
- 编号(62605)
- 成果(51474)
- 部(48759)
- 重点(48633)
- 发(45811)
- 创(45124)
- 课题(43229)
- 创新(42246)
- 教育部(41661)
- 国家社会(41422)
- 科研(41395)
- 期刊
- 济(136561)
- 经济(136561)
- 研究(92980)
- 中国(59338)
- 学报(52291)
- 科学(48492)
- 农(45656)
- 管理(44482)
- 财(40147)
- 大学(38838)
- 学学(36350)
- 教育(34815)
- 农业(32540)
- 技术(27634)
- 融(23482)
- 金融(23482)
- 财经(22356)
- 经济研究(22232)
- 业经(19804)
- 经(19095)
- 问题(17840)
- 业(17533)
- 图书(17296)
- 科技(16161)
- 技术经济(16089)
- 理论(15021)
- 贸(14872)
- 世界(14332)
- 版(14074)
- 实践(13503)
共检索到452024条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王宝杰 刘梅 蒋克勇 张国范 王雷
应用超速离心技术对中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)血浆样品进行处理,比较去除和未去除高丰度蛋白血浆的双向凝胶电泳(2-DE)图谱。结果表明:对虾血浆高丰度蛋白经去除后,血浆样品中的低丰度蛋白得到较好的分离和浓缩。未处理样品的2-DE图谱分离的蛋白质170个,而去除高丰度蛋白后血浆2-DE图谱上分辨率增高,分离出蛋白质点520个,一些低丰度蛋白质被有效分离出来。研究证实,超速离心技术可有效去除对虾血浆高丰度蛋白(血蓝蛋白),提高低丰度蛋白的检出敏感性,为对虾等甲壳动物的血浆蛋白质组学研究提供了基础保障。
[期刊] 水产学报
[作者]
王宝杰 刘梅 蒋克勇 张国范 王雷
中国明对虾的血浆脱盐处理后,通过固相pH梯度胶条等电聚焦、SDS-PAGE垂直电泳对蛋白质进行分离,对不同pH范围IPG胶条、脱盐方式、上样量等进行了优化,并分别利用硝酸银和胶体考染方法进行染色,应用PDQuest软件对图谱进行了初步分析,采用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法对主要的高丰度蛋白点进行了质谱鉴定。结果显示,中国明对虾血浆在pH 4～7范围、18 cm的2-DE胶上得到了很好的分离,上样量为150μg左右,采用银染可以获得较好的分析胶图谱;而上样1 000μg左右,采用胶体考染方法能获得较好的制备胶图谱;通过MALDI-TOF/TOF MS鉴定的11个最主要的高丰度蛋白点都是血...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李红兵 康振生
【目的】建立一种小麦叶片蛋白质组分析时去除全蛋白提取物中高丰度蛋白Rubisco酶的方法,为富集低丰度蛋白,提高双向电泳灵敏度提供技术支持。【方法】采用分离技术,以铭贤169小麦苗期叶片为材料,使用不同浓度(1,2,5,10 mmol/L)的肌醇六磷酸钠,结合二水氯化钙在不同温度(4,20,37℃)去除小麦叶片蛋白中的Rubi-sco酶,筛选去除小麦叶片蛋白Rubisco酶的最佳条件,并采用一维凝胶电泳(1-DE)、Western blot方法检测去除Rubisco酶的有效性,用二维凝胶电泳(2-DE)评估该方法对样品在二维凝胶上分辨率的影响。【结果】在37℃条件下,采用10 mmol/L肌醇...
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
雷敏 刘斌 阮梅林 罗云
分子量是蛋白质的重要特征参数,准确测定蛋白质分子量对研究蛋白质结构与功能具有重要意义。该文以牛血清蛋白(BSA)和人血清免疫球蛋白(IgG)为研究对象,采用分析超速离心-沉降速率法(AUC-SV)测定2种蛋白的分子量,并系统研究了样品初始浓度、离心转速、离心时间、离心温度、样品上样体积和缓冲液体系等实验条件对测定结果的影响。结果表明:离心转速为20 000～40 000 r/min时,影响不明显,样品初始浓度、离心时间、离心温度、缓冲液体系的适宜范围较宽,样品上样体积对测定结果的影响显著。在优化的实验条件下,测得未知蛋白的分子量为39.9 kDa,与质谱法测定结果(40.0 kDa)一致。该方法具有适宜条件范围宽、非破坏性、无需标准品和普适性高等优点,适用于未知蛋白分子量的测定。此外,相关研究结论还可供AUC-SV初学者学习借鉴。
关键词：
分析超速离心 沉降速率 蛋白质分子量
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨永新 赵兴绪 张勇 陶金忠
【目的】检测和分析临床型乳房炎与正常奶牛血浆中差异表达的蛋白质。【方法】用二维凝胶电泳分离血浆蛋白,凝胶用硝酸银染色和考马斯亮蓝染色,PDQuest7.4软件自动检测分析差异表达蛋白斑点并经高效液相色谱串联离子阱质谱鉴定。【结果】凝胶图谱分析后得到3个差异蛋白斑点,鉴定为2种蛋白质(结合珠蛋白前体和乳腺球蛋白)。结合珠蛋白前体在临床型乳房炎奶牛血浆中表达量增加,可作为乳房炎诊断标记分子;而乳腺球蛋白的表达量下调。【结论】临床型乳房炎与正常奶牛的血浆中蛋白质的表达存在差异,对差异表达蛋白质的研究有利于探索机体的生理病理状态,可为疾病的诊断和治疗提供全面的信息。
关键词：
奶牛 临床型乳房炎 血浆 差异表达蛋白质
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
杨永新 王加启 卜登攀 张乐颖 李珊珊 张春林 周凌云
为分析初乳与常乳乳蛋白的表达变化,揭示乳蛋白分泌及乳腺易感疾病的机理,采用二维凝胶电泳结合液相色谱串联质谱的方法分析了产后第1天、第7天和第21天牛乳中蛋白表达变化。结果发现,相对于第7天和第21天牛乳蛋白的表达丰度,第1天牛乳蛋白中有5个蛋白表达量增加;而第7天与第21天牛乳蛋白表达无变化。且第1天牛乳蛋白表达量增加的是具有免疫活性的免疫球蛋白M和G以及运输功能的白蛋白和转铁蛋白等。结果表明由初乳向常乳转换过程中,这些乳蛋白表达量的降低可能与乳腺易感乳房炎等疾病相关。
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
许华 黄倢 杨官品
白斑综合征病毒WSSV(White Spot Syndrome Virus,WSSV)是引起对虾大规模死亡的主要病毒性病原,且该病毒感染的宿主广泛。自WSSV基因组全序列公布以来,国内外的学者对WSSV的研究热点转移到该病毒基因产物功能的相关研究上面来。弄清WSSV感染机理是有效防治病毒的基础,而对其感染机理的阐释则主要是搞清病毒各蛋白在感染中的作用,这些是WSSV蛋白质组学的研究内容之一。分析WSSV蛋白同时可以在分子水平上为研究海洋和陆地生物病毒的进化趋势提供有力的基础。
关键词：
WSSV 结构蛋白 非结构蛋白 囊膜蛋白
[期刊] 水产学报
[作者]
刘志远 励建荣 李学鹏 李婷婷 王彦波 黄和 陈华健 陆维克
为了探索并建立中国明对虾的肌肉蛋白双向电泳体系,实验将中国明对虾的肌肉组织溶解处理后,通过固相pH梯度胶条等电聚焦、SDS-PAGE垂直电泳对蛋白质进行分离,对不同的裂解液配方、IPG胶条的pH范围及其长度、等电聚焦程序、上样量等进行了优化,并分别利用银染和考染方法进行染色,应用PDQuest软件对图谱进行了初步分析。结果显示,中国明对虾肌肉蛋白的等电点主要位于4～7之间,裂解液中添加硫脲、CHAPS、DTT等,可以增加对虾肌肉蛋白的提取率;采用17 cm,pH 4～7的中型IPG胶条,主动水化上样120μg,适当延长除盐时间和等电聚焦时间,搭建盐桥,采用浓度为12.5%的二向分离胶和硝酸银染...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘念 孙研研 白皓 华登科 薛夫光 刘冉冉 李冬立 文杰 陈继兰
【目的】中国地方鸡种如北京油鸡、清远麻鸡存在喙畸形现象,表现为上下喙咬合不全,呈交叉状。严重影响鸡饮水和采食,从而影响个体发育和生产性能的发挥,造成一定经济损失。笔者根据喙畸形个体的系谱记录,发现喙畸形的形成受到遗传因素的影响,但具体机制尚不明确。蛋白是行使各种生物学功能的最终形式之一,喙畸形个体的发生可能是由于核心蛋白或者相关调控蛋白代谢异常造成的。利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,i TRAQ)技术以及生物信息学分析方法,筛选鸡畸形喙与正常喙中差异表达的蛋白,作为喙畸形相关的重要候选蛋白,...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
陈丽花 肖作兵 周培根
为系统了解中国对虾蛋白质的营养价值,通过分析其基本营养成分含量及蛋白质的氨基酸组成,分别采用蛋白质氨基酸评分法、必需氨基酸化学评分法以及必需氨基酸指数法对其蛋白质的营养价值进行了评价。结果表明:中国对虾肉和对虾头的蛋白质含量丰富;组成中国对虾肉蛋白质的氨基酸(色氨酸除外)总量(以干重计,下同)为73.16 g/100 g,其中必需氨基酸总量为25.12 g/100 g,没有限制性氨基酸;组成对虾头蛋白质的氨基酸(色氨酸除外)总量为49.47 g/100 g,其中必需氨基酸总量为16.41 g/100 g,苯丙氨酸和酪氨酸为其限制性氨基酸。组成中国对虾肉和虾头蛋白质必需氨基酸化学评分最高的均是赖...
关键词：
中国对虾 蛋白质 氨基酸 营养价值评价
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨永新 张勇 周雷 程广龙 陶金忠 赵兴绪
【目的】通过分析临床健康和乳房炎奶牛乳腺组织膜蛋白的差异表达,以期在蛋白质水平探索奶牛乳房炎的发生机理。【方法】采用二维凝胶电泳技术分离了临床健康和乳房炎奶牛的乳腺组织膜蛋白,经考马斯亮蓝染色后PDQuest 7.4软件匹配、检测凝胶中差异表达的蛋白点,对12个差异蛋白点采用高效液相色谱串联离子阱质谱分析,SEQUEST软件搜索NCBInr数据库。半定量RT-PCR分析差异表达蛋白的mRNA水平。【结果】12个差异蛋白点鉴定为11种蛋白质,其中9个蛋白点在临床型乳房炎奶牛乳腺组织膜蛋白中表达量上调而3个蛋白点表达量下调,主要涉及细胞膜骨架系统、信号转导、物质结合和传递等生物学功能。半定量RT-...
关键词：
奶牛 乳房炎 乳腺膜蛋白 蛋白质组
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘国勇 陈发菊 聂品
为了鉴定柱状黄杆菌(Flavobacterium columnare)的毒力相关因子,利用蛋白质组学方法分析了强毒株G4R3和弱毒株G18的外膜蛋白。双向电泳结合图像分析,共发现了8个差异表达的蛋白点。经过胶内酶解和质谱分析,其中的1个蛋白点被鉴定为LemA蛋白,它可能是柱状黄杆菌的一种毒力因子。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨永新 王加启 卜登攀 李珊珊 周凌云
【目的】分析不同体细胞数牛乳中乳蛋白的表达变化。【方法】采用二维凝胶电泳技术分离了低体细胞数、中体细胞数、高体细胞数和临床乳房炎的牛乳蛋白,考马斯亮蓝G-250溶液染色,液相色谱串联质谱检测表达变化的蛋白点。【结果】在中体细胞数和高体细胞数乳中酪蛋白水解产物和白蛋白增加,在临床乳房炎牛乳中α-、β-和κ-酪蛋白几乎全部水解,而白蛋白、转铁蛋白、纤维蛋白原β链和结合珠蛋白等乳清蛋白表达量增加。【结论】展示了不同体细胞数牛乳中乳蛋白的凝胶表达图谱,同时表明牛乳酪蛋白的水解程度随着体细胞数的增加而增加,至严重临床乳房炎时牛乳中酪蛋白几乎全部水解而乳清蛋白急剧增加。
关键词：
奶牛 体细胞数 乳蛋白 质谱检测
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
程俊森 王溢 李永泉 魏尚霖 李超楠 姜维 黄润生
【目的】南方地区拥有大面积的酸性红壤，导致土壤中铝元素多以离子的形式溶出，严重抑制油茶的生长及高产。研究采用Label-free技术探究高州油茶在铝胁迫下的蛋白质组学响应，为揭示高州油茶应答铝胁迫的分子响应机制奠定了理论基础。【方法】以高州油茶两年生实生苗为试验材料，测定不同浓度铝处理条件下高州油茶叶片部分代谢指标及抗氧化生理相关指标，同时比较对照组（CK)和4 mmol/L铝处理组（GZ4）差异蛋白质的表达。【结果】生理试验结果表明，不同浓度铝胁迫下油茶幼苗都会发生氧化胁迫导致细胞活性氧（ROS）积累，2 mmol/L铝浓度下油茶叶片通过增加渗透调节物质含量和增强多种抗氧化酶活性以清除细胞活性氧，使细胞免受氧化胁迫的损害；而4 mmol/L铝浓度下叶片丙二醛（MDA）含量和脯氨酸（PRO）含量明显升高，积累的活性氧超出了自身所能清除的范围，叶片可溶性糖含量和可溶性蛋白含量显著减少，抗氧化酶活性均有不同程度减弱，油茶正常的生理功能受到抑制。蛋白质组学数据表明，CK组和GZ4组共鉴定到4 282个蛋白质，与CK组相比，GZ4处理组有207个蛋白质的表达丰度显著增加，129个蛋白质的表达丰度显著降低。差异表达蛋白质的通路富集和蛋白质互作网络分析结果表明，4 mmol/L铝胁迫下高州油茶主要通过提高谷胱甘肽代谢，增强细胞清除活性氧和自由基负离子的能力缓解铝胁迫造成的氧化损伤；4 mmol/L铝浓度下高州油茶蛋白质合成和光合作用受到明显抑制，抗氧化酶活性减弱可能与细胞供能能力不足有关。【结论】铝胁迫下高州油茶主要通过能量及碳水化合物代谢、氨基酸合成及代谢、生物碱合成、蛋白质加工、卟啉和叶绿素代谢等代谢途径抵抗铝毒。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
黄凯 王武 卢洁
以酪蛋白和明胶为主要蛋白源,配制成蛋白质质量分数分别为28%、33%、38%、43%和48%的5种精饲料,分别在盐度2和28的水体中,对南美白对虾(Penaeusvannamei)幼虾进行49d的饲养试验。虾苗平均体重为(0 011±0 001)g,每天投喂4次。结果表明,饲料系数、蛋白质效率均随饲料蛋白质含量的增加而减小,饲料蛋白质水平对南美白对虾幼虾肌肉游离氨基酸和肝胰腺胰蛋白酶的活性有显著的影响。在盐度2的水体中,26.7%饲料蛋白质水平最适宜;在盐度28的水体中,33.0%饲料蛋白质水平最适宜。说明在一定范围内,低蛋白高能量饲料可以取得更高的蛋白质利用率以及更好的对虾养殖效果。
关键词：
南美白对虾 幼虾 饲料 蛋白质需要量
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
