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[期刊] 水产学报
[作者]
陆剑锋 万全 殷章敏 林琳 翁世兵 叶应旺 姜绍通
胶原蛋白是生物体内一种重要的蛋白质,也是结缔组织的主要蛋白成分。与陆生动物(如猪、牛等)比较,水生动物胶原蛋白具有优良的理化性质和生理活性功能,已引起人们的广泛关注。中华鳖是我国传统的名贵水产品,其裙边胶原蛋白含量丰富,具有极高的药用价值和营养价值。采用胃蛋白酶酶解法在酸性条件下提取中华鳖裙边胶原蛋白,研究酶添加量、底物浓度、提取时间对提取效果的影响,确定了制备裙边胶原蛋白的最适条件为:酶添加量4mg/mL,底物浓度4%,提取时间14h。粗提胶原蛋白通过盐析、透析等纯化步骤,再经SDS-PAGE电泳、热变性温度测定、紫外及傅立叶变换红外扫描等技术方法分析了胶原蛋白的生化特征,结果显示提取到的裙...
关键词：
中华鳖 裙边 胶原蛋白 提取 纯化
[期刊] 水产学报
[作者]
周瑞 李若男 周丽莎 邱婷婷 王静玉 谭啸 陈舜胜
为增加暗纹东方鲀附加值，考察不同处理方法对提取暗纹东方鲀鱼皮胶原蛋白的影响，本研究以暗纹东方鲀鱼皮为研究对象，通过热水法、酸法和胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶处理鱼皮提取 胶原蛋白。通过对不同胶原蛋白的提取率、氨基酸组成、傅里叶红外光谱（FTIR）、紫外光谱(UV)、扫描电镜、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的研究，对暗纹东方鲀鱼皮胶原蛋白特性进行表征和比较。结果显示，用胃蛋白酶得到的胶原蛋白提取率最高；氨基酸组成相似但含量不同；3种酶制备的胶原蛋白中脯氨酸含量显著低于酸和热水制备的胶原蛋白；FTIR扫描结果表明，5种处理方法得到的胶原蛋白都存在Amide A、Amide B、Amide Ⅰ、Amide Ⅱ和Ⅲ，均保持了胶原蛋白三螺旋结构；紫外光谱显示在235 nm左右有强吸收峰，结合FTIR确定其为典型的胶原蛋白，经过SDS-PAGE分析确定暗纹东方鲀皮中的胶原蛋白为Ⅰ型胶原蛋白，酸法和胃蛋白酶较好的保留了蛋白结构，木瓜蛋白酶作用化学键广泛，得到小分子量的胶原蛋白分子；扫描电镜结果显示，酸法提取的胶原蛋白最适合应用在生物医学材料上运载药物。由此可见，不同处理方法提取的胶原蛋白理化特性存在一定差异，不同的酶制备胶原蛋白分子量分布会产生明显差别，可根据研究需要选用不同处理方法开发胶原蛋白产品。
[期刊] 水产学报
[作者]
汪海波 梁艳萍 汪海婴 周坚 张寒俊
以草鱼鱼鳞为原料,分别提取鱼鳞中的酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),着重开展了其包括热稳定性、体外酶降解性以及胶原海绵材料特性在内的相关研究,并与哺乳动物来源的猪皮胶原(PC)相比较。实验结果表明,制备所得的3种胶原蛋白均为典型的Ⅰ型胶原并具有完整的三螺旋结构;PC的热变性温度(41.6℃)明显高于ASC(34.8℃)和PSC(35.2℃);3种胶原蛋白的体外酶降解性能受水解酶的种类、胶原蛋白提取方法、胶原蛋白来源、胶原蛋白受热历史以及蛋白的自组装程度影响。胶原蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶对淡水鱼胶原均具有不同程度的降解能力,但胶原蛋白酶的降解能力最强;相同条件下,3种胶原蛋...
关键词：
草鱼 鱼鳞 胶原蛋白 生物学性能
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
曾少葵 蓝海明 章超桦 洪鹏志
以罗非鱼鳞为原料,提取酸溶胶原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)和酶促酸溶胶原蛋白(pepsin-soluble collagen,PSC),并对PSC的理化性质及其酶解产物抗氧化性进行探讨。实验结果表明:0.1 mol/L HCl提取ASC和PSC的得率分别为3.52%和14.88%;PSC氨基酸组成中,每1000个氨基酸残基甘氨酸为351个,亚氨基酸——脯氨酸和羟脯氨酸为180;PSC强吸收峰在205 nm处,磷酸盐缓冲液检测PSC的性质,与I型胶原蛋白相符。PSC经胃蛋白酶水解3 h,过氧化抑制率达到82.8%,抗氧化效果略优于等量的Vc。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
李华
为了开发和利用大鲵皮胶原蛋白,在低温4℃条件下使用酶解工艺提取养殖大鲵皮中的胶原蛋白,并研究了其组成和部分生化性质。结果表明:大鲵皮羟脯氨酸含量为22.3 mg/g,胶原蛋白提取率为26.7%(湿重),其中水分、粗灰分、粗脂肪和粗蛋白含量分别为6.75%、0.62%、0.38%和92.10%,含有成人六种必需氨基酸和儿童必需氨基酸两种,亚氨基酸含量为171残基/1 000残基数,脯氨酸羟基化比例为51.5%。紫外吸收显示大鲵皮胶原蛋白的强吸收峰在230 nm附近,根据SDS-PAGE分析,含有两种不同的α链(α1和α2),初步确认提取得到的大鲵皮胶原蛋白是Ⅰ型胶原蛋白。
[期刊] 水产学报
[作者]
崔凤霞 薛长湖 李兆杰 董平 薛冬梅
对仿刺参(Stichopus japonicus)胶原蛋白的提取及理化性质进行了研究。结果表明,低温提取可得到胃蛋白酶促溶且去除端肽(telopeptide)的酸溶性胶原蛋白(PSC)。紫外-可见扫描测得PSC的最大吸收峰位于220nm;氨基酸分析发现,在1 000个总氨基酸残基中,甘氨酸为329个,羟脯氨酸为66个,羟脯氨酸与脯氨酸之比为0.69,酪氨酸、苯丙氨酸及组氨酸的含量较低,可能不含胱氨酸,这些特性均符合Ⅰ型胶原的特征。差示量热扫描法(DSC)测定仿刺参PSC的热稳定性温度(Ts)为57℃,低于牛皮Ⅰ型胶原5℃;苯酚-硫酸及次甲基蓝法测得PSC的总糖及粘多糖含量分别为0.61%及0....
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
傅燕凤 沈月新 杨承刚 张渊
研究了用有机酸(醋酸、柠檬酸、乳酸)对几种主要的淡水鱼,鲢(Hypophthalmichthys molitrix)、鳙(Aristichthys nobdis)、草鱼(Glenopharyngodon idellus)鱼皮胶原蛋白进行提取。研究发现,鲢、鳙、草鱼鱼皮的蛋白质含量分别约为25.9％、23.6％、29.8％,羟脯氨酸含量分别为1.8％、1.9％、2.3％。结果表明,鲢、鳙鱼皮经2.5％NaCI溶液(1:10),草鱼鱼皮经5％NaCl溶液(1:10),温度5℃左右,12h磁力搅拌处理两次,除去的可溶性杂蛋白分别占原总蛋白的5.9％、6.7％、9.1％。鱼皮再经加酸(1:30)溶胀、...
关键词：
鱼皮 胶原蛋白 提取
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李莉 顾赛麒 王锡昌 刘源 高榕
为了优化人工养殖大鲵(Andrias davidianus Blanchard)皮中胶原蛋白的提取工艺,以加酶量、液料比和酶解时间为试验因素,胶原蛋白提取率为响应值,采用Box-Behnken设计进行试验。通过响应面法考察了3个因素对胶原蛋白提取率的影响,建立了胶原蛋白提取率的二次多项式回归模型,并对提取工艺进行了优化。试验结果表明,3个因素对鲵皮中胶原蛋白提取率的影响大小次序为:液料比>酶解时间>加酶量;交互项中"液料比-酶解时间"项对提取率影响显著,其他交互项对提取率影响不显著。为满足实际需要,对模型预测得到的大鲵皮胶原蛋白最优提取工艺稍做调整,具体参数为:加酶量16.5%、液料比15 m...
关键词：
大鲵皮 胶原蛋白 提取工艺 响应面
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
冯瑞方 邹潇潇 王凯 刘怀高 洪惠 罗永康 谭雨青
为了开发牛骨胶原蛋白肽(BBP)的抗疲劳功能，对BBP的氨基酸组成和肽段序列进行表征；选取16只7周龄、SPF级的Balb/c小鼠并随机分为2组，包括对照组(生理盐水)和肽干预组(w(BBP)=200 mg/kg)),每日定时灌胃。BBP干预4周后，测定小鼠的负重游泳时间和运动后血清代谢积累物含量。BBP干预18周后，测定血清氧化因子、炎症因子含量和肠道菌群组成。结果表明：1)BBP疏水性氨基酸比例为61.37%,大部分肽段来源于蛋白P02453(I型胶原蛋白的α1链)。2)BBP干预后小鼠负重游泳时间显著提高，且运动后血氨浓度显著降低、谷胱甘肽浓度显著升高(P<0.05),表明了BBP潜在的抗疲劳能力。3)BBP干预后，在非运动状态下小鼠血清SOD和GSH-Px显著升高，MDA浓度显著降低(P<0.05),表明了BBP潜在的抗氧化能力；在免疫方面，BBP干预后小鼠血清抗炎因子IL-10和促炎因子IL-6、TNF-α浓度均显著下降(P<0.05),主要的免疫器官胸腺指数显著下降(P<0.01),脾指数显著上升(P<0.05);在粪便中，潜在的有益菌Akkermansia、Lactococcus在肽干预后上调。综上，BBP具有潜在的抗疲劳作用，这种作用可能是通过调节体内抗氧化能力以及肠道菌群结构实现的。
关键词：
肽 抗疲劳 抗氧化 炎症 肠道菌群
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
卫功庆 刘少华 范宁 李梁 赵岩 张连学
【目的】采用响应曲面法对鹿角盘胶原蛋白酶解提取工艺进行优化。【方法】以马鹿鹿角盘为原料,胶原蛋白提取率为指标,选取料液比、pH值、加酶量、酶解温度、酶解时间5个因素进行单因素试验,确定各因素的最优提取条件。在单因素试验的基础上,选取pH值、加酶量、酶解温度、酶解时间为影响因素,进行4因素3水平的Box-Behnken试验设计,采用响应曲面法分析4个因素对胶原蛋白提取率的影响。【结果】单因素试验结果表明:料液比1∶20、pH值1.8、加酶量4%、酶解温度37℃、酶解时间为6h时胶原蛋白提取率最高。响应曲面法得到的最佳提取工艺为:pH 1.77、加酶量3.94%、酶解温度36.78℃、酶解时间5....
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李晓敏 杨晨宇 邓云 陶宁萍 李立 邱伟强 金银哲
利用响应面法对日本鳗鱼皮胶原蛋白的提取工艺进行优化，并对其理化性质和致敏性进行研究。采用酸酶浸提法提取鱼皮胶原蛋白，基于单因素试验，以料液比、提取液浓度和提取时间作为考察因素，以胶原蛋白得率为指标，得到最佳提取工艺为：料液比1:30 g/mL，提取液浓度0.6 mol/L，提取时间48 h，胶原蛋白得率为32.89%。将优化后得到胶原蛋白进行理化性质表征分析，SDS-PAGE结果表明，胶原蛋白含有五个条带，属于Ⅰ型胶原蛋白；必需氨基酸和药用氨基酸占比分别为19.61%和11.04%；傅里叶红外光谱（FTIR）光谱显示其保留了完整的三螺旋结构；在230 nm处有最大的紫外吸收峰；由扫描电镜（SEM）显示胶原蛋白的微观结构呈现出纤维状结构；胶原蛋白的热转变温度和热变性温度分别为38.5 ℃和28.3 ℃；酶联免疫吸附反应（ELISA）和模拟胃肠液实验可知胶原蛋白具有一定的致敏原性，为鳗鱼皮胶原蛋白的进一步研究提供理论基础。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
黄雯 袁春红 徐萌 王金梅 包建强
选取淡水鱼斑点叉尾鮰（Ｉｃｔａｌｕｒｕｓ ｐｕｎｃｔａｕｓ，以下简称鮰鱼）和海水鱼蓝点马鲛（ｓｃｏｍｂｅｒｏｍｏｒｕｓ ｎＩｐｈｏｎＩｕｓ，以下简称鲅鱼）鱼皮作为原料，进行胶原蛋白的提取研究。提取方法改良如下：在预处理阶段，鱼皮样品被尽可能切碎且调节溶液更换频率；在提取阶段，在盐析步骤前，添加三羟甲基氨基甲烷粉末将醋酸溶液的酸碱值调节至中性。结果表明，应用改良后的方法提取胶原蛋白，提取周期缩短为７ ｄ。鮰鱼鱼皮胶原蛋白的变性温度是３６．５℃，鲅鱼鱼皮胶原蛋白是３０．５℃。水解电泳图谱显示，鲅鱼鱼皮胶原蛋白比鮰鱼鱼皮胶原蛋白更易被完全水解，鮰鱼鱼皮胶原蛋白比鲅鱼鱼皮胶原蛋白更稳定。
关键词：
斑点叉尾鮰 蓝点马鲛 胶原蛋白 提取方法
[期刊] 水产学报
[作者]
刘光明 史千玉 蔡秋凤 潘冰青 翁武银 苏文金 曹敏杰
以日本鳗鲡皮与肌肉组织为研究对象,采用碱溶、酸溶、盐析、冻干等方法纯化得到胶原蛋白,采用加热、饱和硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析等方法纯化得到两种亚型的小清蛋白(PV-Ⅰ和PV-Ⅱ),纯化的目标蛋白经动物特异性抗体的免疫印迹实验确证。酶联免疫吸附测定和免疫印迹分析结果显示,纯化的胶原蛋白和小清蛋白分别与鱼类过敏患者阳性血清发生特异性反应,且二者之间无免疫交叉反应。体外模拟胃液消化实验和SDS-PAGE分析结果显示,胶原蛋白和小清蛋白均具有较高的消化稳定性。结果提示,日本鳗胶原蛋白和小清蛋白具有较高的消化稳定性和免疫原性,二者可引发不同患者的IgE介导特异性超敏反应。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
骆艳娥 范代娣 刘树文 马晓轩 王小刚
以凯氏定氮法为基准方法,采用考马斯亮蓝法、Folin-酚法、双缩脲法对从重组大肠杆菌发酵产物中提取的类人胶原蛋白含量进行了测定。结果表明,这种类人胶原蛋白和牛血清白蛋白与明胶的特性存在差异,在考马斯亮蓝法、Folin-酚法、双缩脲法3种比色分析方法中,采用双缩脲法得出的类人胶原蛋白与牛血清白蛋白的回归方程系数相差最小,并得出回归方程的校正系数α和β,其中α表示类人胶原蛋白与牛血清白蛋白的特性差异(α=0.6761),β为类人胶原蛋白样品中蛋白的百分含量(g/g)。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
王哲平 刘淇 曹荣 殷邦忠
采用胃蛋白酶在酸性条件下酶解提取刺参体壁胶原蛋白并对其分离纯化,然后将胶原蛋白分别在不同温度下进行热处理,经SDS-PAGE电泳和傅立叶变换红外扫描等方法分析热处理前后胶原蛋白的生化特征。结果显示,提取的胶原蛋白具有较高的纯度,且存在完整的三股螺旋结构;胶原蛋白在40℃热处理条件下不仅二级结构被破坏,一级结构也被部分破坏,α链和β链条带消失,分子量降低(<100kDa);70℃达到了各种肽链叠加所表现出的热收缩温度,肽链发生聚集、收缩,分子量开始升高;80℃加热条件下,肽链进一步收缩,分子量达到120kDa左右,而且仍保持一定量的二级结构;当温度超过100℃时,胶原蛋白一级结构被严重破坏。
关键词：
刺参 胶原蛋白 温度 分子量 结构
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