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[期刊] 华北农学报
[作者]
邱立友
以麸质饲料为培养基，培养黑曲霉Ｆ２７（ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒＦ２７）和绿色木霉Ｔ１（ＴｉｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｖｉｒｉｄｅＴ１）生产纤维素酶。两种真菌的ＣＭＣ酶活力均低于在稻草粉营养盐培养基中的酶活力，麸质饲料的还原糖含量明显下降。表明饲用纤维素酶以外加酶法为佳。在猪和家禽消化系统环境条件下，黑曲霉Ｆ２７的纤维素酶的作用适宜温度范围、热稳定性和对麸质饲料、肉鸡饲料及猪饲料的糖化率等方面，均优于绿色木霉Ｔ１。在作用适宜ｐＨ值范围和ｐＨ稳定性方面，此两种真菌的纤维素酶具有一定的互补性。
关键词：
黑曲霉,绿色木霉,纤维素酶,饲料
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
曾青兰 黄小罗 洪玉枝
通过CMC平板初筛、摇瓶发酵复筛,从土样中筛选到1株能够产中性纤维素酶的真菌,经18S rRNA基因序列分析初步确定该菌株为瓶霉菌(Phialophora sp.)。该菌株在适宜的条件下摇瓶培养72h,产生的内切葡聚糖酶活力可达到2.95IU/mL。酶学性质初步研究显示,菌株所产内切葡聚糖酶活力的粗酶液最适pH值为6.0～7.0,且在此pH范围内具较高的稳定性;粗酶液的反应温度以40℃左右为宜,且在50℃以下具有较高的温度稳定性;Mn2+、Fe3+对酶反应有促进作用,Hg2+、Pb2+对酶反应有抑制作用。
关键词：
中性纤维素酶 酶活力 真菌
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
陆晨 陈介南 王义强 詹鹏 张林
利用羧甲基纤维素钠培养法、刚果红染色法、滤纸崩解法和胞外纤维素酶活性测定法,从湖北神农架保护区不同区域采集的森林腐质土壤中分离筛选得到一株高产纤维素酶的真菌B-5。结合菌落形态观察、显微镜观察和ITS序列同源性分析,确定该菌株为镰刀菌属Fusarium,与木贼镰刀菌Fusarium equiseti相似度达99%。滤纸崩解实验显示该菌72 h对滤纸具有明显崩解能力,失重率达37.9%。以羧甲基纤维素钠为碳源,蛋白胨为氮源,28℃,180 r/min,培养5 d,初始酶活为FPA酶活(FPase)2.09 IU/mL,CMC酶活(CMCase)5.20 IU/mL。通过产酶条件优化,确定稻草为唯...
关键词：
纤维素酶 真菌 筛选鉴定 产酶条件优化
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
封晔 来航线 郑真
为了得到高产纤维素酶菌株和确定其最优生产发酵工艺,采用比色法对供试的Z1、Z2、Z3、W2、W5、FG10、FG209、H8和A8等9株真菌进行筛选,对筛选出的高产纤维素酶菌株进行初步鉴定,并对其最佳产酶条件进行了研究。结果表明,FG10和FG20为高产纤维素酶菌株;FG10的最适产酶条件为豆粕0.3 g/kg,pH 4.8,35℃培养48 h;FG20的最适产酶条件为油渣0.2 g/kg,pH 4.4,35℃培养48 h;2株菌均属曲霉属,其中菌株FG10为烟曲霉,菌株FG20为米曲霉。
关键词：
纤维素酶 菌株筛选 产酶条件 曲霉属
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
孙君社 李雪 董秀芹
利用产纤维素酶的微生物分解废弃物 (如农作物秸秆 )不仅可以减少污染 ,还可以节省能源 .该实验以康氏木霉TR为出发菌株 ,经过紫外线诱变 ,结合双层平板分离技术选育出 1株纤维素酶活力明显提高的菌株TR6 .并通过对康氏木霉固体发酵培养基、接种量、氮源、培养时间和培养温度等培养条件的研究 ,通过测定其所产纤维素酶的CMA和FPA酶活 ,找到了最佳的产酶条件 .即 :秸秆粉∶麸皮 =1∶1,固液比 =1∶3,添加硫酸铵为氮源 ,添加量为 2 % ,接种量5 % ,30℃培养 84h左右为宜 .CMC ,FPA酶活分别达到 4 6 8.2 7U g和 2 75 .31U g .
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张波 刘开辉 陈文强 杨方玉 丁小维 邓百万
【目的】对从陕北花马盐湖嗜盐真菌中筛选出的１株产纤维素酶菌株进行鉴定，研究该菌株的产酶条件，为嗜盐纤维素酶资源的利用提供理论依据。【方法】利用刚果红培养基从陕北花马盐湖嗜盐真菌中筛选产纤维素酶菌株，并对其进行形态学和ＩＴＳ序列鉴定，在单因素试验基础上，采用Ｌ９（３４）正交试验，优化该产酶菌株的最佳培养基配方和最佳发酵条件，并研究该产酶菌株的ＮａＣＬ耐受性。【结果】从陕北花马盐湖嗜盐真菌中筛选出１株高产纤维素酶菌株６Ｍａ１，根据形态学和ＩＴＳ序列系统发育分析，将该菌鉴定为黑曲霉（ａＳｐｅｒｇＩＬＬｕＳ ＮＩｇｅｒ）。菌株产纤维素酶的最佳培养基配方是，玉米芯粉２２．０ｇ／Ｌ，蛋白胨６．０ｇ／Ｌ，Ｎ．．．
[期刊] 林业科学
[作者]
高瑞霞 陈辉 唐明 徐辉 李守萍 陈桂梅
通过单因素和正交试验对秦岭细粘束孢分泌纤维素酶的组分、条件等进行研究。结果表明:秦岭细粘束孢可以分泌内切葡萄糖苷酶(CX)、外切葡萄糖苷酶(C1)和β-葡萄糖苷酶(BG),具有完整的纤维素酶系;其中CX是秦岭细粘束孢分泌的主要纤维素酶组分,优化后CX酶的最大酶活为35.215U,分别是C1和BG最大酶活的13.662倍和8.780倍。正交试验表明:秦岭细粘束孢分泌CX,C1和BG的最适条件各不相同,产CX的最佳条件为29℃、6天、起始pH4.0、摇床转速150r.min-1。温度、转速、起始pH和时间4个因素对秦岭细粘束孢产3种酶的影响各不相同,影响最大的是温度,其次是转速和时间,而起始pH对...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
沈赞明 韩正廉
在系列Ⅰ（青草、干草、稻草）和系列Ⅱ（稻草添加精料及非蛋白氮）日粮条件下．分别测定了３头装有永久性瘤胃瘘管的去势公水牛瘤胃真菌孢子数量，体外培养１２０ｈ的混合真菌胞外羧甲基纤维素酶（ＣＭＣａｓｅ）和滤纸酶（ＦＰａｓｅ）的活力变化。结果表明：青草期瘤胃真菌数量及ＣＭＣａｓｅ和ＦＰａｓｅ活力均显著高于稻草期（Ｐ＜０．０５）；干草期ＣＭＣＢｓｅ和ＦＰａｓｅ活力居中。稻草添加精料日粮时．稻草日粮（！期）添加混合精料（２ｋｇ／ｄ）（Ⅱ期），瘤胃真菌数量无明显变化，但ＦＰａｓｅ活力显著降低（Ｐ＜０．０５）；精料加羟甲基尿素（８０ｇ／ｄ）添加于稻草日粮（Ⅲ期）对瘤胃真菌数量基本无影响，ＣＭＣａｓｅ和ＦＰａｓ...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
毛文韬 吴雪莲 辜夕容 姚永红
在重庆市缙云山马尾松林地里按海拔及坡向设置了6个样地,检测分析了土壤中的纤维素分解菌数量和纤维素酶活性。结果表明:海拔高低显著影响马尾松林地的纤维素分解菌数量及纤维素酶活性。海拔越低纤维素分解菌数量越高,低海拔下的土壤纤维素分解菌数量是高、中两个海拔下的38和8.6倍,坡向对纤维素分解菌数量无显著影响;而Cx酶活性与滤纸酶活性则是在中海拔时最高,且3种海拔下都是阴坡高于阳坡;6个样地的滤纸酶活性均在6天时最高,但Cx酶活性最高的培养时间因海拔和坡向而异。
关键词：
纤维素酶 纤维素分解菌 马尾松 缙云山
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
陈路劼 刘斌 林白雪 何柳 张宁 吴祖建 谢联辉
从福州永泰温泉分离到1株降解纤维素嗜热菌,通过形态特征和16S rDNA序列鉴定,将其命名为地芽孢杆菌(Geobacillussp.)TC-S8.采用3,5-二硝基水杨酸显色法(DNS法)对菌株TC-S8产胞外纤维素酶的发酵条件及酶性质进行研究.在培养基的初始pH为6.5,温度为60℃,装液量20%,接种量2%,摇床转速为120 r.min-1的条件下培养36 h,菌株TC-S8产酶量达到最大(229 mU.mL-1).其分泌的纤维素酶最适作用温度为60-70℃,最适pH为7.0.纤维素酶降解产物主要为葡萄糖,并有少量纤维二糖.
关键词：
嗜热菌 降解纤维素 耐高温纤维素酶
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
任大明 赵钰 白炜琪 陈红漫 阚国仕 佡思涵 张聪
为探究产纤维素酶放线菌的生物学特征及其酶学性质，从土壤中筛选产纤维素酶放线菌，试验采用平板稀释法并结合刚果红染色法对土壤中的纤维素分解菌进行初筛，通过酶活测定复筛，筛得产纤维素酶能力较高的放线菌一株，对该菌株进行形态学、分子生物学及生理生化鉴定，并对酶学性质进行研究。结果表明：该菌在液体发酵中的内切酶、外切酶、β－葡萄糖苷酶及滤纸酶活分别为３０．０６，１０．４０，８．０５和１３．８８Ｕ·ｍ Ｌ～（－１）；通过对该菌株基因组中编码１６Ｓ ｒ ｒＮＡ的ＤＮＡ序列测序，得到一段１４０１ｂｐ的碱基序列，通过进化树分析可确认该菌为链霉菌属；在酶学性质研究中，该菌所产内切酶、外切酶、β－葡萄糖苷酶及滤纸酶．．．
关键词：
纤维素酶 放线菌 筛选鉴定 酶学性质
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
费岚 邵飞 贾睿 胡乐琴 何培民
从腐烂浒苔和浒苔暴发区域的海水中筛选出具有纤维素分解能力的菌株,采用刚果红染色法进行粗选,得到8株透明圈较大的菌株。将8株菌株分别接种到3种不同碳源的液体发酵培养基,发酵培养6 d后,分别测定滤纸(FPA)酶活力、羧甲基纤维素(CMC)酶活力与水解浒苔纤维素的效果。8株菌株中得到H3、H4、H6、Q1四种产酶较好的菌株并鉴定。3种液体发酵培养基中,以羧甲基纤维素钠为碳源的条件下,H3的CMC酶活力最高,为56.98 U/mL。H3与H4的浒苔水解效果较好,还原糖得率分别为10.4%和12.8%。
关键词：
浒苔 纤维素降解 菌株 酶活力
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
许明 沈进军 吕春娥 张顺萍 赵剑锋 薛勇 程祖锌
从本实验室保存的57株菌株中筛选出一株可高效降解纤维素的纤维素酶高产菌株哈茨木霉APS62,其滤纸酶活力(FPA)为4.981 IU.g-1,是对照里氏木霉模式菌株APS63的3.02倍.产酶条件优化研究的结果表明,以稻草粉为底物,APS62菌株产滤纸酶的最适条件为:培养温度28℃,培养时间3 d,稻草粉与麸皮比5∶0,接种量6%,氮源为NH4NO3(总氮量0.4%),培养基起始pH为5.0,吐温80含量0.1%.此条件下的FPA为6.125 IU.g-1,比优化前提高8.10%.
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘海艳 白龙 赵海波 杨明明 曹斌云
为寻找新纤维素酶和纤维素酶基因资源,以羧甲基纤维素钠(CMC)改良的BHM培养基筛选菌株,经初筛和复筛筛选出目的菌株后,采用革兰氏染色法和16SrDNA基因片段比对法对筛选出的菌株进行鉴定;设计引物对P扩增其纤维素酶基因,连于pET-28a(+)载体构建原核表达载体并转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,表达结果采用SDS-PAGE和测定表达产物活性的方法来检验。结果显示,本研究成功筛选出一株新的具有较高纤维素酶活的短小芽孢杆菌BY-1,该菌所产纤维素酶具有较好的热稳定性和酸碱稳定性,最适宜温度和pH分别为55℃和7.45,在此条件下最高酶活性为0.921 6μmol/(mL.min);此外...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李凌波 许欢欢 夏燕维 郭传旭 杨明珠 马磊 缪有志 刘东阳 张瑞福
[目的]本研究旨在筛选油菜秸秆高效降解菌株并对其降解特性进行分析，为油菜秸秆的资源化利用提供科学依据。[方法]采用稀释涂布平板法、刚果红透明圈试验以及纤维素酶活性测定对菌株进行分离筛选；根据菌株的形态特征和ITS序列分析对菌株进行鉴定；结合扫描电镜技术，分析在降解过程中降解菌对油菜秸秆物理、化学性质的影响；设置盆栽试验模拟秸秆还田以综合探究菌株对油菜秸秆的降解特性；通过纤维素酶酶谱分析及质谱检测技术获得纤维素酶基因(celI)的序列信息，克隆该基因，再利用pPICZαA质粒和毕赤酵母X33进行异源表达；经镍柱纯化后对CelI的酶学性质进行分析。[结果]从腐烂油菜秸秆田土样中共分离纯化出8株真菌，其中菌株A15的透明圈直径/菌落直径比值最大，为3.0,且滤纸酶活性和内切葡聚糖酶活性均显著高于其他菌株，分别为16.13和8.16 U·g~(-1),经鉴定其为绿色木霉(Trichoderma viride);接种菌株A15固体发酵28 d后，油菜秸秆失重率达29.17%,纤维素及半纤维素含量分别下降至29.41%和17.18%,经过30 d的模拟秸秆还田盆栽试验，油菜秸秆失重率达57.50%;成功表达并纯化了菌株A15来源的GH7家族纤维素酶CelI,该蛋白相对分子质量约为72×10~3,具有内、外切葡聚糖酶的双重活性，CelI的最适反应温度为50℃,且表现出良好的热稳定性，CelI的内切葡聚糖酶活性最适pH值为4,且Co~(2+)、Mn~(2+)、Ca~(2+)对其具有促进作用，而CelI的外切葡聚糖酶活性最适pH值为5,且Mn~(2+)对其具有显著激活作用，而Zn~(2+)、Fe~(3+)具有抑制作用。[结论]从腐烂油菜秸秆田土样中筛选到1株油菜秸秆降解真菌绿色木霉A15,其能高效产胞外纤维素酶，在油菜秸秆资源化利用方面具备良好的应用前景。
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