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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 陈敏敏  侯喜林  
为了筛选较易再生的不结球白菜品种,为转基因工作建立良好的再生体系,以暑绿、苏州青、亮白叶和矮抗5号为材料,研究了基因型、外植体类型以及不同的激素配比对再生频率的影响。结果表明:不同品种中,暑绿的再生频率最高。不同外植体类型中,子叶-子叶柄再生频率最高。种子发芽培养基中添加苯基噻二唑基脲(TDZ)使幼苗生长健壮,利于外植体分化,不定芽分化率均在60.00%以上,子叶-子叶柄在培养基MN+0.5 mg.L-1TDZ+0.5 mg.L-1NAA+7.5 mg.L-1AgNO3中再生频率最高,达到80.00%,表明TDZ在诱导器官的发生中有较强的持续效应。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 侯喜林  曹寿椿  
用矮脚黄的子叶建立了不结球白菜高频率再生体系。在MS+6-BA10mg/L+NAA0.3mg/L培养基上,外植体分化率达70%,每一外植体可产生9.6个不定芽。研究了各种因素对子时离体再生植株的影响,发现11~15d苗龄的子叶分化效果最佳。MS+NAA0.2mg/L对根的诱导最好。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 包美丽  付颖  郑鹏婧  冯辉  
为解决黄心春结球白菜小孢子胚诱导难的问题,以引自韩国和日本的12个黄心春结球白菜杂交种为试材,对影响小孢子胚发生和发育的因素进行了研究。结果表明:供试品种间小孢子胚发生能力有极显著差异;不同品种对培养基中添加植物生长调节剂的反应不同;发现了花蕾低温密封预处理具有促进小孢子成胚的作用;MS培养基中添加0.1mg.L-1的NAA具有促进小孢子植株生根的作用。在优化培养条件的基础上,建立了针对黄心春结球白菜的游离小孢子高效培养体系,获得了11个黄心春结球白菜杂交种的445株小孢子植株,鉴定出362株双单倍体。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 侯喜林  曹寿椿  佘建明  蔡小宁  陆维忠  
用 1 0g/ 10 0mL纤维素酶 (OnozukaR 10 ) ,0 1g/ 10 0mL果胶酶 (MecerozymeR 10 )及 10mmol/LCaCl2 ·2H2 O ,0 7mmol/LKH2 PO4 和 0 5mol/L甘露醇的混合酶液 ,从 14~ 18d苗龄的不结球白菜子叶上分离出高产率的原生质体。原生质体培养在KM8P1附加 2 ,4 D 0 5mg/L、 6 BA 0 2 5mg/L、NAA 0 5mg/L、葡萄糖 9 0g/ 10 0mL、蔗糖 1 0g/ 10 0mL、半乳糖0 0 3g/ 10 0mL液体培养基上 ,分裂旺盛。形成愈伤组织后经芽诱...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 成妍  班青宇  王倩  侯喜林  
对影响不结球白菜小孢子培养和植株再生的几个因素及再生植株的倍性进行分析。结果表明:基因型是影响小孢子胚诱导率的最重要因子,正反交材料的胚诱导率无显著差异;供体植株开花后6~10 d培养可获得高的胚诱导率;琼脂在8~12 g.L-1范围内,随着质量浓度的提高可显著提高小孢子胚再生率。结合流式细胞仪和植株形态鉴定,不结球白菜小孢子再生植株自然加倍率总体水平较高,有的高达90%,但不同基因型间有明显差异。
[期刊] 华北农学报  [作者] 李向  轩淑欣  王彦华  赵建军  申书兴  
以菜薹基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物及模板5种因素4个水平对不结球白菜SRAP反应体系进行优化,建立了适合不结球白菜的SRAP-PCR优化反应体系。利用该优化体系,选用30对芸薹属SRAP引物,对5份不结球白菜的基因组进行扩增,筛选出7对具有2条以上特异扩增条带的SRAP引物,验证了该优化体系的稳定性。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 吴昌银  叶志彪  李汉霞  
不结球白菜(Brasicacampestrissp.chinensisMakino)俗称小白菜、青菜、油菜,是我国南方大众化蔬菜。在蔬菜的周年生产、缓解淡季供应中具有重要作用。目前,国内有关利用不结球白菜子叶为外植体再生得到植株的报道并不多[1,2]...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 侯喜林  史永红  
以不结球白菜品种苏州青的子叶为外植体 ,研究了苗龄、培养基、生长调节剂与硝酸银浓度等因子对其不定芽分化频率的影响。结果表明 ,在MN +TDZ (2mg·L-1) +NAA (0 5mg·L-1)条件下 ,苏州青的子叶分化率最高 ,达36 7% ;最佳苗龄为 7d ;硝酸银的最佳质量浓度为 7 5mg·L-1。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 樊明琴  朱月林  朱丽华  
以 2个日本优质结球白菜爱知结球白菜 (C1 ) 和新理想白菜 (C2 ) 的子叶为外植体, 研究了不同激素配比、AgNO3浓度和苗龄对不定芽再生的影响。结果表明, 与 6 BA相比, TDZ对子叶不定芽再生的效果更好。在MS+0 5mg·L-1 NAA+1mg·L-1 TDZ培养基中, 2个品种的子叶不定芽再生率分别达到 75 0%和 55 0%。在此基础上, 添加 5mg·L-1 AgNO3 时, C1 和C2 子叶不定芽再生率分别达到 96 7%和 80 0%, 并以 5~8d为子叶不定芽再生的最佳苗龄。
[期刊] 华北农学报  [作者] 曾爱松  冯翠  高兵  宋立晓  严继勇  
以20份类型丰富的F1及亲本甘蓝为试材,探讨了不同甘蓝类型、F1及其亲本材料、供体植株的生长温度、供体植株的花期、高温热激时间、NLN培养基pH值等因素对甘蓝小孢子胚胎产量及质量的影响,为建立高效、完善的结球甘蓝小孢子培养技术体系提供依据。结果表明:不同叶球类型与小孢子的产胚率无明显相关性,但不同栽培季节及熟性的甘蓝品种间却存在显著差异,其中春秋类型的早、中熟甘蓝要明显好于晚熟的越冬甘蓝;用产胚能力强与产胚能力弱的材料分别做亲本杂交,所得杂交种的出胚率介于两亲本之间,表明小孢子产胚能力是一种受基因调控的遗传性状;供体植株的生长温度对于结球甘蓝胚状体的产生并无显著影响;从胚胎发生频率及胚胎质量来...
[期刊] 华北农学报  [作者] 马丽华  沈火林  郭爽  王娟娟  谭芳  
以17个不同基因型的不结球白菜为供试材料,对影响小孢子胚胎发生频率的若干因素进行了研究。结果表明:在秋冬季日光温室内,供试植株主花序第一朵花开后第7~14天取样,即初花期是最佳取样时期;不同基因型间小孢子胚胎发生能力差异很大,在接种的17个基因型中,有12个诱导出胚,诱导成功率71%;其中102号产胚量最高,达到32.78个/蕾;在已产胚材料中,产胚量最高的基因型是产胚量最低的基因型的546倍;较易抽薹型材料的产胚能力大于易抽薹型和不易抽薹型。以B5有机成分代替NLN有机成分,能够提高产胚量,尤其是对难成胚基因型的小孢子胚胎发生有较好的促进作用,甘露醇对小孢子分裂无促进作用。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李富童  程智慧  
【目的】优化低频再生黄瓜离体培养体系,为黄瓜遗传转化体系的进一步完善奠定基础。【方法】以低频再生黄瓜种质Q24和L66为材料,分别以黄瓜的子叶、子叶节和下胚轴为外植体,研究外植体类型对黄瓜再生频率的影响;在MS培养基中添加不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)和脱落酸(ABA),研究激素配比对黄瓜再生频率的影响;将获得的黄瓜子叶节外植体置于1/2 MS培养基上预培养0,1,2,3和4 d,研究预培养处理对黄瓜再生频率的影响。【结果】不同基因型黄瓜再生频率差异显著,其中Q24整体上具有相对较高的再生频率,其子叶节再生频率为54.8%,下胚轴再生频率为50.0%;L66的再生频率相对较低,其子叶节再生频率为36.9%,下胚轴再生频率为16.7%。激素配比显著影响黄瓜子叶节外植体的再生频率,其中1.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA对Q24子叶节不定芽的诱导效果最好,再生频率达到60.7%;2.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA对L66子叶节不定芽的诱导效果最好,再生频率达到42.9%。预培养处理可显著提高L66子叶节的再生频率,经过1~3 d预培养,其再生频率逐渐增加并达到最高(32.1%),4 d后再生频率开始降低;Q24子叶节经3 d预培养再生频率达到最高,为27.4%,但与对照相比差异不显著。【结论】Q24子叶节外植体最适激素配比为1.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA,经3 d预培养后其再生频率可达60.7%;L66子叶节外植体最适激素配比为2.00 mg/L ABA+1.00 mg/L 6-BA,经3 d预培养后再生频率可达42.9%。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王立  张硕  侯喜林  李英  
以不结球白菜品种‘矮脚黄’的雌蕊为材料,从蛋白质提取、IEF程序、IPG胶条pH范围和染色方法等方面进行比较,利用Tris-HCl提取方法,使用pH 4~7 IPG胶条和改进的等电聚焦程序,改良银染方法,建立了适用于不结球白菜雌蕊蛋白质的双向电泳技术体系,并使用该体系对开花前2 d的花蕾雌蕊和开花2 d后的雌蕊蛋白质进行比较分析,获得187个差异蛋白点。
[期刊] 华北农学报  [作者] 秦艳梅  李向  赵建军  王彦华  轩淑欣  
为了研究不结球白菜内部的群体结构,从全国搜集了78份广泛种植的蔬菜用不结球白菜品种,使用SSR标记对其进行多态性分析,并利用Structure 2.1软件统计分析标记数据划分群体结构。结果表明,初筛出的21对多态性SSR标记覆盖了白菜10个连锁群,在78份材料中扩增共产生了56个等位基因变异,平均每个SSR标记产生的等位基因数目为2.7个。Structure分析表明,所选的不结球白菜可分为4个亚类群,S1和S2亚类群主要集中了来自于南北方各省份的49份普通白菜,苗用大白菜主要分布在S3和S4亚类群,乌塌菜主要分布在S1和S4亚类群,菜心的遗传背景比较复杂;材料的类群划分与地理来源的关系在S2亚...
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 叶雯  袁超群  秦伟  王振涛  朱玉球  
【目的】进行离体培养关键因子优化,以满足火焰南天竹Nandina domestica ’Firepower’的规模化生产。【方法】以火焰南天竹茎段为外植体,通过对影响不定芽诱导、增殖生长和生根的基本培养基、 6-苄基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)不同质量浓度配比、白砂糖质量浓度及pH值等关键因子的研究,优化火焰南天竹茎段离体培养再生体系。【结果】WPM+0.50 mg·L~(-1)6-BA+0.10 mg·L~(-1)NAA为火焰南天竹不定芽诱导的理想培养基,不定芽诱导率为93.8%,且生长健壮;WPM+0.75 mg·L~(-1)6-BA+0.10 mg·L~(-1)NAA为不定芽增殖培养基,增殖倍数3.3,新芽鲜绿色、生长良好;1/2WPM+0.50 mg·L~(-1)NAA+白砂糖30.0 g·L~(-1)(pH 6.0)为生根培养基,生根率达95.0%。【结论】本研究建立的火焰南天竹的离体培养再生体系可为其大规模生产提供技术支撑。图2表6参12
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