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[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
李真 刘明英 韩小娇 乔桂荣 蒋晶 邢世岩 卓仁英
LHCB基因对植物适应各种环境胁迫的过程中起着重要作用。序列分析显示:东南景天Sedum alfredii的Sa Lhcb2基因全长929 bp,其中开放阅读框(ORF)为798 bp,含有1个74 bp的内含子。通过蛋白序列比对,Sa Lhcb2基因编码的蛋白与多种植物的蛋白序列同源性都很高(92%以上)。分析400μmol·L-1镉离子(Cd2+),铜离子(Cu2+)和铅离子(Pb2+)胁迫处理后的东南景天,结果显示:镉处理后Sa Lhcb2基因在茎、叶中表达量快速上升(12.0h内),根中表达量到48.0 h后才上调。铜处理后0.5 h根中表达显著上调,胁迫6.0 h后茎中表达量显著上调...
[期刊] 林业科学
[作者]
高志民 刘成 刘颖丽 彭镇华
The light harvesting chlorophyll a/b-binding protein is one of key proteins in the transformation from light energy to chemical energy. An open reading frame coding precursor protein of cab gene was cloned from the first strand of bamboo cDNA through RT-PCR methods,and named as cab-PhE1 (cab gene 1 ...
[期刊] 林业科学
[作者]
高志民 李雪平 彭镇华 岳永德
采用RT-PCR技术与RACE技术,从绿竹中克隆到捕光叶绿素a/b结合蛋白基因全长cDNA,命名为cab-BO1(GenBank登记号EF061137)。该基因长1102bp,从第64~861bp含有1个开放阅读框,编码265个氨基酸。cab-BO1编码的氨基酸中第64~232位包括典型的捕光叶绿素a/b结合蛋白功能域,第9~11位为蛋白激酶C的磷酸化位点,第27~52位为泛素结构功能域信号,第55~58位为酪氨酸激酶(CK2)磷酸化位点。序列相似性分析结果表明cab-BO1DNA序列和编码的氨基酸序列与玉米、小果野蕉、小麦、水稻等的cab基因及其氨基酸序列的相似性分别在85%和89%以上,显...
[期刊] 林业科学
[作者]
王猛 曹福祥 龙绛雪
光合作用是光合生物将光能转化为化学能,并同时将无机物转化成有机物贮存在生物体的过程。现已证明光合生物对光能的吸收、传递和转化都是在光合膜上具有一定的分子排列和空间构象的色素蛋白复合体上进行的(郁飞等,2001)。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘建汀 谢贵水 莫业勇 杨礼富 邹智
采用RT-PCR技术从橡胶树的叶片中分离到一条852 bp的c DNA,该序列包含一个798 bp的开放读码框(ORF),21 bp的5’UTR和33 bp的3’UTR;ORF预测编码265个氨基酸,理论分子量为28.64 k Da,等电点为5.55,属于叶绿体定位的类囊体膜蛋白;蛋白含有1个保守的叶绿素结合结构域,3个跨膜螺旋和2个C端螺旋,1个三聚化基序,以及多个叶绿素和类胡萝卜素结合位点,隶属于LHCB1亚家族;蛋白与蓖麻(Ricinus communis)、葡萄(Vitis vinifera)和棉花(Gossypium hirsutum)中同源蛋白的相似性都在95%以上,显示出高度的保...
关键词：
橡胶树 叶绿素结合蛋白 Lhcb2亚家族
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
王欢利 刘新亮 郁万文 李广平 曹福亮
摘 要：为了探究银杏中叶绿素 a/b 结合蛋白基因（GbLhcb4）的结构及其相关的转录调控元件，基于 Roche454 高通量测序获得的 GbLhcb4 基因片段，采用 RACE 技术分离得到该基因的 cDNA 序列，并通过染色体步移技术获得该基因启动子序列，结合生物信息学技术分析基因序列的特征、系统进化地位及启动子区域的转录调控元件。序列分析表明，GbLhcb4 基因全长 1 200 bp，含有一个 834 bp 开放阅读框，编码 277 个氨基酸，相对分子量为 30.65 kD，等电点为 5.17。同源分析表明，该基因编码蛋白与北美云杉 PsLhcb4 蛋白（GenBank 登录号：AB...
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
王欢利 刘新亮 郁万文 李广平 曹福亮
为了探究银杏中叶绿素a/b结合蛋白基因(Gb Lhcb4)的结构及其相关的转录调控元件,基于Roche454高通量测序获得的Gb Lhcb4基因片段,采用RACE技术分离得到该基因的c DNA序列,并通过染色体步移技术获得该基因启动子序列,结合生物信息学技术分析基因序列的特征、系统进化地位及启动子区域的转录调控元件。序列分析表明,Gb Lhcb4基因全长1 200 bp,含有一个834 bp开放阅读框,编码277个氨基酸,相对分子量为30.65 k D,等电点为5.17。同源分析表明,该基因编码蛋白与北美云杉Ps Lhcb4蛋白(Gen Bank登录号:ABK21281.1)相似性最高,为74...
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
毕燕会 周志刚
褐藻素-叶绿素a/c结合蛋白(FCP)由核基因家族编码,镶嵌在杂色藻类的类囊体膜中,结合褐藻素、叶绿素a和叶绿素c,起着捕获并向两个光反应中心平均分配和传递光能的作用。前体N-末端存在一个信号肽和一个转运肽,成熟FCP具3个α-螺旋跨膜区,分子量在17-22 kDa之间,结合叶绿素a的氨基酸高度保守,但结合褐藻素和叶绿素c的不太保守。fcp基因一般存在一个内含子,其蛋白编码区同源性达80%以上,而5’和3’非翻译区保守性相对较低。fcp基因表达量在红光及相对强光强下一般较高,且可能还存在日周变化。具4个α-螺旋的叶绿素a/b结合蛋白的第4个α-螺旋区缺失可能导致了具3个α-螺旋的FCP的产生。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
豆芳芳 龚小庆 邹养军
【目的】研究苹果类泛素蛋白RAD23基因(MdRAD23C2)的功能,为抗旱苹果新品种的培育奠定基础。【方法】以秦冠苹果(Malus domestica cv.‘Qinguan’)为材料,克隆MdRAD23C2基因,对其进行生物信息学和定位分析,通过实时定量PCR分析其在不同逆境胁迫下(干旱、盐、碱和ABA)的表达模式。构建过表达载体转化农杆菌,采用叶盘法转化烟草,选取相应的转基因烟草株系,分析干旱胁迫下转基因烟草的相对电导率和丙二醛、叶绿素、过氧化氢(H_2O_2)、超氧阴离子■含量以及二氨基联苯胺(DAB)、氮蓝四唑(NBT)染色情况,探讨MdRAD23C2过表达对转基因烟草抗旱能力的影响。【结果】苹果MdRAD23C2基因编码序列长1 146 bp,编码381个氨基酸,其定位于细胞核和细胞膜中,可响应干旱、盐和碱等逆境胁迫。干旱处理2周,野生型烟草株系萎蔫程度明显,且DAB和NBT染色加深,相对电导率、丙二醛、H_2O_2和■含量均极显著高于转基因型烟草,而叶绿素含量极显著低于转基因型烟草,说明过量表达MdRAD23C2的烟草株系对干旱胁迫的耐受性明显增强。【结论】分离克隆了苹果MdRAD23C2基因,该基因可提高转基因植物对干旱胁迫的耐受性。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
伍素辉 李合生
在光敏核不育水稻（ＰＧＭＲ）农垦５８ｓ光敏感期内进行暗期光间断（Ｒ、Ｒ＋ＦＲ、Ｒ＋ＦＲ＋Ｒ）以及暗期无间断（ＳＤ）处理后，采用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，从５８ｓ的叶绿体内分离出６条色素带。依其迁移率分别命名为ＣＰＩ、ＬＨＣｐ￣１、ＣＰａ、ＬＨＣｐ￣２、ＣＰａ’、ＦＣ。经Ｒ和Ｒ＋ＦＲ＋Ｒ间断暗期后，ＣＰａ’的吸收峰只有痕迹，而Ｒ＋ＦＲ和ＳＤ处理，ＣＰａ’的吸收峰很明显。在同样条件下，农垦５８无论用何种光质间断暗期都没有出现ＣＰａ’。因此，认为ＣＰａ’是与育性表达有关并受光敏色素调节的叶绿素蛋白复合体。Ｒ间断暗期后，ＣＰａ的吸收峰明显偏向短波光。ＬＨＣＰ￣１、ＬＨＣＰ￣２的吸收光谱在红区和蓝...
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
赵婷 韩小娇 刘明英 乔桂荣 蒋晶 姜彦成 卓仁英
铁蛋白(ferritin)是一种专门存储铁的重要胁迫相关蛋白,参与镉离子吸收的调控。从构建的东南景天Sedum alfredii c DNA文库中筛选出东南景天Ferritin基因c DNA全长,命名为Sa Fer,编码序列为1 117 bp,开放阅读框为759 bp,编码252个氨基酸。以东南景天基因组DNA为模板分离到Sa Fer基因组序列,长度为1 702 bp,含有7个内含子。氨基酸序列同源性分析表明:Sa Fer与苹果Malus domestica Ferritin亲缘关系最近,同源性高达76%。实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)分析发现:根系中Sa Fer基因在镉胁迫1...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘建新 丁华侨 田丹青 王炜勇 刘慧春
【目的】擎天凤梨是一种新潮花卉，其苞片在成花变色过程中常常伴随着绿色的逐渐消退。分离叶绿素生物合成与降解途径的关键基因，探索在苞片变色过程中叶绿素代谢的分子基础和机理，有助于解析呈色苞片中绿色退化的原因。【方法】通过ｃ ＤＮＡ文库构建及ＥＳＴ批量测序获得叶绿素合成关键酶：谷氨酰Ｔ ＲＮＡ合成酶基因（ｇｌｕＴＡｍｙｌ－Ｔ ＲＮＡ ＳｙＮＴｈＥＴＡＳＥ，ｇＴＳ）和尿卟啉原－Ⅲ合酶基因（ｕＲｏｐｏＲｐｈｙＲｉＮｏｇＥＮ－ⅢＳｙＮＴｈＡＳＥ，ｕＲｏＳ）；通过同源克隆技术获得叶绿素降解关键酶：脱镁叶绿素酶（ｐｈＥｏｐｈｙＴｉＮ ｐｈＥｏｐｈｏＲｂｉＤＥ ｈｙＤＲｏｌＡＳＥ／ｐｈＥｏｐｈｙＴｉＮＡＳＥ，ｐ．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
冯一璐 傅晓斌 吴帆 崔宏春 李红亮
【目的】茶尺蠖(Ectropis obliqua)是中国茶区主要的鳞翅目害虫,其幼虫暴食性常给茶园带来巨大损失。鳞翅目昆虫雌雄个体间普遍存在着性信息素通讯环节,而茶尺蠖性信息素识别途径一直鲜有报道。论文旨在通过对茶尺蠖性信息素识别过程中的结合蛋白基因进行鉴定和功能研究,为茶尺蠖性信息素化学通讯和嗅觉信息识别传递机制提供理论依据。【方法】利用RT-PCR技术对从雄虫触角转录组数据中首次鉴定和发现的一个茶尺蠖信息素结合蛋白基因(pheromone-binding protein,PBP)2(EoblPBP2)
[期刊] 中国农业科学
[作者]
徐培洲 李云 袁澍 张红宇 彭海 林宏辉 汪旭东 吴先军
【目的】以叶绿素缺乏突变体水稻为材料,研究其光系统蛋白和叶绿素的合成特性,以揭示叶绿素的生物合成及其调控的机理。【方法】通过蛋白质电泳、Western杂交、Northern杂交以及叶绿素前体物质的测定等来鉴定叶绿素缺乏突变体W1的黄化原因。【结果】与野生型相比,叶绿素缺乏突变体W1的叶绿素含量明显减少,与之对应的是其类囊体膜蛋白的减少,特别是光系统II捕光色素蛋白(LHCII)三聚体含量的急剧减少。Western杂交进一步表明,W1的LHCII含量仅为野生型的1/3。编码LHCII脱辅基蛋白的cab基因在突变体W1和野生型中转录水平相仿。突变体W1叶绿素合成的前体物质从合成的起始δ-氨基乙酰丙...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
贾亚军 王晓婷 许娜 郭娜 邢邯
【目的】对大豆(Glycine max)水杨酸结合蛋白基因Gm SABP2进行克隆与表达分析,并转化拟南芥进行耐盐、耐干旱分析,进一步了解该基因耐盐、耐干旱的分子机制。【方法】以拟南芥SABP2为探针,搜索大豆基因组数据库,从中挑选出同源性最高的序列,将其命名为Gm SABP2。利用电子克隆技术,从大豆叶子中克隆得到大豆水杨酸结合蛋白基因Gm SABP2。通过DNAMAN程序进行氨基酸的多序列比对,利用NCBI的CD-search进行氨基酸的保守结构域分析,应用MEGA程序进行系统进化树分析。对大豆幼苗进行盐和干旱胁迫处理来分析其在胁迫下的表型变化。通过Real time-PCR分析大豆幼苗在...
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