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[期刊] 水产学报  [作者] 刘青  魏华  
Semiquantitive PCR is a method to evaluate expression of target genes by analyzing RT-PCR products in comparison to standards.Two measures are involved;one is that primers for target gene and internal standard are put into the same tube to run PCR,and the other one is that primers for target gene an...
[期刊] 水产学报  [作者] 兰滔  卢迈新  杨丽萍  叶星  朱华平  高风英  黄樟翰  
采用RT-PCR和RACE技术,克隆了奥利亚罗非鱼β雌激素受体基因(estrogen receptorβ,ERβ)两种亚型的cDNA全序列(ERβ1和ERβ2)。荧光定量PCR分析雌雄奥利亚罗非鱼两种亚型的组织分布,并观察注射外源雌激素对雄性奥利亚罗非鱼下丘脑-垂体-性腺轴雌激素受体ERα和β(β1/β2)基因表达的影响。序列分析表明,ERβ1cDNA全长为4262bp,其中包含239bp5′非编码区,2349bp3′非编码区和1674bp的开放阅读框,共编码557个氨基酸。ERβ2 cDNA全长为2506bp,包含5′非编码区393bp,3′非编码区109bp,阅读框为2004bp,共编码6...
[期刊] 长江流域资源与环境  [作者] 赵建平  赵洋甬  胡建林  
以17β雌二醇为标准参考物质,对基于受体作用理论的环境激素分析方法实验条件进行了重构和优化,建立了环境类雌激素分析方法。结果表明:用营养缺陷型培养基30℃恒温振荡66h培养时间进行重组基因酵母的复苏与增殖,20℃~35℃水浴样品与酵母混合液培养3~6h暴露,优先选用机溶剂处理法释放β-半乳糖苷酶,35℃恒温水浴进行酶活测试反应,采用反应终止后2.5h420nm波长进行分析测试,同时实际样品的分析,加测不少于一个的稀释水样效应值,可使方法更加科学高效、准确度高,应用于各类实际样品分析。
[期刊] 水产学报  [作者] 宫向红  徐英江  任利华  张世娟  张秀珍  张利民  
研究了辛基酚对鲤的雌激素效应。经10、50、100、300和500μg/L辛基酚暴露32d后,鲤存活率和肥满度与对照组无差异;性腺指数变化明显,雌鱼性腺指数随暴露剂量的增大而增大,雄鱼性腺指数随暴露剂量的增大而减小;50μg/L及以上暴露组与对照组差异显著(P<0.01)。
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 李惠云  刘鹏威  魏华  
运用定量PCR技术和免疫荧光法研究了内分泌干扰物双酚A(BPA)对雌鲫的雌激素效应。以不同浓度的BPA[质量分数分别为1 mg/kg,50 mg/kg,100 mg/kg(注射剂量/鱼体重)]对雌鲫进行腹腔注射,然后分别于24 h和48 h检测肝脏中的α型雌激素受体(ERα)mRNA表达以及血清雌二醇(E2)水平。结果表明1 mg/kg和50 mg/kg BPA处理组ERαmRNA水平与对照组相比在48 h内均没有明显变化;100 mg/kg BPA处理组ERαmRNA水平在注射后24 h显著上调(P
[期刊] 中国水产科学  [作者] 张秀珍  徐英江  宫向红  邢红艳  张世娟  刘小静  
应用气相色谱-质谱建立了同时检测水产品中辛酚、壬酚、双酚A、己烯雌酚、雌酮、17β-雌二醇、17α-乙炔雌二醇和雌三醇8种雌激素的方法。样品经乙酸乙酯提取,HLB小柱净化,经七氟丁酸酐衍生后用电子轰击电离源在SIM模式下进行检测。结果表明,8种激素化合物在DB-1MS柱上能得到良好的分离,色谱峰出峰尖锐,没有杂峰干扰。本方法检出限为0.3—1.0μg/kg。在空白样品中添加水平为1.0—5.0μg/kg范围内,平均回收率为81%—108%,相对标准偏差(RSD)为6.7%—11.7%。
[期刊] 华北农学报  [作者] 苏岭  李绍戊  王荻  刘红柏  卢彤岩  尹家胜  
依据GenBank已公布的鲫鱼热激蛋白70(Heat shock protein70,HSP70)和beta-actin mRNA序列,分别设计两对引物,应用半定量RT-PCR方法检测应激处理后不同恢复时期鲫鱼(Carassius auratus)肝脏中HSP70 mRNA的表达情况。结果表明,诱导后肝脏组织中HSP70 mRNA的表达量呈现时间依赖性,存在先升高后回落的趋势。在诱导后1h即有所升高,在4h时达到最高值,之后逐渐降低,至48h,表达量降至最初值。研究结果为鲫鱼HSP70的研究提供了基础数据,也为将HSP70用作鱼类生理状态的诊断提供了理论依据。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 丁家桐  葛红山  姜勋平  刘桂琼  张军强  
用PCR RFLPs法检测了 90头姜曲海、梅山、二花脸母猪雌激素受体基因 (ESR)的多态性 ,分析了该基因与产仔数和乳头数的关系。结果表明 ,ESR基因型间总产仔数 (TNB)和产活仔数 (NBA)差异极显著 (P 0 0 5 )。
[期刊] 水产学报  [作者] 杨丽丽  张晶  方展强  
以唐鱼卵黄蛋白原(Vtg)为检测指标,利用Native-PAGE电泳、唐鱼Vtg特异性脂蛋白染色和间接酶联免疫吸附(ELISA)技术分别检测了17β-雌二醇(E2)、壬基酚(NP)、多氯联苯(PCBs)、Cd2+、Zn2+及其混合物对唐鱼的雌激素效应。Native-PAGE结果显示,10μg/L、50μg/L E2水体暴露7、14 d均诱导雄性唐鱼体内合成了Vtg,E2对唐鱼的雌激素效应具有时间累积效应,并随浓度升高而增强。而ELISA检测结果则显示0.1、0.5、1.0μg/L E2 7、14 d和200、300μg/L NP 14 d暴露使唐鱼合成了Vtg。结果表明,NP、Cd2+、Zn2...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张荣庆  韩正康  
每天给小鼠灌服异黄酮植物雌激素芒柄花素(For)或大豆黄酮(Da)20mg/kg,连续7d,明显提高正常小鼠胸腺重量和腹腔巨噬细胞吞噬功能,提高空斑形成细胞的溶血能力和外周血 T 淋巴细胞百分率;体外试验表明:50μg/ml 的 For 或 Da 明显促进植物血凝素(PHA)诱导的甲基-~3H 胸腺嘧啶核苷(methyl-~3H Tdg)参入的淋巴细胞转化。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 陈正礼  罗启慧  范光丽  阿依木古丽  方静  潘康成  袁朝富  
【目的】探讨雌激素对大鼠小脑内雌激素受体(ER)、神经生长因子(NGF)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)表达的影响。【方法】运用超敏感的免疫组织化学SP法,以老年SD大鼠小脑为研究对象,通过补充17β-雌二醇对ER、NGF和ChAT在小脑中的表达和分布变化进行研究。【结果】ER、NGF和ChAT免疫阳性反应物分布于小脑的蒲肯野氏细胞层、小脑齿状核、小脑间位核和小脑室顶核,ER阳性产物主要定位于细胞胞浆和突起中,也存在于胞膜和胞核中。老年大鼠小脑皮质及小脑核中ER、NGF和ChAT的表达强度及阳性细胞数量总趋势是显著降低,而补充17β-雌二醇后三种阳性产物的强度和阳性细胞数目显著回升,蒲肯野氏细胞的...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 赵晓民  徐小明  
 目前对雌激素受体结构和功能的研究比较深入,雌激素受体与肿瘤发生机制、雌激素受体在体内的表达调控及其分子作用机理已引起人们的广泛关注。针对这一现状,对雌激素受体的结构和功能,雌激素受体在体内的分布及其作用机制、应用前景等方面的研究进展进行了综述。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王志豪  李强  徐永平  金秀芳  董伟  范洁  贾俊阳  
【目的】研究雌性山羊星状神经节中雌激素受体(Estrogen receptor,ER)的分布特点,探讨雌性山羊星状神经节神经元对雌激素是否具有反应性。【方法】取雌性山羊星状神经节,制作石蜡切片,经免疫组化SP法染色后,在数码显微镜下拍照,用高清晰图像分析系统对ER的分布特点进行分析,并计算相对表达量。【结果】在星状神经节的神经元胞体、卫星细胞和过路纤维中均有ERα、ERβ免疫阳性产物分布,但主要分布于神经元胞体。在神经元胞体中,细胞膜和细胞质为强阳性染色,而细胞核为弱阳性染色。ERα在神经元胞体中的相对表达量显著高于非神经细胞结构(P<0.05),ERβ在神经元胞体中的相对表达量极显著高于非神...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王月影  范光丽  杨国宇  王艳玲  张永德  
为了探讨不同发育时期大鼠乳腺中雌激素受体α(Estrogen receptor,ERα)的表达情况,采用RT-PCR方法对不同发育时期大鼠乳腺组织中的ERα进行了半定量研究。结果表明,妊娠和泌乳期大鼠乳腺组织中的ERα表达水平均低于处女期,且差异显著(P0.05)。表明ERα可能参与了乳腺细胞的发育和凋亡。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 陆洋  吴旭干  潘桂平  王伟  候文杰  成永旭  
雌激素相关受体(ERR)在甲壳动物蜕皮过程中可能起着重要的调节作用,但是尚不清楚该基因在三疣梭子蟹不同组织和不同蜕皮阶段的表达模式。本文采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术研究了三疣梭子蟹雌激素相关受体(PT ERR)基因在不同组织和不同蜕皮阶段的表达情况。结果表明,PT ERR-mRNA在C期三疣梭子蟹的Y器官和鳃中表达水平最高,其次眼柄和胃中表达水平也相对较高,在3种肌肉组织和三角膜中表达水平较低。在不同蜕皮阶段,13种组织中的PT ERR-mRNA表达水平均差异显著。Y器官中PT ERR-mRNA从AB期到E期呈显著上升趋势;胸神经节和眼柄中的PT ERR-mRNA变化模式均为先上升...
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