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[期刊] 水产学报
[作者]
邱高峰 吴萍 楼允东
应用组织切片、组织化学、电镜及体外培养技术研究了中华绒螯蟹促雄腺的结构与功能。结果表明 ,中华绒螯蟹促雄腺 1对 ,呈不规则索状 ,位于近阴茎基部射精管的表面 ,由许多实心腺泡组成 ;腺体结构与个体精巢发育周期密切相关 ,可明显划分为增殖期、合成期和分泌期 3个发育时期 ;腺细胞以全浆方式分泌激素 ,茚三酮———Schiff反应、磷钼酸法反应呈阳性 ,推断分泌激素中主要含蛋白质和脂类 2种化学成分 ;体外共培养实验证明 ,促雄腺具有促进精子发生与排放及抑制卵母细胞成熟的功能。
关键词：
中华绒螯蟹 促雄腺 结构 功能
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
汪桂玲 韦荣编 邱高峰
采用不同浓度的17β 雌二醇注射中华绒螯蟹雄性幼蟹,每隔7d注射1次,共注射5次,35d后取样。利用组织切片技术和电镜技术研究了中华绒螯蟹促雄腺显微和超微结构的变化。常规石蜡切片显示,处理组的促雄腺细胞直径明显小于对照组,同时,电镜切片结果也表明在不同浓度的处理组,促雄腺在β 雌二醇的影响下,腺细胞出现不同程度的退化,如腺细胞核变形,呈不规则的形状,核仁消失,核内异染色质增多等,而8μg/g体重的处理组效果最明显,细胞质内出现溶酶体,其它细胞器很少见。随着浓度的增加,17β 雌二醇对中华绒螯蟹促雄腺的发育及分泌抑制作用愈明显。
关键词：
中华绒螯蟹 17β-雌二醇 促雄腺
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
肖美南 徐佳念 蔡生力 刘红
将中华绒螯蟹促雄性腺的蛋白提取物经凝胶过滤后所得到的各个组分分别进行促雄性腺素(AGH)生物活性的初步检测,以输精管和精巢的蛋白提取物作为阴性对照,保幼激素(JHⅢ)作为阳性对照,结果发现其中7个组分对卵巢组织的氨基酸吸收具有明显的抑制作用,且与磷酸缓冲液(PBS)存在显著差异,初步判断该7个组分可能存在AGH生物活性;阴性对照组对卵巢组织的氨基酸吸收没有抑制作用,JHⅢ阳性对照与PBS差异极为显著。再将上述可能具有AGH活性的7个组分分别注射到中华绒螯蟹雌性幼蟹体内,观察是否真正具有AGH活性,结果其中2个样品注射后雌性幼蟹产生了性别逆转现象,证明该2个样品组分中确实存在中华绒螯蟹促雄性腺素...
[期刊] 水产学报
[作者]
刘红 蔡生力 张成锋 朱嘉濠
该论文首次报道了经由促雄性腺提取物的注射而在蟹类中引起的性逆转现象。此前关于蟹类促雄性腺活性研究的报道极少,而且蟹类的雄性化均是由促雄性腺的移植所产生。本实验中将锯缘青蟹和中华绒螯蟹的促雄性腺提取物分别注射到刚刚完成性别分化的中华绒螯蟹雌性幼蟹体内,此时幼蟹处于4至5期,壳宽为5~8 mm。注射之后,幼蟹经过大约1~2次蜕皮,此时在注射锯缘青蟹以及中华绒螯蟹的促雄性腺提取物的两组实验幼蟹中均能观察到雄性化现象,而注射生理盐水的对照组实验幼蟹中未能观察到相同现象。由此本实验可以证明促雄性腺确实是蟹类的一种雄性激素,注射促雄性腺提取物能引起雌性幼蟹发生性逆转;同时根据锯缘青蟹和中华绒螯蟹的促雄性腺...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
宣富君 鲍成满 付龙龙 张悦 王刚 王坤 张建光 唐伯平 管卫兵 成永旭
为增强对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)交配过程的认识，利用急速冷冻、扫描电镜、组织学等技术，对其交配系统的形态功能进行了观察研究。结果表明：中华绒螯蟹交配系统具有短尾派蟹类的典型特征，属于雄性G1长型。G1整体粗壮光滑，由链接腹部的原肢和内肢组成。内肢长而挺直，呈三角柱状，两侧边缘融合而成一缝合沟，内含输精管道，纵贯两端；基部背面近内侧开口比较大，外侧上覆盖1带羽状刚毛的肉状瓣膜，交配时阴茎可伸入(或通过瓣膜)开口的外侧部分；顶端含一类似火山口的通道，四周布满刚毛。G2整体细小，呈帆状，顶端内陷，上附4根透明状修长刚毛。G1/G2内肢管壁厚度不一，协作部分段近输精通道一侧均存在较薄管壁，具有一定收涨能力，交配时可封闭输精通道；G1内肢内部大部分中空，G2可深入部分以上存在含液滴的疏松结缔组织，且管壁内侧出现连接官腔的通道，可以推断此处精液和G1官腔积液可能存在某种形式的交流，而后半段出现肌肉组织。雌性阴门覆盖一光滑厚实的阴盖，可与所在胸节连接的关节左右摆动，由此控制阴门开合。阴道呈半月型，管壁较厚的一侧契入另一侧，且契入一侧附有厚实的肌肉束。由此可以推断，中华绒螯蟹交配时G1并没有直接插入雌蟹的生殖道内，而是与阴门及周边胸板直接契合，通过与G1共同进化出“对接状”的交配系统，以保障精荚精液等雄性产物成功通过阴道输入纳精囊内储存。本研究阐述了中华绒螯蟹交配系统潜在的内在协作机制，丰富蟹类授精生物学知识，可以为今后开展河蟹遗传育种及人工授精等相关工作提供理论和技术支持。
关键词：
中华绒螯蟹 交配系统 生殖肢 阴道
[期刊] 水产学报
[作者]
许青松 李兵 杨冰慧 马金龙 洋雯 曲琛
Akt作为PI3K-AKT 信号通路的核心分子，在细胞增殖、代谢、发育和存活等过程中发挥重要作用。本研究采用特异性引物及PCR技术，克隆获得了中华绒螯蟹Akt基因（EsAkt）并进行生物信息学分析，实时定量PCR技术检测了EsAkt在中华绒螯蟹不同组织和不同免疫刺激后的表达水平，免疫荧光技术检测了EsAkt蛋白的细胞定位，双链RNA干扰技术分析了EsAkt干扰后凋亡基因的变化。结果显示，EsAkt分子包含PH结构域、中心催化结构域（S＿TKc）和羧基端疏水结构域（S＿TK＿X）3个保守的结构域。EsAkt在所有被检测的组织中呈现组成型表达，且在免疫相关组织（如肝胰腺、鳃和血淋巴细胞）中的表达量显着高于胃和肠道（P < 0.01）。EsAkt蛋白主要以弥散状的形式分布在细胞质中。中华绒螯蟹注射脂多糖（LPS）和嗜水气单胞菌后，显著诱导EsAkt转绿本的表达，LPS免疫刺激12 h后，EsAkt响应达到峰值，为对照组的4.35倍（P < 0.01），刺激48 h后，EsAkt的mRNA表达水平有所降低，但仍是对照组2.62倍（P < 0.01）；嗜水气单胞菌免疫刺激6 h后，EsAkt响应达到峰值，为对照组的9.05倍（P < 0.01），刺激48 h后，EsAkt的mRNA表达水平回落到正常水平。双链RNA干扰EsAkt后，EsAkt的mRNA表达水平为对照组的0.38倍（P < 0.05），而凋亡相关基因EsCaspase-3-like表达水平显著上调，为对照组的2.69倍（P < 0.05）。本研究丰富了中华绒螯蟹PI3K-AKT信号通路研究的基本资料，为进一步研究甲壳动物免疫防御机制奠定了基础。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
洪美玲 陈立侨 顾顺樟 刘超 龙章强 张伟
以中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)为研究对象,蟹初始体质量为(71.25±1.13)g。设计对照组(不额外添加氨氮,水中本底氨氮质量浓度约为1 mg/L)、低浓度组(10 mg/L NH4Cl)、中浓度组(50 mg/L NH4Cl)、高浓度组(100 mg/L NH4Cl)4种不同的氨氮质量浓度,分别于胁迫的第1天、3天、5天、15天抽取血淋巴进行相关免疫指标测定,并观察氨氮胁迫15 d后对肝胰腺组织结构的影响。结果表明:(1)3个处理组的血细胞密度(DHC)在胁迫初期(第1天和第3天)均显著低于对照组(P<0.05);在胁迫第5天,各组血细胞密度均升至最高;但至第15天时...
关键词：
氨氮胁迫 中华绒螯蟹 免疫指标 B细胞
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
杨志刚 张晨晨 江青青 陈阿琴 成永旭 王爱民
微塑料污染对水生动物的生物学效应研究多集中于海洋，对淡水生物潜在影响的研究有限。本研究以中华绒螯蟹为实验对象，研究了3种不同粒径（5 μm、1 μm、100 nm）的聚苯乙烯(Polystyrene)微塑料颗粒对中华绒螯蟹幼蟹的毒性效应。将中华绒螯蟹幼蟹分别暴露于三种粒径的聚苯乙烯微塑料1d、3d、7d后，对其肝胰腺损伤指标：谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）；血清免疫指标：碱性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）；氧化应激指标:丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）；神经毒性指标：乙酰胆碱酯酶（AchE）进行分析：此外通过苏木精－伊红（HE）染色法观察鳃、肝胰腺组织病变情况。研究结果表明，暴露于微塑料7 d后，100 nm组的MDA含量显著增高，CAT活性显著降低，3个处理组的AKP活性均显著降低，1 μm，100 nm组的ACP活性显著降低。AST、ALT和AchE活性均随着粒径减小和暴露时间的延长活性逐渐降低。不同粒径的聚苯乙烯都能对中华绒螯蟹造成不同程度的肝胰腺损伤、使其氧化应激和免疫能力下降，其毒性排序依次是100 nm > 1 μm > 5 μm，说明粒径大小是影响中华绒螯蟹健康和造成组织损伤的重要因素之一。本研究结果为深入理解微塑料对淡水甲壳动物的毒性效应提供了基础数据和理论依据。
关键词：
聚苯乙烯 中华绒螯蟹 粒径 综合毒性
[期刊] 水产学报
[作者]
曹曦 王兰梅 高建操 杜金梁 曹丽萍 聂志娟 徐钢春
早熟中华绒螯蟹是指相对于2龄正常性成熟的个体，其在第1年就达到了性成熟，造成的危害阻碍着其产业的发展。为分析雌雄中华绒螯蟹的早熟差异调控机制。本研究通过早熟中华绒螯蟹雌雄眼柄、肝胰腺和性腺组织的转录组比较筛选，获得差异基因，进一步与正常成熟雌雄差异基因进行分析，最终获得和早熟有关的性别差异基因。结果显示，组装共获得337 221个转录本和135 007个基因。分别在眼柄、肝胰腺和性腺组织中获得和早熟有关的性别差异基因1505、756和11223个。其中3个组织共同的与早熟有关的性别差异基因7个，包括 wash复合亚基1（washc1）和β-淀粉状蛋白a4（βa4）基因等。KEGG通路分析发现，中华绒螯蟹和早熟有关的雌雄差异基因富集的通路主要为亚油酸代谢、a-亚麻酸代谢、乙醚脂代谢和花生四烯酸代谢通路，其中磷脂酶A2（pla2）基因在其中发挥重要作用。研究表明，这些与脂类代谢有关的通路与基因在雌雄中华绒螯蟹早熟过程中，发挥着不同的作用。研究结果为雌雄中华绒螯蟹早熟机制的差异调控提供了基础，从而对其产业发展具有重要意义。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
顾赛麒 王锡昌 陶宁萍 张晶晶 吴娜
采用顶空固相微萃取-气-质联用技术(HS-SPME-GC-MS),对采自阳澄湖的特级、1级、2级的雄性及雌性中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)性腺中的香气成分进行了鉴定并以内标法对其定量。6种中华绒螯蟹样本中共检测到8类58种挥发物,采用主成分分析法(PCA)对标准化后的8类香气成分的浓度值进行分析,以主成分综合得分作为评价依据得到:特级和1级雌蟹性腺的香气品质最好,且呋喃类、醇类、芳香类、醛类4类成分对其贡献显著,是表征"高品质风味"的特征性香气成分;将性别因素统一考虑后,中华绒螯蟹等级越高,性腺香气品质越好;相同等级条件下,雌蟹性腺香气评分高于雄蟹。结果证实,主成分分析法可...
[期刊] 水产学报
[作者]
宋学宏 朱茂晓 王永玲 李义 曹萍 沈振华
采用常规石蜡切片技术和透射电镜技术,对患有肝胰腺白化症的中华绒螯蟹病变组织和细胞进行观察。发现病蟹肝胰腺、鳃、肌肉等组织细胞发生了不同程度的病变,其病理特征为肝细胞水肿、变性、坏死,细胞中脂肪颗粒锐减,线粒体水肿、嵴消失、形成空泡,内质网、溶酶体解体成小泡。鳃组织增厚,上皮细胞微绒毛排列疏松、不规则,部分线粒体嵴消失,出现膜性退化。坏死的肝细胞和鳃上皮细胞中出现细菌颗粒。肌细胞的病变主要表现为细胞核固缩,肌丝松驰、水肿、断裂、肌质网溶解形成小泡。中华绒螯蟹具有重要生理功能的肝胰腺、鳃组织发生了严重病变,使其功能损伤,不耐运输;而肌肉的松驰、肝胰腺脂肪的锐减影响了中华绒螯蟹的品质。同时,病变组织...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
宋学宏 程建新 朱茂晓 蔡春芳 杨彩根 沈振华
2002年10月以来,通过逐户访问及调查问卷的形式对2001～2002年东太湖中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)养殖区"白膏症"发病症状、扣蟹的来源、投饵模式、水草覆盖率、螺蛳投入量、底泥状况、回捕率、产量等进行较为系统的调查。同时对病蟹进行寄生虫检查、病原微生物分离、回接攻毒及病变组织的电镜观察等病原学研究,结果未发现致病性生物。调查结果表明,中华绒螯蟹"白膏症"的发病率雄蟹显著高于雌蟹,其症状为甲壳发黄,头胸甲腹面下肝区发白色或青黑色,肝胰腺由正常的橘黄色变成淡黄或白色;症状严重的病蟹胸腔积水,肌肉松驰萎缩,肝胰腺呈糜烂状,鳃丝发黑。调查结果显示,"白膏症"的发生与饵料的投...
关键词：
中华绒螯蟹 肝胰腺白化症 病因
[期刊] 水产学报
[作者]
王承志 邱高峰
应用反向高效液相色谱法(RP-HPLC)从中华绒螯蟹脑组织提取液初步分离了促性腺释放激素(GnRH)类似物,使用章鱼促性腺释放激素抗体(anti-octGnRH)对分离组分进行免疫斑点印迹实验鉴定,获得了免疫反应呈阳性分离组分,表明脑组织粗提液中含有GnRH类似物分离组分。对该GnRH类似物进行基质辅助激光解吸/电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOFMS)分析,结果显示多肽物质分子量范围在800～1400u,主要由8种小分子多肽组成,其中一种组分的分子量与章鱼促性腺释放激素(octGnRH)分子量接近。
[期刊] 水产学报
[作者]
陈再忠 王武 成永旭
采用磷酸苯二钠法在520nm波长测定了未成熟、早熟和正常成熟中华绒螯蟹肝胰腺与性腺中的酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(ALP)。结果表明:(1)各组蟹肝胰腺ACP和ALP活性都显著高于性腺;(2)早熟蟹肝胰腺中ACP活性都显著高于未成熟蟹而低于正常成熟蟹,在各发育阶段没有性别差异,但是,早熟雌蟹和正常成熟雌蟹卵巢中ACP活性都较早熟雄蟹和正常雄蟹精巢低,早熟与正常成熟个体没有差异;(3)早熟雌蟹肝胰腺ALP活性显著高于未成熟和正常成熟雌蟹,而与三组雄蟹处于同一水平,但是,早熟和正常成熟雌雄蟹的性腺中ALP活性没有显著差异。由此得出结论:(1)性腺发育所需营养物质的动员或合成主要与肝胰腺ACP...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
吴旭干 龙晓文 刘乃更 何杰 王武 成永旭
研究了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)、日本绒螯蟹(E.japonica)及其杂交种成蟹性腺指数、肝胰腺指数、出肉率、总可食率及其常规生化成分,结果显示:(1)中华绒螯蟹的精巢指数显著高于其它两种群蟹,但其肝胰腺指数、出肉率和总可食率均无显著差异;中华绒螯蟹的卵巢指数也显著高于日本绒螯蟹和杂交蟹,而杂交蟹的肝胰腺指数显著高于其它两种群蟹。(2)中华绒螯蟹、日本绒螯蟹和杂交种精巢中水分、蛋白和脂肪含量分别最低,日本绒螯蟹精巢中碳水化合物含量最高;杂交种肝胰腺蛋白、脂肪和碳水化合物含量均最高,日本绒螯蟹肌肉中脂肪含量显著低于其它两种群。(3)日本绒螯蟹卵巢水分含量显著高于其它两种...
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