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[期刊] 华北农学报
[作者]
初立良 郑桂玲 周洪旭 李长友 李国勋
发掘对鞘翅目害虫具有活性的苏云金芽孢杆菌(Bt)菌株和杀虫蛋白基因在生物防治中日益受到人们的重视。利用杀鞘翅目Bt基因通用引物进行PCR检测与生物测定相结合的方法,从山东省各地土壤中分离的66株Bt中筛选获得了两株对鞘翅目昆虫具有杀虫活性的菌株B-DLL和B-JJX,并采用SDS-PAGE和PCR-RFLP方法对其杀虫晶体蛋白和杀虫基因类型进行了鉴定。结果表明,菌株B-DLL和B-JJX对华北大黑鳃金龟1龄幼虫14 d的校正死亡率分别为86.7%和60.0%,对暗黑鳃金龟1龄幼虫14 d的校正死亡率分别为83.3%和76.7%,对柳蓝叶甲3龄幼虫5 d的校正死亡率分别为33.3%和46.7%。...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
高瑞桐 冯秀丽 沈波 胡殿芹 李永志 刘全会 李国宏
Anoplophora glabripennis, Xylotrechus rusticus,Potosia (Liocola) brivitarsis and Ambrostoma quadriimpressum adults were controlled by injecting 0.8 mL imidacloprid per centimeter DBH on willow, poplar and elm trees in the field.Result showed that 285 adults of A.glabripennis were killed on 15 willow...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
张冰玉 苏晓华 李义良 张永安 曲良建 王玉珠 田颖川
培育抗鞘翅目害虫的杨树新品种是防治光肩星天牛等高危害蛀干害虫的有效方法之一.该研究通过根癌农杆菌介导法将抗鞘翅目害虫基因(Cry3A)导入银腺杨基因组中,获得了再生植株.PCR及Southern点杂交的分析结果表明,外源基因已整合到杨树基因组中.室内抗虫生物学鉴定表明,与对照相比,转基因株系BGA--5对光肩星天牛具有一定的毒杀和显著的生长抑制作用,其杀虫率达30%,对幼虫的生长抑制率达78.46%;其他转基因株系对光肩星天牛幼虫无明显的毒杀和生长抑制作用.
[期刊] 华北农学报
[作者]
李帅 李淑文 李长友 周洪旭 李国勋
应用光学显微镜和生化技术,研究了华北大黑鳃金龟(Holotrichia oblita)围食膜的基本结构和表面形态,初步分析了围食膜蛋白质的种类,蛋白质和糖的含量,测定了棉铃虫颗粒体病毒增效蛋白对围食膜结构的影响。结果表明,华北大黑鳃金龟围食膜表面平滑致密,富有弹性,但与多数昆虫围食膜相比韧性较差,主要由蛋白质、糖和几丁质组成,其中蛋白质的含量约为36.25%,糖的含量约为8.91%,其他为几丁质等;经SDS-PAGE测定,围食膜的蛋白质种类较多,有28条多肽比较清晰,分子量多在17.6~320.3 kDa。棉铃虫颗粒体病毒增效蛋白不能降解华北大黑鳃金龟围食膜中的蛋白质。
关键词：
华北大黑鳃金龟 围食膜 结构 增效蛋白
[期刊] 华北农学报
[作者]
杜立新 董明 王容燕 马铭泽 王金耀 曹伟平 宋健 冯书亮
苏云金芽孢杆菌SHJ-5菌株是从黑龙江采集的土样中分离获得的新菌株,对其伴孢晶体形状、基因型、蛋白表达以及杀虫活性进行了系统研究。菌株SHJ-5产生的伴孢晶体形状为钝菱形;利用PCR-RFLP技术对该菌株的基因型进行鉴定,结果表明,该菌株含有cry1Aa、cry1Ea、cry1Be、cry1Ah、cry1Ai、cry2Ab、cry1i和vip3A基因;SDS-PAGE晶体蛋白检测结果显示,该菌株表达130～150 kDa和60 kDa大小蛋白;生物活性测定表明,菌株SHJ-5对棉铃虫和小菜蛾有较高杀虫活性,校正死亡率分别为100%和96.7%。
[期刊] 林业科学
[作者]
虞国跃 姚德富 刘后平
记述了采自云南、四川铁杉上的瓢虫科昆虫，共８种，其中５种是新种：蛇形小毛瓢虫Ｓｃｙｍｎｕｓ（Ｓｃｙｍｎｕｓ）ｎａｊａｆｏｒｍｉｓＹｕ，云杉坪小瓢虫Ｓ．（Ｐｕｌｌｕｓ）ｙｕｎｓｈａｎｐｉｎｇｅｎｓｉｓＹｕ，波结毛瓢虫Ｓ．（Ｎｅｏｐｕｌｌｕｓ）ｓｉｎｕａｎｏｄｕｌｕｓＹｕｅｔＹａｏ，弧结毛瓢虫Ｓ．（Ｎ．）ｃａｍｐｔｏｄｒｏｍｕｓＹｕｅｔｌｉｕ，截端方瓢虫ＰｓｅｕｄｏｓｃｙｍｎｕｓｔｒｕｎｃａｔｕｌｕｓＹｕ，２种由于单一雌性仅鉴定到属。经实验室饲养，发现波结毛瓢虫和弧结毛瓢虫捕食铁杉球蚜。
关键词：
瓢虫科,新种,铁杉球蚜,捕食
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陆慧慧 林志强 谭万忠 罗华东 鲜菲 毕朝位 余洋 杨宇衡
【目的】分析并鉴定对马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)具强致病性的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CPB012菌株的杀虫基因型,为充分而有效地利用此生防菌奠定基础。【方法】CPB012菌株在LB培养基上30℃培养2—3 d,用苯酚品红进行晶体染色,观察伴孢晶体形态。cry1—cry10杀虫基因的检测选用技术成熟的PCR-RFLP(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)法,即对某一类基因(如cry1、cry2…)保守区序列设计通用引物,并引入...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈晓琴 江世宏 李广京
随着生物技术的迅猛发展,分子生物学技术已越来越多地被应用在昆虫的分类学研究中。笔者概述了核酸序列分析、RFLP技术、RAPD技术、分子杂交技术、同工酶电泳技术、SSCP以及DSCP技术在鞘翅目昆虫分类研究中的应用情况,并展望了分子生物学技术在鞘翅目昆虫研究中的广阔前景。
关键词：
鞘翅目 分子生物学技术 昆虫分类学
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
周威君 张孝羲 习宜元
长足象（Ｍｅｃｙｓｏｌｏｂｕｓｅｒｏ）对大叶醉鱼草（ＢｕｄｄｌｅｊａｄａｖｉｄｉＦｒ．）的生长有一定的抑制作用，是一种很有潜力的天敌。研究结果表明：长足象在南京地区一年发生２～３代，以成虫在植株下部枯枝落叶或表土中越冬，越冬代危害期在５月上中旬～７月上中旬；第一代危害期在７月中上旬～８月上旬；第二代危害期在９月上中旬～１０上中旬。盛夏高温，日平均气温２９℃以上，可引起该虫的生殖滞育。
关键词：
大叶醉鱼草 长足象 生物学特性 生殖滞育
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨保军 杨怀文 杨秀芬 刘峥 邱德文 袁京京
【目的】分离和纯化嗜线虫致病杆菌北京变种(Xenorhabdus nematophila var.pekingensis)CB6菌株胞内和胞外杀虫蛋白,鉴定其蛋白种类。为进一步利用此类杀虫蛋白奠定基础。【方法】采用硫酸铵沉淀、DEAESepharoseFF离子交换柱层析、Butyl SepharoseFF疏水柱层析和SephacrylS-200HR凝胶过滤对该类蛋白进行分离和纯化,采用Native-PAGE和SDS-PAGE技术对所纯化蛋白进行组分分析。【结果】获得达电泳纯的胞内杀虫蛋白E1和胞外杀虫蛋白E2。以2.58μg·ml-1含量E1、以4.21μg·ml-1含量E2喂饲棉铃虫初孵幼虫...
[期刊] 华北农学报
[作者]
臧大康 郑桂玲 周洪旭 张媛 李国勋 李长友
以本实验室分离的Bt菌株B-DLL质粒DNA为模板,利用cry8类基因特异性引物JJX5和JJX3扩增出3.5kb的片段,将该片段插入克隆载体pMD 18-T中,筛选获得一个含新基因的克隆pMD-cry8new。序列测定表明,该基因编码区为3 525 bp,编码的蛋白质由1 174个氨基酸残基组成,理论分子量为133.05 kDa,等电点为pH4.69,为弱酸性蛋白。该基因核苷酸序列已在GenBank登录(Accession number:HQ174208),编码的氨基酸序列与Cry8Fa1的同源性最高达99.8%,被国际Btδ-内毒素命名委员会正式命名为Cry8Fa2。将cry8Fa2基因插...
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
虞国跃
本文记述了最近记录于我国的5种小毛瓢虫,即采于广东和云南的内卷小毛瓢虫[Scymnus(Scymnus)kabakovi Hoang],采于福建的细小瓢虫[S.(Pullus)syoitti Sasaji],采于浙江和福建的真实小瓢虫[S.(P.)kaguyahimeKamiya],采于甘肃的蒙古小瓢虫[S.(P.)mongolicus Weise]以及采于福建、湖南和贵州的端手小瓢虫[S.(P.)takabayashii(Ohta)]。
关键词：
鞘翅目 瓢虫科 小毛瓢虫属
[期刊] 林业科学
[作者]
曹丹丹 魏建荣 王伟超 王丽平 赵正萍 刘曙雯 嵇保中
【目的】南京隐翅虫是在受松材线虫病危害的病死木皮下发现的隐翅虫新种,与小蠹、天牛等多种次期性害虫的时间和空间生态位跟随关系密切,具有作为媒介昆虫防治蛀干害虫的潜力。研究南京隐翅虫不同发育阶段个体的形态特征、成虫的食性及昼夜活动节律,能够为进一步的研究和应用提供参考。【方法】室内观察南京隐翅虫不同发育阶段个体的形态特征,通过人工饲养并结合口器解剖研究南京隐翅虫成虫的食性;应用"陷阱法"观察试虫的昼夜活动节律。【结果】南京隐翅虫幼虫为寡足型,口器咀嚼式,胸足发达,蛹为裸蛹,成虫体长1.5～2.0 mm,身体狭长平行,头、中后胸、腹部6～8节颜色较深,身体其他部分浅黄色。成虫喜食人为杀死的跳虫成虫、蝇科幼龄幼虫及天牛幼虫,对于小蠹科、象甲科、叩甲科、蚁科、蠼螋科的幼虫尸体表现出取食行为,试验过程中并未观察到捕食其他生物活体。室内南京隐翅虫成虫昼夜活动节律高峰期分别是8:00—11:00以及20:00—22:00。【结论】南京隐翅虫成虫为尸食性,其昼夜活动节律受温度影响较大。
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘兴龙 程林友 李天龙 李长友 李国勋
根据已知Btcry8类基因的全长序列设计一对特异性引物JJX5和JJX3,以Bt菌株B-DLL的质粒DNA为模板扩增出3.5 kb大小的片段;将该片段插入大肠杆菌表达载体pET-21b中,并完成了该片段的全序列测定。该基因编码区为3 495 bp,编码的蛋白质由1 164个氨基酸残基组成,相对分子质量为131.8 kDa,等电点为pH 4.71,为弱酸性蛋白。该基因(GenBank:EU047597)编码的氨基酸序列与Cry8Ea1的氨基酸序列同源性高达99.31%,被国际Bt基因命名委员会正式命名为cry8Ea2。经IPTG诱导后该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中能够正常表达130 kDa...
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