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[期刊] 水产学报
[作者]
赵景霞 孙金生 张子怡
采用膜片钳的内面向外式记录了中华绒螯蟹眼柄端髓X器官(MTXO)神经内分泌细胞钙激活钾通道活动。结果表明,在对称性高钾溶液中(200mmol.L-1),钙激活钾通道的单通道活动为快速开放的矩形方波,时程长短不一,通道电导为(213.4±11.2)pS。在-80~+80mV钳制电压下,通道电流幅度及开放概率呈现明显的电压依赖性;随浴液游离Ca2+浓度的增加,通道的开放概率和开放数目增加,表现出明显的钙敏感性。药物敏感试验结果显示,80mmol.L-1四乙胺(TEA)可完全阻断通道活动。表明中华绒螯蟹眼柄端髓X器官(MTXO)神经分泌细胞钙激活钾通道(BKCa)具有大电导、电压依赖性、Ca2+敏感...
[期刊] 水产学报
[作者]
张子怡 宇克莉 孙金生
采用膜片钳技术之内面向外记录模式观察了中华绒螯蟹(河蟹)眼柄视神经节端髓X器官(MTXO)神经内分泌细胞对0~1 mmol/L ATP的反应,发现河蟹眼柄MTXO细胞表达ATP敏感钾通道(KATP)。电生理特征研究结果表明,在细胞膜内外两侧的K+浓度均为200mmol/L时,KATP呈弱的内向整流性,电导为68 pS,有翻转电位。灌流ATP对KATP通道的开放产生浓度依赖性抑制作用,当细胞外液中ATP浓度超过0.1 mmol/L后,去极化刺激不能诱发KATP电流,并且1 mmol/L ATP可明显阻断KATP开放活动。胆固醇等甾醇类物质对河蟹眼柄MTXO细胞KATP无明显的影响,但0.1 mm...
[期刊] 水产学报
[作者]
孙金生 赵景霞 相建海
采用全细胞膜片钳技术,通过检测膜电容变化的方法实时监测细胞的分泌活动,在单个细胞水平观察了5-羟色胺(5-HT)对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)眼柄视神经节端髓X器官(MTXO)3种类型神经内分泌细胞兴奋性和分泌活动的调控作用。在电流钳模式下,5-HT使河蟹眼柄MTXO A型和B型细胞产生去极化反应,并诱导细胞兴奋,出现不同频率的动作电位;相反5-HT诱导C型细胞产生超级化反应,抑制细胞的兴奋活动。在全细胞电压钳记录模式下,5-HT明显地引起A型和B型神经内分泌细胞的膜电容增加,C型细胞的膜电容没有明显的变化。这表明,5-HT通过调控河蟹眼柄神经内分泌细胞的兴奋性诱导CHH...
[期刊] 水产学报
[作者]
王雪惠 孙金生 杨卫军
采用反相高效液相色谱技术(RP-HPLC),首次分离、纯化了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)眼柄神经多肽激素,获得了高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)纯品。初步的生理活性鉴定结果表明,该激素有显著的升血糖作用,能使中华绒螯蟹血糖水平在30min内升到最高值,为(56.14±10.58)mg.100mL-1(n=4),比正常水平增加了(2.87±0.73)倍,被确定为甲壳动物高血糖激素(CHH)。CHH在窦腺(sinus gland,SG)中的含量最丰富,占SG粗提物蛋白总量的(12.26±2.57)%,占SG激素总量的(52...
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
崔青曼 袁春营 吴婷婷
采用切除单侧、双侧眼柄及注射黄体酮药物的方法研究对幼蟹卵巢发育的影响。结果表明 ,切除双侧眼柄可明显增加幼蟹体重、蜕壳频率 ,极显著提高卵巢指数、肝胰腺指数和卵巢 /肝胰腺质量比 ,极显著增大卵母细胞直径 ;切除单侧眼柄可极显著增加卵巢指数和卵巢 /肝胰腺质量比 ,极显著增大卵母细胞直径 ;注射黄体酮药物可极显著增大卵母细胞直径 ,卵巢指数、卵巢 /肝胰腺质量比增加未达统计学上的显著水平。
关键词：
中华绒螯蟹 切除眼柄 黄体酮 卵巢发育
[期刊] 水产学报
[作者]
陆宏达 张明辉
中华绒螯蟹循环血液中血细胞总数为(13357±7196)cells.mm-3,其中大颗粒细胞所占(49.8±7.5)%,其长轴(16.6±1.1)μm,短轴(10.2±0.6)μm;大小颗粒中间型细胞所占比例(20.6±5.3)%,其长轴(13.1±1.2)μm,短轴(8.4±0.5)μm;小颗粒细胞所占比例(29.3±4.8)%,其长轴(12.4±1.2)μm,短轴(8.1±0.4)μm;无颗粒细胞所占比例(0.2±0.2)%,其长轴(11.3±1.3)μm,短轴(8.9±1.1)μm。血液离体后,在血液完全凝固的(97.7±25.3)s时间内,只有无颗粒细胞和小颗粒细胞形态结构发生变化,细...
[期刊] 水产学报
[作者]
洪宇航 杨筱珍 成永旭 徐敏杰 黄根勇 杨志刚 黄毅
为了解中华绒螯蟹血细胞组成、分类及其在免疫应答过程中起到的重要作用,本研究通过细胞化学和细胞酶学分析,并结合细胞形态观察,对中华绒螯蟹血细胞的组成、分类进行了研究。同时,通过人工感染嗜水气单胞菌后血液的总血细胞数(THC)和不同类型血细胞数(DHC)的变化,研究不同类型血细胞在免疫应答过程中所发挥的作用。结果显示,依据本实验分类方法,中华绒螯蟹血细胞可以分为4类:大颗粒细胞(G)、中间型颗粒细胞(IG)、小颗粒细胞(SG)和透明细胞(H)。其中小颗粒细胞数量最多,约占33.54%±0.98%,中间型颗粒细
[期刊] 中国水产科学
[作者]
朱宁宁 王文 顾志峰 李正荣
改进常规血液细胞电镜制样技术 ,直接取中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)血淋巴液固定、脱水、包埋、电镜观察。结果显示 ,中华绒螯蟹血淋巴具有 3类细胞 ,即无颗粒细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞。其中 ,无颗粒细胞的核质比最大 ,异染色质高度浓缩、边缘化 ,几乎没有常染色质 ,胞质内线粒体数目相对较多 ,与高等动物的中幼红细胞结构很相似 ,该细胞数目在中华绒螯蟹血淋巴中最多 ,可能担负着血液的能量转换功能 ;小颗粒细胞核内常染色质较多 ,内质网、高尔基体发达 ,胞质中存在 0 .2～ 0 .4 μm的电子致密颗粒 ,而且胞质中有许多大小不一的空泡 ,细胞表面有许多突起似伪足 ,类似...
关键词：
中华绒螯蟹 血淋巴 超微结构
[期刊] 水产学报
[作者]
刘志强 冯建彬 邱高峰
为了快速准确判断中华绒螯蟹卵细胞是否发育成熟,实验根据斑马鱼卵细胞透明液的配方进行一系列的探索,最终发现用无水乙醇、冰乙酸和甲醛按60∶1∶30的体积比混合成的透明液处理中华绒螯蟹卵细胞,在细胞内可以观察到一白色斑点。对卵巢组织进行切片观察,证实该斑点即为中华绒螯蟹卵细胞的细胞核。在发育成熟的卵细胞中则不能观察到白色斑点。研究表明,无水乙醇、冰乙酸和甲醛按60∶1∶30的体积混合成的透明液能够有效透明中华绒螯蟹卵细胞,为准确判断其卵母细胞是否发育成熟,及时对卵母细胞进行人工诱导具有重要的实用价值。
关键词：
中华绒螯蟹 卵细胞 细胞核 透明液
[期刊] 水产学报
[作者]
胡锦丽 任星潮 刘逸尘 孙金生 耿绪云 张亦陈
为了更精确地对甲壳动物血细胞进行快速分类和功能分析,本研究以中华绒螯蟹为例,依据其血细胞内具有颗粒结构的特征,与常规显微观察对比,探讨了一种基于图像流式细胞仪的血细胞自动化分类新方法,并测量了体质量为(10±3) g的中华绒螯蟹的血细胞对直径1μm微球的吞噬情况。结果显示,两种方法都可将中华绒螯蟹血细胞分为4个类群。显微镜观察分类基于胞内可见颗粒,但由于缺乏精细的量化标准,批次样品的人工辨识结果波动较大;而图像流式方法以胞内全部颗粒结构为对象,利用高精度检测模块测量,结果更准确、客观,而且通量高、重复性好。测量结果显示,中华绒螯蟹血淋巴中无颗粒、小颗粒、中颗粒及大颗粒细胞占比分别为40.62%±2.65%、36.68%±6.84%、7.80%±1.16%和16.51%±5.60%,依据测量的颗粒特征区分的4个类群界限清晰,缺乏过渡样点,提示各类细胞之间可能没有相互转化。进一步的活体微球吞噬实验证实,中华绒螯蟹的4类血细胞都具有吞噬功能,并以无颗粒细胞为主要吞噬类群;吞噬微球的细胞比例在注射后6 h内呈钟型曲线变化,4 h可达峰值(5.69%±0.44%),表明中华绒螯蟹血细胞能高效清除血淋巴中的异物。研究表明,图像流式细胞仪适合于中华绒螯蟹的血细胞分类分析和功能研究,本研究结果为同类研究提供了重要参考,将有助于更全面了解甲壳动物血细胞的功能。
[期刊] 水产学报
[作者]
陈立侨 赵云龙 王玉凤 陈魏 唐灵燕 堵南山 赖伟
采用细胞松驰素Ｂ（Ｃ．Ｂ）处理法，研究了诱导中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｓｉｎｅｎｓｉｓ）三倍体、四倍体的可能性和处理条件。实验所用Ｃ．Ｂ浓度为０．５～２．０ｍｇ／Ｌ，处理的起始时间分别在受精后１０～２５ｍｉｎ（诱导三倍体）和８．５～９．８ｈ（诱导四倍体），处理的持续时间为１０～２５ｍｉｎ。三倍体的适宜诱导条件为卵子在受精后１５ｍｉｎ，浓度为１．５ｍｇ／Ｌ的Ｃ．Ｂ溶液处理１８ｍｉｎ。三倍体诱导率最高可达５８．１８％。根据诱导三倍体的适宜Ｃ．Ｂ处理浓度和处理时间，用１．５ｍｇ／ＬＣ．Ｂ溶液处理卵子１８ｍｉｎ，获得了２９．４６％～５７．８９％的四倍体胚胎。另外，还对中华绒螯蟹三倍体、四倍体胚胎的...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
郭敏 魏华 陶贤继 吴婷婷
为了解甲基法呢酯(methyl farnesoate,MF)在中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)卵巢发育中的调控作用,采用离体方法研究了中华绒螯蟹大颚器(mandibular organ,MO)以及X-器官窦腺复合体(X-organ-sinus gland,XO-SG)对卵巢发育的作用。将MO与离体卵母细胞共培养作为实验组1,将MO和XO-SG与离体卵母细胞共培养作为实验组2,仅添加培养液的卵母细胞作为对照组。实验发现,蟹去眼柄(eyestalk ablation,ESA)后的第1、3、6、14天,同对照组相比,MO对其卵母细胞的发育均有极显著促进作用。ESA处理第6天,MO对...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
田志环 康现江 焦传珍
取一年生未成熟中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)幼蟹,甲壳宽度在15 40 mm,暂养在75 cm×50 cm×45 cm的玻璃缸内,24 h充气,自然光照,每天换水1/3,每次换水后投喂土豆、杂鱼等食物,动物适应实验室条件1周后进行实验。为得到蜕皮后的样本,将处于蜕皮前晚期的个体在相同条件下单独饲养。根据已报道方法,将中华绒螯蟹的蜕皮周期分为蜕皮间期C期、蜕皮前D0、D1和D3–4期、蜕皮后A-B期等5个时期。采用细胞学和组织学方法观察中华绒螯蟹蜕皮过程中肝胰腺细胞组成的变化,结果显示,R细胞数量在蜕皮间期和蜕皮前期都占绝对优势,虽然在蜕皮前早期D0期数量显著下降(P<0.0...
关键词：
细胞组成 肝胰腺 蜕皮周期 中华绒螯蟹
[期刊] 水产学报
[作者]
候利波 陆银月 任秋霖 孔祥会 朱雷 顾伟 孟庆国
为了探究低氧胁迫对中华绒螯蟹血淋巴细胞影响的分子机制，本研究通过使用Nova Seq 6000测序技术，检测了低氧组（1.5±0.5）mg/L和对照组（6.0±0.5）mg/L处理24 h后的中华绒螯蟹血淋巴细胞的转录组数据变化。首先，对测序得到的原始数据进行拼接、注释以及筛选分析获得128 614个转录本和128 614条基因，平均长度为2 634 bp (N50)，Q30 > 92%。其次，以1.2倍为阈值（P
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
敖红 王海 连正兴 李宁 夏国良
激活是体细胞核移植技术的关键步骤。本研究对常用化学激活剂乙醇、钙离子载体A2 3187和离子霉素以及添加 6 二甲基氨基嘌呤 (6 Dimethylaminopurine ,6 DMAP)和放线菌酮 (cycloheximide ,CHX)对山羊卵母细胞的激活效果以及不同卵龄的卵母细胞激活后体外发育效果进行了比较。结果表明 :离子霉素处理组激活率显著高于乙醇和A2 3187处理组 (89.6 %vs 6 3.5 % ,6 8.7% ;P
关键词：
绵羊 卵母细胞 化学激活
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