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[期刊] 华北农学报  [作者] 马丽华  沈火林  王娟娟  郭爽  谭芳  
以不结球白菜小孢子胚为外植体,对胚发育成苗过程中基本培养基、激素配比、基因型及生根条件进行了研究,并对再生植株的染色体倍性进行了鉴定。研究表明:适于小孢子胚芽分化的培养基为B5+GA30.1 mg/L+蔗糖3%+琼脂1.2%,在此培养基上6号、14号、31号的子叶型胚状体的出芽率分别为53.33%,85.24%,75.55%,平均出芽数分别为5.66,3.83,3.28个;为了诱导获得健壮新根,提高植株再生率,最适宜的生根培养基为MS+IBA 0.1 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%,生根率达100%,平均根数9.70条。对133株再生植株进行了染色体倍性鉴定,结果发现不结球白菜自然加倍率很高...
[期刊] 华北农学报  [作者] 马丽华  沈火林  郭爽  王娟娟  谭芳  
以17个不同基因型的不结球白菜为供试材料,对影响小孢子胚胎发生频率的若干因素进行了研究。结果表明:在秋冬季日光温室内,供试植株主花序第一朵花开后第7~14天取样,即初花期是最佳取样时期;不同基因型间小孢子胚胎发生能力差异很大,在接种的17个基因型中,有12个诱导出胚,诱导成功率71%;其中102号产胚量最高,达到32.78个/蕾;在已产胚材料中,产胚量最高的基因型是产胚量最低的基因型的546倍;较易抽薹型材料的产胚能力大于易抽薹型和不易抽薹型。以B5有机成分代替NLN有机成分,能够提高产胚量,尤其是对难成胚基因型的小孢子胚胎发生有较好的促进作用,甘露醇对小孢子分裂无促进作用。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 成妍  班青宇  王倩  侯喜林  
对影响不结球白菜小孢子培养和植株再生的几个因素及再生植株的倍性进行分析。结果表明:基因型是影响小孢子胚诱导率的最重要因子,正反交材料的胚诱导率无显著差异;供体植株开花后6~10 d培养可获得高的胚诱导率;琼脂在8~12 g.L-1范围内,随着质量浓度的提高可显著提高小孢子胚再生率。结合流式细胞仪和植株形态鉴定,不结球白菜小孢子再生植株自然加倍率总体水平较高,有的高达90%,但不同基因型间有明显差异。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 崔群香  王倩  李英  侯喜林  
采用FDA荧光染色法对小孢子游离培养的发育过程进行了观察。结果表明:不结球白菜花粉母细胞减数分裂释放出的小孢子发育到单核靠边期及稍后时期染色最深、活力最强。多数游离小孢子培养经历的发育过程与合子胚相似,并且胚胎发育迅速,6~9 d产生大量球型胚,13 d开始出现子叶型胚胎。小孢子胚胎发育途径既有对称分裂并产生胚胎的途径(B途径),也有第1次不对称有丝分裂的方式;第1次不对称分裂后,既有营养细胞单独发育成胚的现象(A途径),也有营养细胞和生殖细胞共同发育成胚的现象(E途径),但未发现生殖细胞单独发育成胚的现象。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 陈以博  侯喜林  陈晓峰  
以不结球白菜品种苏州青(耐热)和矮脚黄(不耐热)幼苗为材料进行热激处理(40℃,0、6、12、24、48、72和96 h),测定了热激处理对不结球白菜叶片中保护酶活性、丙二醛(MDA)含量以及膜透性的影响,同时利用实时定量PCR(qPCR)技术检测叶片中BcHsp1和BcHsp2耐热基因的表达变化。结果表明:热激处理后,耐热品种叶片中SOD、POD和CAT活性的增幅大于不耐热品种;不耐热品种叶片中丙二醛含量和电解质渗透率的增幅大于耐热品种;相对于不耐热品种,耐热品种热激蛋白基因具有明显稳定的热激诱导表达特性。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 侯喜林  宋小明  
系统总结了南京农业大学近60年来进行不结球白菜种质资源的研究与利用的进展。从研究方法,种质资源的调查、搜集和整理,形态学的观察研究,生物学特性的研究,园艺学分类法的提出,抗性鉴定与分析,主要经济性状的遗传动态,种质资源遗传多样性分析与核心种质构建,种质资源的利用等方面,论述了不结球白菜种质资源研究所取得的成果,并对该项研究进行了展望。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李林  陈丽  吴小婷  邵帅旭  李英  侯喜林  刘同坤  
[目的]本文旨在研究不结球白菜Br CDF1基因的功能,验证其与CO启动子之间的调控关系,以及其在植物抽薹开花中所起的作用。[方法]以不结球白菜‘苏州青’为材料,采用酵母单杂交技术,验证Br CDF1转录因子与CO启动子是否能够结合;构建过表达载体p Early Gate101-Br CDF1,利用农杆菌介导法将过表达载体导入拟南芥中,筛选阳性苗,同时对阳性苗进行Western blot检测,观察转基因植株的表型变化;采用RT-q PCR技术,检测Br CDF1、CO、FT基因在转基因和野生型植株中不同时间点的相对表达量。[结果]酵母单杂交和β-半乳糖苷酶试验分析结果显示,Br CDF1转录因子和CO启动子之间具有较高的结合活性。Western blot检测结果表明:转基因拟南芥植株中的Br CDF1蛋白成功表达。RT-q PCR结果表明,Br CDF1基因在转基因植株中的相对表达量比野生型植株高;CO、FT基因在转基因植株中的相对表达量比野生型低,同时Br CDF1过表达植株较野生型开花晚。[结论]Br CDF1转录因子能与CO启动子结合,从而抑制CO、FT基因的表达,进而影响不结球白菜光周期开花途径。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 侯喜林  
从生物技术育种 ,新材料的创制 ,研究方法的创新及主要经济性状遗传规律的研究等方面概述了不结球白菜育种研究新进展 ;并对发展趋势与展望进行了论述。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 陈毛华  韦中  徐阳春  
通过盆栽试验研究蚓粪与等体积的猪粪堆肥、菇渣堆肥和中药渣堆肥配合对不结球白菜育苗、产量以及基质矿质态氮变化的影响。结果表明:与猪粪堆肥配合的处理不结球白菜的开展度、叶片数、茎粗、株高和壮苗指数等育苗指标均显著高于其他处理,与菇渣堆肥配合的处理不结球白菜育苗指标与未加堆肥的对照差异不显著,与中药渣堆肥配合的处理不结球白菜育苗指标低于对照。与猪粪堆肥配合的处理不结球白菜产量显著高于其他处理,与菇渣、中药渣堆肥配合的处理不结球白菜产量高于对照,但差异不显著。各处理中NH+4-N和矿质态氮含量下降。与菇渣、中药渣堆肥配合的处理NO-3-N含量下降,与猪粪堆肥配合的处理NO-3-N含量增加。结论:蚓粪与...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 郑金双  张蜀宁  孙成振  王建军  侯喜林  
以二倍体不结球白菜及其同源四倍体为材料,采用常规染色压片法进行核型分析。结果表明:二倍体不结球白菜核型公式为2n=2x=20=10m+8sm(2SAT)+2st,其中第1、2、3、4、6对为中着丝粒染色体,第5、7、8、9对为近中着丝粒染色体,第10对为近端着丝粒染色体,第5对染色体具有随体,核型类型属于2A型,为基本对称型;四倍体不结球白菜核型公式为2n=4x=20m+16sm(4SAT)+4st,核型特征与二倍体基本一致,仅染色体长度变异范围与二倍体相比略大。表明四倍体不结球白菜是由其二倍体加倍得到的,为同源四倍体。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘克钧  朱月林  侯喜林  张蜀宁  曹寿椿  
选取84份经芜菁花叶病毒(TuMV)、霜霉病菌[Peronosporaparasitica(Pers.)Fr.]、黑斑病菌[Alternariabrasicae(Berk)Sac.]单抗鉴定后筛选出的自交系,于1992~1993年对其进行上述3种病害苗期人工诱发接种多抗性联合鉴定,获得21份三抗材料。经鉴定,确认为三抗抗源材料。探讨了多抗性联合鉴定的技术与方法。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 户秋稳1  吕炜1  张蜀宁1*  李艳艳2  侯喜林1  刘惠吉1  
摘要:[目的]用秋水仙素来诱导晚抽薹不结球白菜二倍体,以期创制抽薹晚、优质、高产的不结球白菜四倍体新种质。[方法]采用 1.5 和 2.0 g·L-1秋水仙素分别对二倍体不结球白菜茎尖生长点进行 4 次和 6 次点滴处理,并鉴定筛选同源四倍体。利用实时荧光定量(RT-PCR)检测抽薹基因的表达,测定营养品质和农艺性状筛选晚抽薹且优质四倍体材料。[结果]用 2.0 g·L-1秋水仙素处理二倍体茎尖 6 次的效果最好,四倍体的诱导率为 5.90%;与二倍体相比,四倍体的叶片、花器、角果和种子都呈现明显差异。流式细胞仪鉴定二倍体(2n=2x=20)DNA 含量为 200,四倍体(2n=4x=40)为...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 户秋稳  吕炜  张蜀宁  李艳艳  侯喜林  刘惠吉  
[目的]用秋水仙素诱导晚抽薹不结球白菜二倍体,以期创制抽薹晚、优质、高产的不结球白菜四倍体新种质。[方法]采用1.5和2.0 g·L-1秋水仙素分别对二倍体不结球白菜茎尖生长点进行4次和6次点滴处理,并鉴定筛选同源四倍体。利用实时荧光定量(qRT-PCR)技术检测抽薹基因的表达,测定营养品质和农艺性状,筛选晚抽薹且优质四倍体材料。[结果]用2.0 g·L-1秋水仙素处理二倍体茎尖6次的效果最好,四倍体的诱导率为5.90%;与二倍体相比,四倍体的叶片、花器、角果和种子都呈现明显差异。流式细胞仪鉴定二倍体(2n=2x=20)DNA相对含量为200,四倍体(2n=4x=40)为400。四倍体抽薹时间...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王建营  侯喜林  张玉明  张正光  郑小波  
报道不结球白菜对炭疽病 (Colletotrichumhigginsianum) 抗性的苗期鉴定方法和抗病品种 (株系 )的筛选结果。在 2片真叶期 ,以 1× 10 6个·mL-1孢子浓度喷雾接种 ,2 5℃、RH >10 0 %保湿 2 4h ,2 5℃光照培育 7d ,可快速地将不同抗性的品种 (株系 )鉴别出来。用该方法所获得的品种 (株系 )抗性鉴定结果与田间苗期 (5片真叶期 )和成株期抗性鉴定结果基本一致。将该方法与田间抗性鉴定相结合 ,从 2 6个品种 (株系 )中筛选出 4个高抗材料 ,可供生产上使用或作为抗病育种的抗源材料
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 包美丽  付颖  郑鹏婧  冯辉  
为解决黄心春结球白菜小孢子胚诱导难的问题,以引自韩国和日本的12个黄心春结球白菜杂交种为试材,对影响小孢子胚发生和发育的因素进行了研究。结果表明:供试品种间小孢子胚发生能力有极显著差异;不同品种对培养基中添加植物生长调节剂的反应不同;发现了花蕾低温密封预处理具有促进小孢子成胚的作用;MS培养基中添加0.1mg.L-1的NAA具有促进小孢子植株生根的作用。在优化培养条件的基础上,建立了针对黄心春结球白菜的游离小孢子高效培养体系,获得了11个黄心春结球白菜杂交种的445株小孢子植株,鉴定出362株双单倍体。
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