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[期刊] 水产学报
[作者]
周泽斌 丁少青 程沛茹 任建峰 李伟明 张庆华
核转录因子NF-κB (nuclear factor kappa B)对机体的免疫反应、炎症反应等起重要的调控作用。为了获得NF-κB基因启动子的活性报告基因，进一步研究原始脊椎动物免疫应答的机制，我们根据此前克隆得到的东北七鳃鳗NF-κB基因的编码序列 (coding sequence，CDS），以与东北七鳃鳗高度同源的日本七鳃鳗同源基因 5’上游启动子特征序列为模板设计引物，克隆获得了东北七鳃鳗NF-κB启动子序列，该序列全长3 169 bp，提交至NCBI 数据库Genbank获得登录号MN368861。经AliBaba2.1软件预测该序列包含CREB (cgtgacttca)、Oct-1 (aatatgaatt)、GATA-1 (gaacctatct)、AP-1 (ggttgagtca)、NF-kappa B (ctttcctgtt)、IRF-1 (tttcctgttc)、Sp-1 (tgtgaggggt)、c-Jun (acgtgacttc)和c-Fos (ggttgagtca) 等多个转录因子结合位点，并包含TATA box转录核心元件。通过MethPrimer软件预测在序列1 207-1 402 bp处存在CG含量大于50%，长196 bp的CpG岛。利用双酶切技术构建了pGL3-NF-κB-pro重组质粒，并将其转染至人胚肾细胞（human embryonal kidney, HEK293T）和鲤上皮瘤细胞（Epithelioma papulosum cyprinid, EPC）中。双荧光素酶报告基因系统检测结果显示该片段序列在哺乳动物细胞系和鱼类细胞系中均具有启动子活性，同时在HEK293T中经过Toll样受体（Toll-like receptors，TLR）的配体LPS刺激后启动子活性显著上升。本研究成功构建了东北七鳃鳗NF-κB启动子报告基因，并在不同细胞系中证实了其活性。LPS刺激后的检测结果揭示东北七鳃鳗NF-κB参与了TLR信号通路的免疫应答。东北七鳃鳗NF-κB报告基因的构建为探究原始脊椎动物免疫系统信号传导机制奠定了基础。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
朱欣云 丁少青 张哲 任建峰 濮家飞 贾亮 李伟明 张庆华
海七鳃鳗(Petromyzon marinus)是现存最古老的无颌类脊椎动物之一,对其重要免疫分子的研究在免疫系统的进化理论上有重要意义。细胞趋化因子CXCL8(又称白细胞介素-8,Interleukin 8)是最重要的趋化因子之一。为了研究海七鳃鳗CXCL8基因在天然免疫中的作用,以海七鳃鳗肝脏c DNA为模板,通过比对海七鳃鳗基因组信息设计引物,使用RT-PCR方法扩增得到PmCXCL8基因。随后构建原核表达载体pColdI-CXCL8,将载体转化至E.coli BL21和Rosetta(DE3)中进
[期刊] 淡水渔业
[作者]
刘鹏 陈辉 赵文阁
采用SPSS13.0软件的t检验、回归检验和因子分析等方法,对2006年12月于黑龙江中下游萝北江段捕到的日本七鳃鳗(Lampetra japonica)的两性形态及个体生殖力进行了研究。结果表明:日本七鳃鳗雌雄个体的体长、体重、净体重和肥满度等指标在繁殖前没有显著差异,而性腺重和成熟系数两性差异显著。日本七鳃鳗的个体绝对生殖力平均为(101959.47±23259.82)粒,体长的相对生殖力(FL)平均为(2219.36±496.84)粒/cm,净体重的相对生殖力(FW)平均为(964.1±260.9)粒/g。体长绝对生殖力、体长相对生殖力(FL)和净体重相对生殖力(FW)均与卵巢重和成熟系...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
王国良 路正
鳗鲡鳃肾炎的初步研究王国良，路正（浙江水产学院宁波分院，３１５０１３）鳗鲡养殖业近年来得到迅速的发展，已经成为出口创汇的主要产业。但在鳗鲡养殖中遇到的疾病种类逐渐增多，发病率和经济损失也日趋严重。１９８７年起，我们开展了鳗鲡病害研究课题。在鳗鲡常见病...
[期刊] 工业技术经济
[作者]
蓝英 王代敬
经济发展既是经济总量的增长,也是产业结构的调整和演进。合理的产业结构是区域经济健康发展的必要条件。本文运用国际上通用的偏离-份额分析法对四川省川东北七个地级市的产业结构效益进行比较分析,看出南充在川东北城市群中的重要地位与作用。
[期刊] 西南金融
[作者]
四川省金融学会川南七市州片区课题组 黎明 龚旭东
[期刊] 税务与经济(长春税务学院学报)
[作者]
东北地区高等学校文科学报研究会第六届理事会暨第七次学术研讨会于1993年6月21日至24日在延边大学举行.东北三省38所高校文科学报编辑部代表47人出席了会议.延边朝鲜族自治州副州长严曾国、延边大学副校长李柱石到会致贺.会议收到全国高校文科学报研究会及理事长、中国人民大学学报常务副总编辑杨焕章教授,副理事长兼秘书长、北京师范大学学报主编潘国琪编审的贺信.辽吉黑三省高校文科学报研究会、吉林省高等教育学会秘书处等组织也发来了贺信和贺电.东北高校文科学报研究会前理事长、吉林大学党委副书记李文焕编审亲临会议指导.
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
徐永江 柳学周 孙中之 兰功钢 曲建忠
铜暴露后鳃的组织损伤包括:上皮肿胀、肥大增生、空泡化,鳃上皮游离,鳃小片融合,粘液细胞数量增加,杯状细胞数量减少,柱细胞体系破坏,红血球溢出或融合成瘤。氯细胞增生和鳃上皮细胞的肿大、增生使得鳃的血水交换屏障距离加大而导致鳃组织缺氧。试验结果表明,鳃暴露于Cu2+溶液后会出现离子调节功能、酸平衡调节和渗透调节功能的损伤。Na+K+ATPase活力随水中铜离子浓度的升高而降低,且与对照组差异显著(P≤0.05)。组织学上可以直接地反映水体中重金属污染对鱼类鳃的损伤,因此是一种水环境重金属污染监测的重要指标。Na+K+ATPase活力对水环境铜污染具有反应的敏感性,与铜离子浓度之间存在明显的剂量效应...
[期刊] 东北亚论坛
[作者]
于淑娟
中国在图们江三角洲地区的旅游资源丰富 ,但在开发和操作中还存在产品知名度不高、不成体系、吸引力不足等问题。因此 ,要加强整个金三角地区的协作 ,兼及与邻近地区的协作开发 ,以整体的旅游资源优势吸引游客 ,推出有特色、成体系的旅游产品 ,对我国的旅游资源进行合理规划和深度开发 ,同时 ,加强软、硬件建设 ,完善旅游业的服务体系 ,采取多种形式 ,加大宣传力度与投入 ,塑造旅游形象等 ,是启动东北亚金三角旅游业应采取的方法和对策。
[期刊] 水产学报
[作者]
何滔 肖志忠 刘清华 李军
为完善条石鲷的早期组织发育过程,探索条石鲷仔鱼早期高死亡率的内在发育机制,实验对鳃器官的早期发育进行观察,结果显示:条石鲷仔鱼在1日龄时出现鳃原基;2日龄,原始鳃弓形成;3日龄,鳃丝原基出现;6日龄,鳃丝两侧的扁平细胞向外突出而形成原始的鳃小叶,假鳃出现;7日龄,鳃小叶基部出现泌氯细胞;8日龄,泌氯细胞开始分泌蛋白样物质;14日龄,鳃的结构分化发育完善。钠钾三磷酸腺苷酶(Na+,K+-ATPase)的相对活性从胚胎分裂期不断增加,直至器官分化期。此后活性逐渐降低,并保持在一个较低的水平,直至9日龄活性才开始上升。而12日龄之后又不断下降,到14日龄降至最低值(0.246±0.126)U/g。此...
关键词：
条石鲷 鳃 发育 钠钾三磷酸腺苷酶
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张贵后 黄锦莲 范延恺 李天送 王竹青 纪志康
利用花粉研制的花粉生物活性物质添加剂,在对鳗鲡的现场饲养试验中获得满意效果,二年的中间试验结果基本一致,1991年中间试验结果,鳗鲡二龄增重率比对照组增加29.05％,1990年试验。黑仔鳗种的僵鳗率减少8.57％。
[期刊] 水产学报
[作者]
杨明 王克坚 曲海东 李少菁
以细菌攻毒的真鲷鳃组织为材料,分离出mRNA,合成双链后,回收500~4 000bp cDNA片段,构建了λZAP表达型cDNA文库。初级文库的容量为1.75×105个重组子,扩增文库的滴度达到1×109pfu.mL-1,随机挑选噬菌斑的插入片断在500~2000bp之间。以hepcidin特异性引物做PCR扩增文库,获得了hepcidin抗菌肽基因cDNA序列,证明所建立的文库可用于免疫相关基因的筛选。本文库可作为筛选真鲷免疫相关基因的重要资源。
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
金则新 李钧敏
采用体积分数为70%乙醇、60%丙酮及沸水3种溶剂对七子花Heptacodium miconioides叶片、花等器官进行提取,并用提取物对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus,枯草芽孢杆菌Bacillus thuringiensis,铜绿脓杆菌Pseudomonac aeruginosa和大肠杆菌Escherichia coli等4种细菌进行抑菌试验。结果表明:叶片和花的不同溶剂提取物对4种细菌的抑菌圈大小来看,乙醇提取物的抑菌活性最高,丙酮提取物次之,水提取物最低。七子花多数器官的乙醇提取物均具有一定的抑菌活性,但花和叶的抑菌活性较高,老根和老茎则较低。其中叶片乙醇提取...
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
张俊会 金则新
为调查七子花Heptacodium miconioides生长过程中叶片提取物抑菌活性的变化规律,采集不同时期七子花叶片,以乙醇为溶剂提取活性物质,以金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和大肠杆菌Escherichia coli为检定菌株,以琼脂扩散法检测不同时期七子花叶片提取物的抑菌活性。结果表明,与煮沸法和索氏提取法相比,超声波提取简单易行,不影响叶片的体外抑菌活性,1 g提取物稀释80倍后对大肠杆菌的抑制率仍超过60%,适用于大量样本的快速分析。在整个叶片生长期,七子花叶片均表现较高的抑菌活性,抑制率超过50%,且对金黄色葡萄球菌抑杀作用强于对大肠杆菌的抑杀作用,但以...
关键词：
植物学 七子花叶片 提取物 抑菌活性
[期刊] 水产学报
[作者]
凌露露 梁英 黄文树 聂品 黄贝
为探究鱼类TRAF3在鱼类抗病毒免疫应答中的功能及作用机制，实验利用逆转录PCR克隆获得了日本鳗鲡TRAF3转录本（AjTRAF3），利用生物信息学软件分析了AjTRAF3的结构特征，利用qPCR、双荧光素酶报告系统以及免疫共沉淀等方法对其表达规律、功能及作用机理进行了初步分析。AjTRAF3的开放阅读框长度为1 707 bp，编码568个氨基酸。序列结构分析结果显示，AjTRAF3由N端的环结构域、两个锌指结构域以及一个螺旋结构域和C端高度保守的TRAF-C（MATH）结构域组成。qPCR结果显示，AjTRAF3在日本鳗鲡各组织中均有表达，脑组织中表达量最高，其次为头肾，心脏中的表达量最低。Poly I:C刺激6 h后，日本鳗鲡脾脏组织中AjTRAF3上调倍数最高，为对照组的15.83倍。迟缓爱德华菌感染24 h后，日本鳗鲡脾脏组织中AjTRAF3上调倍数最高，为对照组的31.47倍。此外，本研究构建了AjTRAF3真核表达质粒，发现过表达AjTRAF3能显著上调炎症及抗病毒相关基因的表达，可显著增强AjIFN2、AjIFN4和NF-κB启动子荧光素酶活性。并能显著上调由AjRIG-IN、AjMAVS、AjIRF3诱导的AjIFN2、AjIFN4和NF-κB启动子活性。免疫荧光结果显示，AjTRAF3主要定位于细胞质中，且与AjMAVS存在共定位。免疫共沉淀结果显示，AjTRAF3通过MATH结构域与AjMAVS相互结合，缺失该结构域后，其与AjMAVS的相互作用消失，推测AjTRAF3可通过介导RIG-I/MAVS信号转导途径调控鱼类的抗病毒免疫应答。本研究结果为进一步揭示鱼类TRAF3的生物学功能奠定了基础。
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