- 年份
- 2024(6358)
- 2023(9289)
- 2022(7975)
- 2021(7377)
- 2020(6295)
- 2019(14560)
- 2018(14249)
- 2017(27305)
- 2016(15276)
- 2015(17548)
- 2014(17662)
- 2013(17528)
- 2012(16550)
- 2011(15178)
- 2010(15187)
- 2009(14350)
- 2008(14261)
- 2007(13463)
- 2006(11588)
- 2005(10394)
- 学科
- 济(60900)
- 经济(60836)
- 管理(39204)
- 业(37164)
- 企(29671)
- 企业(29671)
- 方法(28540)
- 数学(24860)
- 数学方法(24581)
- 农(17857)
- 学(16599)
- 中国(15906)
- 财(14592)
- 业经(13124)
- 贸(12359)
- 贸易(12357)
- 地方(12277)
- 易(11991)
- 农业(11689)
- 制(11532)
- 理论(10294)
- 和(10059)
- 银(9286)
- 银行(9229)
- 融(9066)
- 金融(9060)
- 行(8772)
- 务(8632)
- 环境(8625)
- 财务(8610)
- 机构
- 大学(227065)
- 学院(226059)
- 济(85216)
- 经济(83185)
- 研究(81327)
- 管理(79649)
- 理学(68205)
- 理学院(67335)
- 管理学(65903)
- 管理学院(65515)
- 中国(59064)
- 科学(55229)
- 农(50070)
- 京(49074)
- 所(44148)
- 研究所(40587)
- 农业(40413)
- 业大(40266)
- 财(38778)
- 中心(37423)
- 江(36067)
- 财经(30678)
- 北京(30654)
- 范(30644)
- 师范(30143)
- 院(28980)
- 州(28315)
- 技术(28015)
- 经(27664)
- 省(26513)
- 基金
- 项目(151668)
- 科学(116340)
- 基金(106861)
- 研究(105537)
- 家(96137)
- 国家(95356)
- 科学基金(78593)
- 社会(63198)
- 省(61572)
- 社会科(59572)
- 社会科学(59545)
- 基金项目(56204)
- 自然(52940)
- 划(52661)
- 自然科(51661)
- 自然科学(51639)
- 自然科学基金(50708)
- 教育(49823)
- 资助(44110)
- 编号(44018)
- 成果(36800)
- 重点(35375)
- 发(33379)
- 部(32654)
- 课题(31463)
- 创(31303)
- 计划(30926)
- 科研(29934)
- 创新(29262)
- 大学(27669)
- 期刊
- 济(94342)
- 经济(94342)
- 研究(60958)
- 中国(46933)
- 学报(46327)
- 农(45611)
- 科学(38138)
- 大学(32933)
- 学学(31134)
- 农业(30857)
- 财(30417)
- 管理(27129)
- 教育(26924)
- 技术(19394)
- 融(18257)
- 金融(18257)
- 业(16587)
- 业经(16005)
- 经济研究(15159)
- 财经(14786)
- 版(13278)
- 图书(12882)
- 经(12723)
- 问题(12623)
- 业大(12454)
- 科技(10888)
- 理论(10636)
- 技术经济(10611)
- 农业大学(10598)
- 贸(10478)
共检索到334858条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 水产学报
[作者]
杨佳睿 郝彤 李倩一 孙金生
为了构建中华绒螯蟹代谢过程研究的系统工具，实验在已经构建的中华绒螯蟹蛋白互作网络的基础上，首先采用邻接节点注释法对未知蛋白的分子功能进行预测。随后采用GO回溯法，构建了代谢蛋白网络并对网络中蛋白分子功能、亚细胞定位和途径分布进行了分析。分子功能注释中，确定了932 个蛋白的分子功能，占所有未知分子功能蛋白的97%。最终构建的代谢蛋白互作网络包含2 045 个蛋白及这些蛋白之间的15 927 条互作关系。网络中94.2%（1 926/2 045）的蛋白具有亚细胞定位信息，大多分布于有膜细胞器中；96.1%的蛋白（1 966/2 045）具有分子功能信息，大多具有催化活性和结合活性。进一步对确定了分子功能和亚细胞定位的蛋白在40 个KEGG子系统中的分布进行分析，发现参与翻译和氨基酸代谢过程的蛋白较多，也有一部分参与免疫和运输过程。本文的研究结果可为中华绒螯蟹代谢相关的蛋白功能、定位方面的研究提供重要的数据参考，对系统研究中华绒螯蟹代谢过程及代谢相关疾病具有重要价值。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
彭浩然 蒲运丹 张永至 薛杨 武改霞 青玲 孙现超
【目的】前期研究显示To MV外壳蛋白(coat protein,CP)可以与烟草蛋白L(CP-interacting protein-L,IP-L)相互作用,本研究旨在明确To MV CP与IP-L的共定位情况、IP-L的组织表达和在To MV侵染条件下烟草IP-L及其编码蛋白的表达变化情况,为进一步明确IP-L的功能提供依据。【方法】通过双酶切法从笔者实验室构建保存的p GBKT7-CP和p GADT7-IP-L重组载体上切下To MV CP和IP-L目的片段,构建融合蛋白植物表达载体p PZP-IP
[期刊] 中国农业科学
[作者]
谭静 宋欣密 傅晓斌 唐明珠 吴帆 华启云 李红亮
【目的】研究中华蜜蜂(Apis cerana cerana,简称中蜂)重组化学感受蛋白CSP1与不同化学信息素的结合功能、模式及其亚细胞定位,明确触角特异表达的CSP1蛋白功能。【方法】将克隆的中蜂CSP1构建至p ET-32a(+)载体并转入BL21(DE3)感受态细菌中,挑取单克隆菌落接种于LB培养基,培养过夜后按1%(V/V)进行转接,继续培养至OD600≈0.4左右时,加入IPTG至终浓度为1 mmol·L(-1)后继续诱导5 h。将诱导好的CSP1大肠杆菌菌液离心弃上清,再加入细菌裂解液超声破碎
[期刊] 水产学报
[作者]
许晨远 迟骋 郑肖川 刘佳岱 张彩燕 刘文斌 刘艳玲 闫亚楠 黄健 王胜
为研究发酵饲料配伍配合饲料投喂对中华绒螯蟹幼蟹生长性能、抗氧化、免疫机能和代谢的影响,实验分别制备了5组饲料:对照组以幼蟹配合饲料为基础饲料(F0),各实验组在配合饲料基础上额外添加日投喂量5%、10%、15%和20%发酵饲料,并依次命名为F5、F10、F15和F20。150只均重无显著差异的中华绒螯蟹随机分5组,每组设3个重复,每重复10只蟹,分别饲喂对应组饲料,每天饱食投喂1次,养殖周期59 d。在养殖结束后采集血淋巴和肝胰腺以测定抗氧化指标、免疫指标和蛋白代谢酶活性。结果发现,额外投喂发酵饲料后,各组幼蟹的增重率和特定生长率均较对照组显著升高。随着额外投喂发酵饲料量的增加,血淋巴中过氧化氢酶含量先上升后下降,其中F5、F10和F15组较对照组显著升高。各处理组酸性磷酸酶活性高于对照组,但差异不显著。各组总蛋白和球蛋白含量随着发酵饲料额外投喂量提高呈现先升高后降低的趋势,但是各组间差异不显著。此外,额外添加日投喂量20%比例以下的发酵饲料,可以提升肝胰腺中胰蛋白酶、胃蛋白酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性。研究表明,额外投喂发酵饲料可以促进中华绒螯蟹幼蟹的生长,还可以提高其抗氧化能力、免疫机能和蛋白代谢能力。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张蓓 刘同坤 黄菲艺 邵帅旭 吴小婷 侯喜林
[目的]开花基因FT是开花通路下游关键基因。本文旨在研究不结球白菜BcFT的亚细胞定位及互作蛋白的筛选,深入了解不结球白菜BcFT的功能及其调控机制。[方法]构建亚细胞定位载体p EZS-NL-BcFT,利用亚细胞定位技术研究BcFT的空间表达。通过酵母双杂交技术筛选与BcFT互作的蛋白,构建酵母双杂交诱饵载体p GBKT7-BcFT,转化酵母Y2H Gold菌株,验证自激活性和自毒性。对不结球白菜酵母双杂交c DNA文库进行筛选,得到与BcFT互作的片段,并根据基因片段进行比对,以不结球白菜c DNA为
[期刊] 水产学报
[作者]
郭慧芝 付建平 昌鸣先 郭政 朱邦科 聂品
铁蛋白普遍存在于生物体内,具有铁离子解毒和储存等功能。在构建脂多糖刺激的中华绒螯蟹cDNA文库的基础上,获得了中华绒螯蟹铁蛋白基因EsFer的cDNA序列,其全长为1118bp,包含480bp的开放阅读框,推测编码的蛋白质为159氨基酸,其5′和3′端的非编码区分别为178bp和461bp,预测的分子量为18.3ku,理论等电点为5.81,在15～37aa处有一个跨膜螺旋。在5′非编码区核甘酸序列的135～162的位置有个特殊的结构,即铁反应元件(iron response element,IRE)。通过荧光定量PCR的方法研究了铁蛋白基因在中华绒螯蟹的组织表达分布,以及经脂多糖刺激后在血淋巴...
关键词：
中华绒螯蟹 铁蛋白 表达 脂多糖
[期刊] 水产学报
[作者]
庄翠珩 孙金生 张亦陈 田金泽 耿绪云 朱丽娜 李冉
为了解甲壳动物高血糖激素如何调节中华绒螯蟹体内的血糖水平，实验前期进行了转录组和表达谱分析，最终选取Ｅｓｆｌｏｌ作为研究对象。根据转录组数据提示，结合ＲＡＣＥ方法首次从中华绒螯蟹肝胰腺组织中克隆得到Ｅｓｆｌｏｌ基因并进行了序列及组织表达分析。结果显示Ｅｓｆｌｏｌ基因开放阅读框（ｏＲｆ）１ ２８１ ｂｐ，编码４２６个氨基酸，具有典型的ｓｐｆＨ超家族和ｐＨｂ结构域，不含信号肽序列。多重序列比对分析表明，Ｅｓｆｌｏｌ氨基酸序列与中华绒螯蟹ｆｌｏｔｉｌｌｉｎ－１相似度最高，达到５７％。荧光定量ｐＣＲ结果显示成熟中华绒螯蟹Ｅｓｆｌｏｌ基因在肝胰腺组织中的表达量最高，其次为肌肉，另外在心脏、鳃、肠道、胸神．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吴小婷 邵帅旭 李英 张昌伟 侯喜林 沈振国 刘同坤
[目的]本文旨在揭示CDF1基因在不结球白菜(Brassica rapa ssp.chinensis)抽薹开花过程中的调控机制,验证其是否与FKF1蛋白发生互作。[方法]以‘苏州青’为材料,采用同源克隆方法获得BrCDF1基因全长序列,并与其他物种进行氨基酸序列比对;将BrCDF1与报告基因YFP融合构建亚细胞定位载体p Early Gate101-BrCDF1-YFP,采用农杆菌介导的方法将其瞬时表达于本氏烟(Nicotiana benthamiana)叶片中;激光共聚焦显微镜观察,利用酵母双杂交和双分
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
代红梅 刘志朋 张霞 杨忠 曾日彬 王配 常勇诚 霍金龙
利用RT-PCR技术从版纳微型猪近交系睾丸组织中扩增出GSKIP全长编码序列并分析其分子特征，对GSKIP基因进行功能注释，分析其与非编码RNA(miRNA和lnRNA)间的调控关系，并构建ceRNA转录调控网络，进一步分析GSKIP蛋白的基本功能，构建多物种进化树和相互作用蛋白网络.通过RT-PCR获得了BMI GSKIP CDS区全长420 bp,该基因含4个外显子；基因功能分析表明，GSKIP主要参与Wnt信号通路；基因靶向作用分析表明，猪GSKIP受ssc-miR-181c、ssc-miR-181b、ssc-miR-181a、ssc-miR-335和miR-644-5p等5个miRNA的靶向调控；蛋白质结构分析表明，GSKIP包含1个DUF727结构域，α螺旋在二级结构中占比最高；多物种进化分析表明，BMI GSKIP氨基酸序列在哺乳动物中较为保守，与绵羊和牛的亲缘关系最为接近；蛋白互作网络分析表明，BMI GSKIP与10个蛋白存在相互作用.
[期刊] 中国水产科学
[作者]
林仕梅 罗莉 叶元土 周继术 薛敏 杨军科
于１９９９年６～７月收集中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｓｔｎｅｎｓｉｓ）粪便，用酸不溶灰分法测定中华绒螯蟹对饲料的消化率，同时测定其胃、肠、肝胰脏蛋白酶活力。结果表明，蛋白质能量比（Ｐ／Ｅ）２８．９３ ｍｇ／ｋｊ水平对中华绒螯蟹胃、肝胰脏蛋白酶活性明显高于 Ｐ／Ｅ ２７．３０ ｍｇ／ｋＪ和 ３０． ３１ ｍｇ／ｋＪ ２个水平（Ｐ＜０．０５）， ３个 Ｐ／Ｅ水平间肠蛋白酶活性没有明显差异（Ｐ＞０．０５）。 Ｐ／Ｅ ２８．９３ ｍｇ／ｋＪ水平饲料蛋白质、脂肪、能量和总表现消化率分别为８２．５７％、 ７７． ５９％、 ８３． ９４％和 ７６． ９８％，均高于另 ２个水平，３个 Ｐ／Ｅ水平间营养物质的...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
邱凉 刘红 蔡生力
通过RT-PCR,RACE等技术克隆得到中华绒螯蟹卵黄蛋白原的cDNA序列全长,其长度为7 921bp,软件分析后知其含有一个7 689 bp的开放阅读框,其5'和3'的非翻译区分别为28 bp和204 bp;预测该序列编码一个含2 562个氨基酸残基的蛋白质,和其它已知卵黄蛋白原序列的蟹类相比,理化性质、空间构型相似,且含有2个结构域:参与脂质转运的卵黄蛋白原N端结构域(Vitellogenin_N),以及血管性血友病因子(von Willebrand factor)D型结构域(VWD)。将其开放阅读框翻译为氨基酸序列后进行数据库对比(BLASTP),与其他已知的甲壳类卵黄蛋白原序列间存在3...
关键词：
中华绒螯蟹 卵黄蛋白原 cDNA 克隆
[期刊] 中国水产科学
[作者]
钱国英 朱秋华
在水族箱中 ,用体重 19～ 2 5g的中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)对配饵中蛋白质的能蛋比与蟹生长之间的关系进行了研究。蛋白质设定为 36 %、4 0 %和 4 4 % 3个水平 ,能蛋比设定了 4 0、4 5和 50kJ/kg 3个水平 ,每个水平各有 6个重复。结果表明 ,配饵中的粗蛋白含量和能量蛋白比与蟹体生长、蛋白增加量和饲料系数存在着显著的相关关系 (P
关键词：
中华绒螯蟹 生长 配合饵料 能蛋比
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陆秋萍 季锷 蒋明义
[目的]本文通过对水稻甘氨酸富集基因OsGRP1的研究,从分子角度及生理遗传角度分析其在ABA诱导的抗氧化防护中的作用,并探究OsGRP1是否影响植物抗氧化防护与植物细胞壁发育。[方法]克隆基因分别构建相应重组质粒,用酵母双杂交试验(yeast two-hybrid, Y2H)研究转录因子ZFP36是否与OsGRP1蛋白水平互作,并通过GST pull-down(glutamine-S-transferase pull-down)、免疫共沉淀Co-IP(coimmunop-recipitation)、双分子荧光互补试验(bimolrcular fluorescence complementation, BiFC)辅证互作的真实性。观察ABA和H_2O_2条件下不同时间处理野生型水稻幼苗后OsGRP1转录水平表达的变化情况,鉴定OsGRP1转基因材料并测定突变体中与抗氧化防护相关的CAT和SOD活性及OsCatB基因和OsSodCc2基因的表达量,利用遗传材料分析在干旱和氧化胁迫下的耐逆性。[结果]OsGRP1基因的CDS序列为642 bp,编码214个氨基酸。通过Y2H、GST pull-down、Co-IP、BiFC证实OsGRP1与ZFP36互作的真实性。ABA和H_2O_2等处理均可诱导OsGRP1基因的表达上调。超表达OsGRP1基因可以提高抗氧化防护酶CAT和SOD活性及诱导OsCatB和OsSodCc2基因上调表达,并且OsGRP1-OE水稻在干旱和氧化胁迫下的存活率明显高于野生型水稻,而OsGRP1-KO水稻在干旱和氧化胁迫下的存活率明显低于野生型水稻,证明超表达OsGRP1基因增强了水稻对干旱胁迫和氧化胁迫的耐受性。[结论]OsGRP1参与ABA诱导的抗氧化防护途径并增强了水稻对干旱和氧化胁迫的耐性。
[期刊] 水产学报
[作者]
夏立群 陈锐敏 廖保山 苏泽杰 徐亮 童邦卓 黄嘉慧 鲁义善
鱼类诺卡氏菌病是一种慢性系统性肉芽肿疾病,鱼诺卡氏菌是其主要病原。鱼诺卡氏菌全基因组生物信息学分析,发现了一个可能靶向定位于宿主细胞线粒体的分泌蛋白——动力蛋白调节蛋白robl/LC7。为了对鱼诺卡氏菌robl/LC7的亚细胞定位和功能进行初步研究,实验对鱼诺卡氏菌robl/LC7进行了基因克隆、真核表达重组质粒构建、分泌蛋白鉴定、亚细胞定位、过表达和凋亡检测。结果显示,成功克隆了鱼诺卡氏菌robl/LC7基因并构建了其真核表达质粒p EGFP-robl/LC7和pc DNA-robl/LC7;
[期刊] 水产学报
[作者]
洪宇航 杨筱珍 成永旭 徐敏杰 黄根勇 杨志刚 黄毅
为了解中华绒螯蟹血细胞组成、分类及其在免疫应答过程中起到的重要作用,本研究通过细胞化学和细胞酶学分析,并结合细胞形态观察,对中华绒螯蟹血细胞的组成、分类进行了研究。同时,通过人工感染嗜水气单胞菌后血液的总血细胞数(THC)和不同类型血细胞数(DHC)的变化,研究不同类型血细胞在免疫应答过程中所发挥的作用。结果显示,依据本实验分类方法,中华绒螯蟹血细胞可以分为4类:大颗粒细胞(G)、中间型颗粒细胞(IG)、小颗粒细胞(SG)和透明细胞(H)。其中小颗粒细胞数量最多,约占33.54%±0.98%,中间型颗粒细
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
