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[期刊] 林业科学研究
[作者]
王伟伟 凌晓霏 陆沁 柳鹏飞 张金稳 陈航
[目的]引入细菌表达dsRNA干扰系统对中华紫胶虫FAD基因进行RNA干扰,通过检测干扰后FAD基因表达量与个体泌胶量动态变化,对FAD基因功能进行初步分析,为验证紫胶合成相关基因功能提供科学基础。[方法]中华紫胶虫FAD基因和L4440载体经双酶切之后,利用T4连接酶连接,构建FAD-L4440重组质粒,并转入HT115感受态细胞中,IPTG诱导表达dsRNA后,通过虫体涂抹法将dsRNA转染到紫胶虫体内。用RT-qPCR检测干扰后FAD基因的表达量并测定干扰后个体泌胶量的变化。[结果]RNA干扰后FAD基因表达量明显降低,其中,以低浓度菌液处理后12 h和中浓度菌液处理后24 h相对于对照组有显著差异,分别降低了90.90%和86.52%,中浓度在72 h时干扰效率高于其他两个组,个体泌胶量与对照组比较有显著下降。[结论]本研究构建了中华紫胶虫FAD基因的RNA干扰载体,在基因功能验证中引入了细菌表达dsRNA的RNAi系统,使用虫体涂抹法将其导入虫体内引起FAD基因表达量与紫胶虫个体泌胶量显著下降,为RNAi转染过程中不适用注射法、喂食等转染方法的昆虫提供技术参考,为后续解析紫胶合成的分子机理提供技术基础与科学依据。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
陈航 陈晓鸣 冯颖 杨子祥 石雷
运用核型近似系数聚类分析方法,分析了胶蚧属7种紫胶虫的亲缘关系与系统演化。结果显示:田紫胶虫与云南紫胶虫核型似近系数为0.968 8,核型同源性最大,亲缘关系最近;信德紫胶虫与紫胶蚧核型似近系数为0.953 3,亲缘关系较紧密,聚在一起形成姐妹群;尼泊尔紫胶虫与普萨紫胶虫的核型似近系数为0.944 1,也构成姐妹群;而中华紫胶虫的核型较为特殊,与其它6种差异较大,未能与其它种形成姐妹群关系。从核型进化上看,尼泊尔紫胶虫和普萨紫胶虫与其它5种紫胶虫的核型似近系数均小于0.762 6,因此与它们亲缘关系较远,从群体中分化出来较早,属最原始的种类;信德紫胶虫与紫胶蚧出现分化的时间也较早,也属较原始的...
关键词：
紫胶虫 染色体 核型近似系数 进化距离
[期刊] 林业科学研究
[作者]
陈航 陈晓鸣 冯颖 叶寿德
用RAPD技术研究了紫胶虫7种主要生产种12个群体之间的亲缘关系,研究中每个群体使用了24个标本,共有288个个体用于研究。在试用的45种随机引物中,筛选出9种引物用于随机引物扩增,共得到121个清晰稳定的位点,其中118个为多态性位点,多态百分率为97.52%,每条引物检测到的位点数为11~16个,长度为150~3000 bp。根据扩增结果,用UPGMA法对Ne i’s遗传距离进行聚类分析,构建分子系统树。7种紫胶虫聚类结果显示:紫胶虫各群体间的遗传距离为0.044 3~0.791 7,其中,种间的遗传平均距离为0.443 0,种内的遗传平均距离为0.170 7。根据聚类分析,讨论了紫胶虫主...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
陈航 陈晓鸣 冯颖 杨子祥
用支序分析方法讨论了7种紫胶虫之间的系统发育关系,选择肛突长度、膊背高度等22个形态性状,进行支序分析,得出7种紫胶虫系统发育关系图。结果显示:中华紫胶虫的形态较为特殊,与其它6种差异较大,最先从群体中分化出来,是最原始的种类;其它6种紫胶虫稳定地分化为两大支系:信德紫胶虫与紫胶蚧构成一个支系,二者在外部形态结构上有许多相似的地方,形成紧密的姐妹群关系,主要分布在印度次大陆热带地区,属于较原始的种类;在另一支系中,尼泊尔紫胶虫首先分化出来,也属于比较原始的种类;普萨紫胶虫紧随其后分化出来;田紫胶虫与云南紫胶虫最后分化出来,是最进化的物种,同时它们在形态结构上相似,形成姐妹群关系,这4种紫胶虫主...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
邱秀文 吴小芹 黄麟 叶建仁
［目的］为了构建松材线虫（Ｂｕｒｓａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓ ｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓ）果胶酶Ｂｘｐｅｌ２基因干扰载体。［方法］通过Ｔｒｉｚｏｌ法提取松材线虫总ｒｎａ，反转录合成ｃ Ｄｎａ，设计带Ｔ７启动子的果胶酶Ｂｘｐｅｌ２基因引物，以ｃ Ｄｎａ为模板扩增出果胶酶Ｂｘｐｅｌ２基因片段，连接到ｒｎａ干扰载体，再以干扰载体为模板，ｐｃｒ扩增出目的片段后进行测序鉴定，合成果胶酶Ｂｘｐｅｌ２基因双链ｒｎａ（Ｄｓｒｎａ），采用ｒＴ－ｐｃｒ检测松材线虫Ｂｘｐｅｌ２基因干扰后的表达情况。［结果］表明：１）提取的松材线虫总ｒｎａ完整性好，无降解；２）成功克隆出松材线虫果胶酶Ｂｘｐｅｌ２基因片段（７９０ Ｂｐ）并将其．．．
关键词：
松材线虫 Bxpel2基因 RNA干扰
[期刊] 林业科学研究
[作者]
杨星池 段学
1980年本所从孟加拉国引进信德紫胶虫种,探索在我国适宜气候条件下进行放养繁殖的可能性,继而进行推广、生产,与国产虫胶掺合加工,达到提高虫胶产品质量之目的。从引进到试放成功,历时3年零7个月,共计7个世代,累计繁殖种胶2000余kg,在我国有7个乡土树种适宜该虫寄生繁殖。
关键词：
信德紫胶虫 紫胶质量 引种试验
[期刊] 林业科学研究
[作者]
陈晓鸣 陈勇 王绍云 毛玉芬 冯颖 叶寿德
采用Ｃｏ６０对中华紫胶虫、紫胶蚧两种紫胶虫的不同虫态进行了辐射试验，结果表明，在中华紫胶虫卵胚发育２～３期以１０００ｒａｄ辐射可以产生子代，在紫胶蚧卵胚发育５～６期以１１０００ｒａｄ辐射，偶然得到子代。对辐射子代的怀卵量、性比、固虫密度、泌胶量等进行了观察。紫胶蚧子代的怀卵量、泌胶量与对照相似，有效生殖力和雌虫性比高于对照，固虫密度低于对照；中华紫胶虫子代固虫密度、雌虫性比高于对照，怀卵量、泌胶量正常。
关键词：
紫胶虫,辐射试验,子代,生物学特征
[期刊] 林业科学研究
[作者]
石秉聪 侯开卫 陈玉德 张诗财 阎克显 张福海
本文分析了我国紫胶主产区的气候条件以及新产区紫胶虫引种驯化的研究概况。通过20多年(1961～1990年)的研究与推广,使我国的紫胶产区,从25°N以南发展到28°N;从103°E扩大到118°E。突破了我国紫胶虫山地高原的自然分布区,在昆虫地理学上具有重要的学术意义。
关键词：
紫胶产区气候 紫胶虫 引种驯化
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
李蕾蕾 孙丰坤 李晓一 詹亚光 曾凡锁
糖基转移酶基因是生物分子糖基化中的关键基因,已有研究表明少数糖基转移酶14(Glycosyltransferase14,GT14)家族基因在植物细胞壁合成及对逆境的响应中发挥重要的生物学功能,然而GT14基因对逆境的响应机制目前仍不清楚。为了研究糖基转移酶基因的生物学功能,本实验室在克隆了白桦Bp GT14基因(JQ409354)编码区序列全长的基础上,利用Bam HⅠ单酶切的方法构建了白桦Bp GT14基因的p BI121植物表达载体,并利用一步PCR之后在同一体系中同时酶切-连接的方法,构建了Bp GT14基因RNA干扰载体,相比于传统的RNA干扰载体构建方法更为高效快捷。测序结果表明,植...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
呼丽君 柴友荣 张建奎 姚永宏
二氢黄酮醇-4-还原酶(dihydroflavonol-4-reductase,DFR)是类黄酮途径的一个关键酶,对种皮色泽和花色的形成具有重要作用。本研究从甘蓝型油菜克隆了600 bp(不计人工酶切位点)的芸薹属DFR基因家族的RNA干扰片段BDFRI,将其反义片段和正义片段分别插入到本课题组新近改造的植物RNAi平台载体pFGC5941M的启动子与间隔区之间、间隔区与终止子之间,构建了11 400 bp的RNAi干扰载体pFGC5941M-BDFRI,通过多重PCR鉴定证实载体构建成功,并转化到根癌农杆菌菌株LBA4404中形成了工程菌株。此载体的构建为进一步研究DFR基因参与决定芸薹属种...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
陈航 陈晓鸣 冯颖 叶寿德
本文研究比较了田紫胶虫红、黄两种色型雌虫的核型。两种色型的染色体数目恒定,均为2n=2x=18。染色体类型基本一致:1-4为中部着丝点染色体(m),5-9为端部着丝点染色体(T),其中,黄色型第1、2、4对染色体呈棒状,第3对染色体为肾形,第5-9对染色体为椭圆形或长圆形;红色型第1对的2条染色体长度差异较大,第 2、3、4对染色体呈棒状,第5-9对染色体为椭圆形或长圆形。红、黄两种色型在长臂、短臂、臂比等方面存在一定差异,经t-检验,结果表明:2种色型差异不显著。核型公式为:Ky(2n,(?))=18=8m+10T=4L+4M2+4M1 +6S。
关键词：
田紫胶虫 多色型 核型分析
[期刊] 华北农学报
[作者]
王双 杨瑞 白薇
为研究水稻WRKY蛋白在应对各种生物以及非生物胁迫中发挥的作用,探明OsWRKY76是否参与调控水稻系统获得抗性,明确OsWRKY在植物抗病及耐逆反应过程中的作用机理,对OsWRKY76进行了氨基酸序列分析,发现OsWRKY76具有典型的WRKY结构域,属于WRKY-GCM1锌指WRKY超家族。克隆了OsWRKY76中300 bp的cDNA片段OsWRKY76-300,并扩增GUS基因中500 bp的片段作为连接物,通过片段末端人为增加的酶切位点将上述片段与Gateway系统的入门载体pENTR L16连接,形成中间由GUS 500连接、两端是OsWRKY76-300反向重复的发夹结构的载体,利用LR反应将dsWRKY76 pENTR L16中发夹结构的插入片段分别重组到诱导型双元载体GVG-TA7002和组成型双元载体Ubi-C1300中,获得RNA干扰载体。利用农杆菌介导的转化方法将诱导型双元表达载体转化水稻,获得7个转化株系。利用实时定量RT-qPCR检测转化株系中OsWRKY76的表达量,获得了2个沉默株系。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
李金元 赵玉兰 李义龙 黄维垣
三种紫胶虫胶质比较研究李金元，赵玉兰，李义龙，黄维垣关键词紫胶虫，紫胶树脂，原胶质量我国生产上主要放养三个紫胶虫种［１］：紫胶虫〔Ｋｅｒｒｉａｌａｃｃａ（Ｋｅｒｒ）〕、信德紫胶虫〔ｋｅｒｒｉａｓｉｎｄｉｃａ（Ｍａｈｄ．）〕和中国紫胶虫〔Ｋｅｒｒｉａｃ...
关键词：
紫胶虫,紫胶树脂,原胶质量
[期刊] 林业科学研究
[作者]
杨星池
中国紫胶虫（Ｋｅｒｒｉａｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）与其它胶蚧一样，均隐匿在其胶被内生长发育，外观难以看到各虫龄期的体形特征。用图表形式把各虫龄期及其相关的泌胶形态和冬夏两代各自所需无数标出，即可清楚看出该虫生活史、生活周期及各发育阶段期间的变化和关系。同时，列出各虫龄期特征检索表，便于在科研与生产中应用。
关键词：
中国紫胶虫,生活史,胶表物候,检索表
[期刊] 林业科学研究
[作者]
陈晓鸣 冯颖
紫胶虫是一种重要的资源昆虫,其分泌物紫胶广泛地应用于多种行业。紫胶虫生物学和寄主植物等方面的研究国内外做得较多,但对紫胶虫种群密度、泌胶等方面研究甚少,石秉聪曾初步研究过紫胶虫群体密度变化,除此之外未见深入研究。本文研究了紫胶虫冬夏两世代的种群密度变化和泌胶,讨论了与其有关的其它生物学特征。
关键词：
紫胶虫 种群密度 泌胶
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