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[期刊] 水产学报
[作者]
张子怡 宇克莉 孙金生
采用膜片钳技术之内面向外记录模式观察了中华绒螯蟹(河蟹)眼柄视神经节端髓X器官(MTXO)神经内分泌细胞对0~1 mmol/L ATP的反应,发现河蟹眼柄MTXO细胞表达ATP敏感钾通道(KATP)。电生理特征研究结果表明,在细胞膜内外两侧的K+浓度均为200mmol/L时,KATP呈弱的内向整流性,电导为68 pS,有翻转电位。灌流ATP对KATP通道的开放产生浓度依赖性抑制作用,当细胞外液中ATP浓度超过0.1 mmol/L后,去极化刺激不能诱发KATP电流,并且1 mmol/L ATP可明显阻断KATP开放活动。胆固醇等甾醇类物质对河蟹眼柄MTXO细胞KATP无明显的影响,但0.1 mm...
[期刊] 水产学报
[作者]
赵景霞 孙金生 张子怡
采用膜片钳的内面向外式记录了中华绒螯蟹眼柄端髓X器官(MTXO)神经内分泌细胞钙激活钾通道活动。结果表明,在对称性高钾溶液中(200mmol.L-1),钙激活钾通道的单通道活动为快速开放的矩形方波,时程长短不一,通道电导为(213.4±11.2)pS。在-80~+80mV钳制电压下,通道电流幅度及开放概率呈现明显的电压依赖性;随浴液游离Ca2+浓度的增加,通道的开放概率和开放数目增加,表现出明显的钙敏感性。药物敏感试验结果显示,80mmol.L-1四乙胺(TEA)可完全阻断通道活动。表明中华绒螯蟹眼柄端髓X器官(MTXO)神经分泌细胞钙激活钾通道(BKCa)具有大电导、电压依赖性、Ca2+敏感...
[期刊] 水产学报
[作者]
孙金生 赵景霞 相建海
采用全细胞膜片钳技术,通过检测膜电容变化的方法实时监测细胞的分泌活动,在单个细胞水平观察了5-羟色胺(5-HT)对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)眼柄视神经节端髓X器官(MTXO)3种类型神经内分泌细胞兴奋性和分泌活动的调控作用。在电流钳模式下,5-HT使河蟹眼柄MTXO A型和B型细胞产生去极化反应,并诱导细胞兴奋,出现不同频率的动作电位;相反5-HT诱导C型细胞产生超级化反应,抑制细胞的兴奋活动。在全细胞电压钳记录模式下,5-HT明显地引起A型和B型神经内分泌细胞的膜电容增加,C型细胞的膜电容没有明显的变化。这表明,5-HT通过调控河蟹眼柄神经内分泌细胞的兴奋性诱导CHH...
[期刊] 水产学报
[作者]
林树根 黄志坚 王寿昆
应用过氧化物酶标记的链霉亲和素 (Streptavidin peroxidase简称S -P法 )免疫组织化学技术 ,用抗胰高血糖素、胃泌素、生长抑素、5 羟色胺抗体对中华鳖 (Trionyxsinensis)的胃、肠、胰内分泌细胞进行研究。结果表明 :5 HT细胞在消化道各段均有分布 ,以小肠密度最高 ,胃、大肠、直肠其次 ,食管最少。Som细胞在胃底部、幽门部和小肠各段密度较高 ,胃贲门部、大肠和直肠密度较低。Gas细胞分布于胃体部、幽门部和小肠各段 ;胃贲门部、大肠和直肠未检出Gas细胞。Glu细胞在消化道各段均未检出 ,在胰腺中均鉴别出Glu细胞和Som细胞
[期刊] 中国水产科学
[作者]
郭敏 魏华 陶贤继 吴婷婷
为了解甲基法呢酯(methyl farnesoate,MF)在中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)卵巢发育中的调控作用,采用离体方法研究了中华绒螯蟹大颚器(mandibular organ,MO)以及X-器官窦腺复合体(X-organ-sinus gland,XO-SG)对卵巢发育的作用。将MO与离体卵母细胞共培养作为实验组1,将MO和XO-SG与离体卵母细胞共培养作为实验组2,仅添加培养液的卵母细胞作为对照组。实验发现,蟹去眼柄(eyestalk ablation,ESA)后的第1、3、6、14天,同对照组相比,MO对其卵母细胞的发育均有极显著促进作用。ESA处理第6天,MO对...
[期刊] 水产学报
[作者]
林树根 吴德峰 王寿昆
应用过氧化物酶标记的链霉亲和素(streptavidin-peroxidase简称S-P法)免疫组织化学技术,用抗5-羟色胺、生长抑素、胃泌素、β-内啡肽、胰高血糖素抗体对日本鳗鲡的胃肠胰内分泌细胞进行研究。结果表明:日本鳗鲡胃肠道各段均存在5-HT和Som免疫活性内分泌细胞。Gas细胞分布于胃体部、幽门部和前肠、中肠;胃贲门部和后肠未检出Gas细胞。β-内啡肽、Glu细胞在胃肠道各段均未检出。在胰腺中均鉴别出Glu细胞和Som细胞。
[期刊] 水产学报
[作者]
王雪惠 孙金生 杨卫军
采用反相高效液相色谱技术(RP-HPLC),首次分离、纯化了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)眼柄神经多肽激素,获得了高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)纯品。初步的生理活性鉴定结果表明,该激素有显著的升血糖作用,能使中华绒螯蟹血糖水平在30min内升到最高值,为(56.14±10.58)mg.100mL-1(n=4),比正常水平增加了(2.87±0.73)倍,被确定为甲壳动物高血糖激素(CHH)。CHH在窦腺(sinus gland,SG)中的含量最丰富,占SG粗提物蛋白总量的(12.26±2.57)%,占SG激素总量的(52...
[期刊] 海洋渔业
[作者]
刘婷 章龙珍 张涛 庄平 冯广朋 赵峰 马境
以中华鲟(Acipenser sinensis)脑垂体总RNA为模板,采用RT-PCR和RACE方法,获得中华鲟神经内分泌多肽(7B2)基因的3个重叠片段,测序后拼接得到986 bp全长基因序列,其中包括5'端非翻译区(5′-UTR)14 bp、3′端非翻译区(3-′UTR)261 bp和开放阅读框711 bp。翻译编码236个氨基酸。其中前43个氨基酸为7B2的信号肽。经BLAST比对发现中华鲟7B2蛋白的同源性与斑马鱼(Danio rerio)的相似性最高为82%。系统发育分析表明,中华鲟与斑马鱼亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析表明:在脑中7B2 mRNA表达量最高,心脏、性腺、胰等组...
关键词：
神经内分泌多肽7B2 中华鲟 克隆 表达
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
陈磊 张洪海 马建章
为了解紫貂消化道内分泌细胞的形态、类型和局部分布的特点,选取5只健康成年紫貂,应用免疫组织化学技术链霉卵白素-过氧化物酶法对其消化道内分泌细胞进行检测。结果表明:7种内分泌细胞在紫貂的消化道中均可检出;阳性细胞主要集中在胃腺和肠腺上皮细胞间,以胃黏膜和小肠前段细胞的种类和数量最多,大肠各段仅检测到5-HT-IR细胞,食管无内分泌细胞检出;细胞形态多样,贲门腺区、胃底腺区、回肠、盲肠和直肠的内分泌细胞以圆形和卵圆形为主,幽门腺区、十二指肠、空肠和结肠的内分泌细胞多呈楔形;在所测细胞中,5-HT-IR细胞广泛分布于胃肠道各段,其余6种细胞的分布具有一定的区域性。紫貂消化道的大多数内分泌细胞的分布型...
关键词：
消化道 内分泌细胞 免疫组织化学 紫貂
[期刊] 中国水产科学
[作者]
施志仪 陈晓武 顾一峰
牙鲆(Paralichthys olivaceus)体质量约0.5 kg,活体取材,通过免疫组织化学染色和H.E染色,在光学显微镜下观察牙鲆消化道组织结构。结果表明,牙鲆消化道和高等脊椎动物类似,分为口咽腔、食道、胃、胃盲囊和肠。肠也可分为前肠、中肠和后肠,三者之间没有明显的界限。胃和前肠是消化吸收主要的部位,胃盲囊和前肠结构和功能非常类似。Serotonnin细胞和P Substance细胞在牙鲆胃前部的黏膜中零星分布,在胃体中较多见,平均每104μm2胃体黏膜上皮约各有2.2和2.0个阳性细胞。而Gastrin细胞分布在胃盲囊和前肠中,平均每104μm2黏膜上皮分别有0.98个和0.71个...
关键词：
牙鲆 消化道 内分泌细胞 免疫组织化学
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张志强 吴孝兵
应用5种特异性哺乳动物胃肠激素抗血清,采用卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(Avidin-biotin-peroxidase complex,ABC)免疫组织化学法,对红耳龟(Trachemys scripta elegans)消化道内分泌细胞进行了鉴别和定位研究。结果显示:大多数内分泌细胞呈楔形、梭形或烧瓶形,少数呈圆形或椭圆形。5-羟色胺和生长抑素细胞在消化道各段均有分布,分别以胃幽门部和十二指肠、胃体部为最高,在食道和空肠处最低。胰高血糖素和胃泌素细胞均在直肠处密度最高,但分布型不同。血管活性肠肽细胞在胃幽门部密度最高,回肠未见。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
苏泽红 陈晓武 柳金雄 陈秋生
采用ABC免疫细胞化学法,对中华鳖(Trionyx sinensis)胃肠道5-羟色胺(5-HT)细胞和胃泌素(Gas)细胞的分布和形态进行了观测,并比较了冬眠期和活跃期的分布差异。结果显示,5-HT细胞在胃和肠道各段均有分布,在胃分布于胃腺,在肠则分布于黏膜上皮。在胃的前部和中部,5-HT细胞位于胃腺各部,而在胃的后部,5-HT细胞则主要集中于胃腺的上部和胃小凹底部。在肠道中,由前向后5-HT细胞的分布呈递减趋势,且大部分细胞呈上窄下宽的锥体形、梨形等,顶端伸达肠腔,为开放型内分泌细胞,少数细胞为封闭型。前、中部胃腺中,Gas细胞的分布数量较多,且位于腺细胞之间,一般为开放型。后部胃腺中Ga...
[期刊] 水产学报
[作者]
王瑶 杨志刚 郭子好 姚琴琴 曾奇韬 杨筱珍 成永旭
根据陆地蟹RXR基因保守区序列设计上下游引物,采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)以及cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆中华绒螯蟹RXR基因并进行各组织间的表达分析。序列分析表明,中华绒螯蟹RXR cDNA全长1 517 bp,编码433个氨基酸。经BLASTn和BLASTx分析表明,中华绒螯蟹RXR基因的氨基酸序列与陆地蟹RXR基因的氨基酸序列相似性最高,为96%。系统进化树分析显示,中华绒螯蟹RXR的氨基酸序列与陆地蟹RXR聚为一支。荧光定量PCR结果显示,RXR在所有检测的组织中均有表达,且在中华绒螯蟹Y器官中表达量最高,肝胰腺、鳃和肌肉中少量表达,心脏、胃、肠、胸神经节和脑神经节...
[期刊] 水产学报
[作者]
王瑶 杨志刚 沈城 姚琴琴 曾奇韬 刘启彬 成永旭
为了研究蜕皮激素受体(EcR)在中华绒螯蟹蜕皮和性腺发育过程中的作用,本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)以及cDNA末端快速扩增(RACE)技术,克隆了中华绒螯蟹EcR基因全长cDNA序列。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,分析该基因在不同组织、蜕皮过程及卵巢发育阶段的表达特征,并研究了甲基法尼酯(MF)对卵巢中EcR的调控作用。结果显示,中华绒螯蟹EcR cDNA全长2 156 bp,编码422个氨基酸,其序列与招潮蟹相似性最高,为89%。荧光定量PCR结果显示,EcR在Y器官中表达量最高;在卵巢和肌肉中少量表达;在肝胰腺、鳃、心脏、胃、肠、胸神经节和脑神经节中微量表达...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
方之平 潘黔生 聂秀云 白雪梅
使用４种哺乳动物抗血清；胰高血糖素（ｇｌｕｃａｇｏｎ，Ｇｌｕ），胃泌素（Ｇａｓｔｒｉｎ，Ｇａｓ），生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｏｎ，Ｓｏｍ）５－羟色胺（５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ，５－ＨＴ），采用过氧化物酶标记的链霉亲和素（Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ－Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，简称Ｓ－Ｐ法）免疫细胞化学技术，对尼罗非鲫（Ｔｉｌａｐｉａｎｉｌｏｔｉｃａ，简称非鲫）和短盖巨脂鲤（Ｃｏｌｏｓｏｍａｂｒａｃｈｙｐｏｍｕｍ，简称白鲳）的胃肠胰（Ｇａｓｔｒｏ－Ｅｎｔｅｒｏ－Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ，ＧＥＰ）内分泌系统进行了研究。结果表明：２种鱼的消化道和胰岛都不同程度地存在ＡＰＵＤ（ＡｍｉｎｅＰｒｅ...
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