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[期刊] 水产学报
[作者]
彭其胜 郭文场 杨振国 王玉平 田相利
１９９９年８月，运用血凝活性测定法分别检测中国对虾血淋巴凝集素、血淋巴液、血细胞、肌肉、肠、肝胰腺和甲壳的血凝活力，并运用■啶橙血细胞吞噬测定法检测血细胞的吞噬活力，同时测定了经注射中国对虾副粘病毒提纯液后血淋巴凝集素血凝活力及血淋巴液抗菌活力、酚氧化酶活力、溶菌活力。结果表明，血淋巴凝集素主要分布在血淋巴液和血细胞中；该凝集素对人（Ａ、Ｂ、Ｏ型）、鸡和兔红细胞及其醛化红细胞的凝集具有一定专一性；对血细胞吞噬异物具有促进功能；注射副粘病毒提纯液后，血淋巴凝集素凝集活力变化和血淋巴液抗菌活力、酚氧化酶活力。溶菌活力变化相一致。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
彭其胜 郭文场 杨振国 王玉平
用饱和硫酸铵盐析、S 2 0 0 HR凝胶层析、DEAE sepharose离子交换层析从中国对虾 (Penaeuschi nensis)血淋巴液中分离出 1种凝集素 ,通过SDS PAGE测定 ,该凝集素由 2个亚基组成 ,分子量分别为80 0 0 0、750 0 0 ;此凝集素能凝集牛、马、鼠、兔、鸡、羊和人A、B、O型红细胞 ,其凝集活性不被D 甘露糖、D 果糖、D 乳糖、乙酰半乳糖、神经氨酸、D 葡萄糖、D 半乳糖和D 岩藻糖抑制 ;其最适血凝 pH为 6～ 8,Ca2 +不影响其凝集活性
关键词：
中国对虾 血淋巴液 凝集素 纯化
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
姜勇 吴明荣 雷朝亮 宗良炳
用生物的、物理的诱导因子，均能诱导家蝇的血淋巴提高凝血活力，实验确定了各诱导因子的最佳诱导剂量，同时，各诱导因子的诱导效果存在差异；在这些诱导因子中，以刺伤诱导的效果最好；Ｅ．ｃｏｌｉＫ１２诱导时，是通过刺伤体壁感染家蝇的，但其诱导效果反而低于单纯的刺伤诱导。同种诱导方法对不同的虫态，结果也有所差异；低龄幼虫即使经过诱导，血淋巴中也不具有凝血活性；在末龄幼虫、蛹以及成虫这３种虫态中，蛹的血淋巴凝集素含量最高。
关键词：
家蝇 血淋巴凝集素 动力学
[期刊] 水产学报
[作者]
刘逸尘 刘丽静 张亦陈 耿绪云 孙妍 孙金生
研究拟通过分析对虾C型凝集素的活性特点,探讨其在对虾先天免疫应答过程中的潜在功能以及在养殖生产实践中的应用。实验利用原核表达系统对中国明对虾C-型凝集素基因的两个串联的糖识别结构域(carbohydrate recognition domain,CRD)进行了重组表达,并通过纯化复性获得了重组目的蛋白(rFclectin-CRD1和rFclectin-CRD2)。活性分析结果显示,重组目的蛋白对多种病原菌有凝集和抑制生长的作用,并且具有Ca2+依赖活性;其凝集活性可被半乳糖、肽聚糖、脂多糖等多种病原相关分子模式所抑制,研究结果证实,Fclectin是一种典型的C-型凝集素,它可能作为中国明对虾...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
章跃陵 林伯坤 陈俊 胡忠 黄通旺 严芳
以凡纳滨对虾(Litopenaeaus vannamei)为研究对象,运用亲和层析、PAGE、SDS-PAGE、Western-blotting和细菌凝集实验等方法探索凡纳滨对虾血蓝蛋白的细菌凝集活性。结果发现,血蓝蛋白对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、溶藻酸弧菌(Vibrio alginolyticus)、河弧菌(Vibrio fluvialis)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、嗜水气单胞菌(Aeromona hy-drophila)和金黄色葡萄球菌(Stphylococcus aureus)等6种虾类致病菌具有凝集活性,其凝集活性大小为0.27~...
[期刊] 水产学报
[作者]
蒋琼 王雷 罗日祥
依据中国对虾血细胞电镜照片中血细胞整体形态和细胞器、细胞核的变化 ,研究对虾抗凝剂成分配比。初步确认了一种理想的抗凝剂配方NaCl45 0mM、KCl10mM、EDTA .Na2 10mM、HEPES 10mM (pH 7.45 )。它能够良好的保持细胞的整体形态以及细胞器、细胞核的形态。
关键词：
中国对虾 血细胞 抗凝剂 筛选
[期刊] 水产学报
[作者]
李俊烨 宋巧珍 张亦陈 刘逸尘 耿绪云 孙金生
C型凝集素是一种依赖于Ca(2+)而发挥功能的糖蛋白,在一线的固有免疫防御过程中发挥着重要作用。围绕对虾C型凝集素开展深入研究,不仅可以丰富无脊椎动物固有免疫学内容,还有望将其开发为具有免疫增强效果的活性饵料,应用于对虾的健康养殖。本实验根据实验室前期转录组信息提示克隆获得了凡纳滨对虾一种新的C型凝集素基因(LvLc1,Gen Bank注册号:KY937940)。生物信息学分析显示LvLc1基因的开放阅读框全长891 bp,编码296个氨基酸,该基因编码的蛋白质含有一个保守的糖识别结构域(carbohyd
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
高焕 赖晓芳 王伟继 孟宪红 孔杰
本研究探讨了7种细胞凝集素基因在中国对虾中应答白斑综合征病毒(WSSV)感染上的生物学功能差异。结果显示,LT1(DQ167572.1)、LT2(EU834289.1)、LT3(EU834292.1)和LT5(EU834290.1)是肝胰腺组织特异、受WSSV感染诱导表达的基因,其他3种基因主要在肌肉、肠和腮中表达,与WSSV感染诱导无明显相关;在应答WSSV感染不同时间段的表达特征上,7种凝集素基因各不相同;在各组织中的表达量上,方差分析表明7种凝集素基因除在肝胰腺中的表达上存在显著差异外,其他组织中不存在显著差异。这些结果显示这7个凝集素基因在应答WSSV侵染的表达特征上存在较大差异,推测...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
廖绍安 李筠 张晓华 纪伟尚 徐怀恕
用日本对虾(Penaeusjaponicus)亲虾的血清与11株弧菌和7种脊椎动物的红细胞进行凝集反应实验,其中,溶藻弧菌HW283的凝集效价最高,达4096,而产气弧菌和海蛹弧菌的凝集效价最低,仅为8;与红细胞的凝集结果显示,对虾血清与大白鼠、小白鼠、豚鼠的红细胞反应较强,与鸡、人、山羊、兔的红细胞反应较弱。表明日本对虾血清中存在自然凝集素。养成期的日本对虾经弧菌菌苗免疫后,对该致病菌株的抵抗力获得提高。病原感染组、对照组和菌苗免疫组的对虾血清分别对豚鼠、大白鼠和小白鼠红细胞的凝集强度皆为感染组>对照组>免疫组。
关键词：
日本对虾 凝集素 免疫
[期刊] 水产学报
[作者]
李丹彤 张泽虎 赵元凤 钟莉 张泽宇 王冬梅 李伟
将海洋红藻-绒线藻(Dasya villosa)经磷酸盐缓冲液抽提,20%~75%硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-200分子筛层析,得到绒线藻凝集素(DVL)。用Sephadex G-200分子筛层析测得其分子量为547ku。该凝集素凝集兔红细胞的作用不被D-果糖、D-半乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露聚糖、γ-球蛋白所抑制,仅被牛甲状腺球蛋白所抑制,最小抑制浓度为96.88mg.L-1。2价金属离子Ca2+、Mg2+及EDTA对该凝集素凝集活性没有影响。其凝集活性在25~80℃保持不变为28,90~100℃加热30min,活力为27,仍保留50%的活性,说明其具有较强的耐热性。经t-检验,注射...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李伟 熊川男 王建华 郑永唐 金桥 佟长青 曲敏 刘洪伟 汪秋宽
分离提取海洋无脊椎动物贻贝(Crenomytilus grayanus)凝集素,考察其抗HIV活性。采用半乳糖-Sepharose 6B亲和层析和Sephacryl S-200层析分离提取贻贝凝集素(Crenomytilus grayanus lectin,CGL),以光镜检查合胞体抑制试验,以ELSA测定HIVp24抗原表达水平。从海洋无脊椎动物贻贝中分离出的凝集素(CGL),为N-乙酰半乳糖胺/半乳糖(GalNAc/Gal)特异性的凝集素。CGL在27.88mg.L-1浓度时,对HIV诱导细胞病变的抑制达50%;在45.70mg.L-1时,对HIV-1复制的抑制达50%;同时在35.12m...
[期刊] 水产学报
[作者]
黄越倩 张佩 钟名其 姚德福 陈洁辉 章跃陵
既往研究表明,对虾血蓝蛋白(hemocyanin, HMC)是一种具有抗病毒、抗菌等多种免疫学活性的免疫球蛋白超家族(immunoglobulin superfamily, IgSF)分子,但迄今为止,其功能多样性的分子基础尚不是很清楚。本研究以凡纳滨对虾HMC为研究对象,采用亲和层析、凝集素层析技术获得4种HMC成分:A-HMCs、A-HMCl、AL-HMCs和AL-HMCl,发现其对不同细菌的凝集活性存在较大差异。其中,AL-HMCs和AL-HMCl对大肠杆菌和副溶血弧菌的凝集活性明显强于A-HMCs和A-HMCl,前者约为后者的2～32倍。继而,通过双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE)和凝集素印迹技术对不同HMC的蛋白质组成和糖基化修饰水平进行对比分析。结果显示,4种HMC在2-DE图谱上表现为6～7个差异明显的蛋白质点,且与伴刀豆凝集素(concanavalin A, ConA)、花生凝集素(peanut agglutinin, PNA)、荆豆凝集素(ulex europaeus agglutinin, UEA)和双花扁豆凝集素(dolichos bifows agglutinin, DBA)等4种凝集素的识别存在显著性差异。其中,A-HMCl 6个蛋白点均可识别4种凝集素,而A-HMCs 6个蛋白点中仅有4、3个点分别与UEA、DBA反应呈阳性,AL-HMCs和AL-HMCl可以与UEA、PNA特异性显色的点分别为其总蛋白点的3/7、2/6。由此推测,对虾血蓝蛋白功能多样性的分子基础可能与其蛋白质组成和糖基化修饰水平的多样性密切相关。
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
肖静 刘跟成
用人的A、B、O、AB型血和兔、鸡、蛙的共7种血细胞检测4种软体动物凝集素粗制品的凝集活性。结果表明,除缢蛏对人AB型血红细胞,毛蚶对人B型血红细胞不表现凝集活性之外,不同来源的凝集素粗提物对供试血红细胞均有良好的凝集性能。兔血红细胞对各类凝集素最敏感。大多凝集素的pH适应性较广泛。不同凝集素热稳定性不同,缢蛏、毛蚶耐热性较好,80℃处理10min仍能凝集兔血红细胞。不同的糖、金属离子对凝集活性的影响不同,0·02mol/LEDTA可抑制全部凝集素的生物活性。
关键词：
软体动物 凝集素 粗提物 凝集活性
[期刊] 中国水产科学
[作者]
廖绍安 李筠 张晓华 纪伟尚 徐怀恕
日本对虾 (Penaeusjaponicus )亲虾体长 19～ 2 4 .5cm ,取其血清。 7种动物血液取自大白鼠、小白鼠、豚鼠、兔、鸡、羊、人。结果表明 :①虾血清分别在 2 8、37、5 6℃时热处理 30min ,其凝集活性不变 ,在 70℃和 80℃热处理 30min后凝集活性完全丧失。②血清在 pH为 5～ 7.5的TBS缓冲液中凝集活性稳定 ,在pH为 8～ 9之间凝集活性迅速下降。③凝集抑制实验表明半乳糖、甘露糖、L 阿拉伯糖、D 葡萄糖胺、N 乙酰 D 葡萄糖胺等 5种糖对血清凝集素都有较强的抑制作用 ,尤其D 葡萄糖胺和N 乙酰 D 葡萄糖胺的抑制作用更强。④交叉吸...
关键词：
日本对虾 血清凝集素 理化性质 凝集效价
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王秀华 杨冰 黄倢 雷质文
用硝酸纤维素膜(NCM)印迹法测定日本对虾(Penaeusjaponicus)血淋巴碱性磷酸酶(ALP)的相对活性,以标准ALP梯度稀释液为参照,比较NCM印迹法与ALP测定试剂盒法对标准ALP梯度液的测定结果。数据回归分析显示,NCM印迹法所得结果同标准ALP梯度稀释液活性的回归关系极显著(P<0.01);用NCM印迹法测定ALP相对活性的灵敏度为试剂盒的100倍。分别用NCM印迹法与ALP测定试剂盒测定对虾血淋巴的ALP相对活性,测得结果呈强直线相关性(P<0.01),说明用NCM印迹法测定对虾血淋巴ALP相对活性具可行性。
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