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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
邓晓辉 张蜀宁 侯喜林 陈沁滨
对不结球白菜Pol胞质雄性不育系(CMS)及其保持系基因组DNA进行RAPD分析,共使用了386条随机引物,其中有346条引物在两系之间都得到了扩增产物,64条引物扩增结果在两系之间表现出了遗传多态性。在其不育系中获得了1条稳定扩增的片段OPAY1000,序列测定结果表明,OPAY序列全长为1 053 bp,在GenBank中的登录号为DQ320101。根据序列测定结果设计了1对特异引物,将OPAY1000转化为更稳定的SCAR标记。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
钱瑜 刘同坤 侯喜林 李英
[目的]构建不结球白菜Pol胞质雄性不育花酵母双杂交cDNA文库,筛选与细胞色素C还原酶铁硫蛋白(BcRISP1)互作的蛋白。[方法]从不结球白菜Pol胞质雄性不育花中提取总RNA,通过长距离PCR,扩增双链cDNA(ds cDNA)。采用SMART建库技术构建不结球白菜Pol胞质雄性不育花全长cDNA文库。利用BcRISP1基因的开放阅读框,构建诱饵表达载体pGBK T-7-BcRISP1转化AH109酵母菌,根据酵母双杂交技术筛选出与BcRISP1互作的片段,并进行质粒共转化验证。[结果]经检测,文库的转化率为每μg p GADT7-Rec 1.80×106转化子,文库滴度为1.21×10...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨晓云 曹寿椿
采用田间试验和人工控温处理相结合的方法，并结合花药发育的细胞形态学研究结果，对不结球白菜波里马胞质雄性不育系（Ｐｏｌｃｍｓ）Ａ３、Ａ１１育性与温度的关系进行了研究。结果表明：温度对育性的影响发生在花蕾发育早期，６℃左右的日均温是Ａ３、Ａ１１温度敏感的临界低温；温度作用至花期育性发生变化的时间间隔与花蕾发育所处时期的温度条件有关，生长适温（２０℃左右）下这一时间间隔为１２～１６ｄ，而自然低温下可长达６０～７０ｄ；进入抽薹开花期的植株在低温处理后，育性不发生明显的变化
[期刊] 华北农学报
[作者]
田自华 史树德 张剑峰 张子义 邵金旺
对细胞质雄性不育甜菜的不育系及其保持系的叶绿体DNA(ctDNA)进行了RAPD分析,结果表明:在所选的70个引物中,甜菜细胞质雄性不育系和保持系叶绿体DNA之间不存在差异性。与此同时,对叶绿体DNA的提取方法进行了改进,在不需密度梯度离心条件下即可获得高纯度的DNA;优化了甜菜叶绿体的RAPD的反应条件。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
蒋大华 张茹佳 张昌伟 侯喜林
[目的]本文旨在克隆不结球白菜BcATPA(ATPase alpha subunit)基因并研究其功能及其在不育系和可育系中的表达差异。[方法]构建BcATPA重组质粒,在NCBI数据库进行核苷酸序列分析,得到不结球白菜ATPA基因全长序列。利用实时定量PCR技术检测BcATPA基因在不结球白菜保持系和不育系的不同组织和器官及不同小孢子发育时期的时空表达情况。[结果]获得了不结球白菜ATPA基因全长序列,命名为BcATPA。该基因的核苷酸序列全长为1 806 bp,其最大开放阅读框长度为1 527 bp,编码508个包含F1-ATP酶α亚基保守区域的氨基酸,并且含有ATP结合、walker A motif和walker B motif等位点,而且在287～315的位置含有29个氨基酸的跨膜区域。BcATPA与芸薹属中的芥菜、甘蓝型油菜和拟南芥亲缘关系特别近,二级结构和三级结构预测表明,该基因与ATP结合有关。实时荧光定量PCR结果表明,BcATPA在不育系中的表达水平高于保持系,在花瓣、萼片中表达水平较高。在整个小孢子发育时期,不育系中BcATPA基因表达量逐渐降低;而在保持系中,从四分体时期开始显著下降,因此不育系与保持系表达量差异逐渐加大。[结论]BcATPA基因在不结球白菜不育系和保持系的各个器官和整个小孢子发育时期的表达水平存在差异,研究结果为进一步研究BcATPA基因与细胞质雄性不育之间的关系提供了理论依据。
[期刊] 华北农学报
[作者]
侯建华 田自华 贺学勤 张惠忠 邵金旺
采用比较生理学的方法,对甜菜细胞质雄性不育系及其保持系生殖生长阶段的某些生理特性进行了研究。结果表明,甜菜细胞质雄性不育系的细胞色素氧化酶及ATP酶活性均表现为不育系低于其保持系;过氧化物酶和过氧化氢酶活性则表现为不育系高于其保持系,这反映线粒体内外末端氧化酶活性的高低可能与胞质雄性不育有一定关系;赤霉素含量表现为胞质雄性不育系低于其保持系。
关键词：
甜菜 胞质雄性不育 生理特性
[期刊] 华北农学报
[作者]
张德双 王国臣 张凤兰 王永健 方智远 余阳俊 赵岫云 徐家炳
提取高质量线粒体DNA(mtDNA)是研究大白菜细胞质雄性不育系不育分子特性的前提。以大白菜绿色叶片为试验材料,应用一种省时、简便、操作步骤少的方法,快速获得3组11份大白菜的mtDNA(包括保持系、Ogu CMS、Pol CMS和CMS96细胞质雄性不育系)。试验中不需要加入DNase I酶消化核DNA,提取的mtDNA质量较好;同时,采用RAPD技术,对11份大白菜mtDNA进行多态性分析,获得了与大白菜Ogu CMS和CMS96不育系相关的差异片段10条,与大白菜Ogu CMS不育系相关的差异片段3条。初步证实:大白菜CMS96和大白菜Ogu CMS不育系既有相似性又存在差异性。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
史公军 侯喜林 袁建玉
以白菜胞质雄性不育系、原不育材料及其保持系为试材 ,比较了不同发育时期叶片色素含量及其超微结构的差异。结果表明 ,莲座期原不育材料色素含量极显著低于新不育种质及保持系 ;而在苗期及抽薹期 ,色素含量差异均不显著。各时期不育材料细胞器发育明显滞后于保持系。莲座期 ,原雄性不育材料叶绿体呈椭圆形 ,片层结构疏松 ,叶绿体数目及叶绿素含量明显低于新不育种质及保持系。保持系及新不育种质叶绿体发达 ,片层结构较多。同期保持系线粒体结构发达 ,内脊丰富 ,内含物充实 ;而不育系线粒体结构简单 ,内脊较少 ,线粒体的数目高于保持系。到抽薹期 ,无论叶绿体还是线粒体都呈退化状态 ,叶绿体内累积淀粉粒 ,线粒体...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
袁建玉 侯喜林 李萍芳
对新育成的不结球白菜雄性不育系及其保持系不同发育阶段的花蕾和营养生长期及盛花期叶片中的活性氧()水平、丙二醛(MDA)含量及抗氧化酶活性进行了比较。结果表明:与保持系花蕾相比,雄性不育系花蕾中产生速率、H2O2及MDA含量较高,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性也较高,但抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性变化与上述3种酶不同。叶片中虽有保护酶活性的差异,但产生速率、H2O2和MDA含量差异不显著。说明不育株与可育株的活性氧代谢的差异主要存在于生殖器官中。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
马勇 吴建勇 邢朝柱 郭立平 巩养仓 崔明晖 王海林
【目的】通过筛选哈克尼西棉细胞质雄性不育系和保持系间败育关键时期花药中差异表达的基因,为进一步揭示棉花雄性不育机理,更好地利用棉花细胞质雄性不育材料奠定基础。【方法】以哈克尼西棉细胞质雄性不育系和保持系间败育关键时期,即花粉母细胞时期之前的花药为研究材料,应用cDNA-AFLP技术分离和鉴定两材料间差异表达的片段,并对差异片段进行验证、克隆、测序和生物信息学分析。【结果】共得到108个差异表达片段,其中67个被成功克隆,通过BLAST分析发现,29个片段可以在NCBI数据库中找到同源序列,对这些序列进行Gene Ontology分析后得知这些片段主要参与信号转导、转录、能量代谢、细胞壁发育等相...
[期刊] 华北农学报
[作者]
袁稳 吴国平 王述彬 刁卫平 刘金兵 潘宝贵 戈伟
以辣椒细胞质雄性不育系21A及其保持系21B的线粒体DNA为材料进行SRAP分析,结果表明,从128对引物扩增获得了1 440条100～1 000 bp的条带,多态性位点仅有9个,占0.63%,其中7条多态性条带位于21A中;对多态性条带回收、克隆和测序分析后发现,9个克隆在GenBank中找到了相似的功能,绝大部分与能量代谢有关;利用21A中的多态性序列特点设计SCAR引物,对21A和21B的基因组DNA进行扩增验证,3对引物在21A中扩增出目的条带,表明已成功地将SRAP标记转化为SCAR标记,是新发现的与辣椒细胞质雄性不育基因相关的片段。
[期刊] 华北农学报
[作者]
白薇 田自华 盖连玉 赵秀红 闫海鹏 邵金旺
以甜菜3个细胞质雄性不育系及其相应保持系为材料,对营养生长阶段叶片中的过氧化物酶、过氧化氢酶和酸性磷酸酯酶活性进行了研究,结果表明:在营养生长阶段的4个时期,保持系中的过氧化物酶和酸性磷酸酯酶活性均高于其相应不育系;过氧化氢酶活性表现为在块根分化形成期,不育系中的活性高于其相应保持系,而在糖分积累期则为保持系高于不育系。
关键词：
甜菜 细胞质雄性不育 酶活性
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨晓云 曹寿椿
以不结球白菜波里马胞质雄性不育系（Ｐｏｌｃｍｓ）及相应保持系为试材，从显微和亚显微结构两个层次对花药发育进行对比研究。结果表明：不结球白菜Ｐｏｌｃｍｓ花药发育受阻于孢原细胞分化期，没有孢原细胞分化，不形成药室。不育系经低温作用后，能产生微量花粉，部分花药能形成孢原细胞，并且能经过造孢细胞、花粉母细胞、四分体、单胞花粉、二胞花粉等阶段而发育为成熟花粉。超微结构观察表明：低温诱导不育系形成的部分花粉在发育过程中的亚显微结构与保持系正常花粉具有不同的特点。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
任成伟 曹寿椿
1988～1990年3年的试验研究结果表明:在萝卜细胞质遗传背景下,不结球白菜黄化现象的遗传以基因加性效应为主,兼有部分显性效应;黄化现象的广义遗传力为87.6%,狭义遗传力为67.73%.改良黄化缺陷的育种方法应从改良 F_1代母本基因型和筛选适宜父本两方面进行。系统选择的方法改良母本不育系,在早期世代较有效,但在高世代的效果不显著;届时若采用新轮回亲本更换原保持系,则效果明显,并获得了黄化轻微的胞质不育系。用广泛测交的方法筛选父本,获得了10个对萝卜胞质黄化敏感性弱的品种,其中4个品种的综合经济性状亦较好,宜应用于秋菜或秋冬菜栽培季。
[期刊] 华北农学报
[作者]
单奇伟 陈龙正 徐海 宋波 安林海 胡俏强 苏小俊 袁希汉
对不结球白菜细胞质雄性不育系S2108A和Y3611A及其相应的保持系S2108B和Y3611B进行了花器官形态比较和花药发育细胞学观察,结果表明:两套不育系和保持系之间在花器官的多个性状上差异极显著,而两个不育系S2108A和Y3611A之间除花蕾大小、雌蕊长和花瓣长有差异外,其他均不显著,说明从不同不育源转育来的两个不育系在花器官外形上差异不大;两个不育系花药败育表现均起始于四分体时期,且由于绒毡层的液泡化和径向膨大,挤压四分体小孢子导致败育,表明败育与绒毡层的不正常发育有关。此外,与Y3611A不同,在不育系S2108A中还存在另一种败育形式,绒毡层细胞壁发生融合,成为紧贴药室壁的类似于...
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