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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 侯喜林  曹寿椿  佘建明  蔡小宁  陆维忠  
用 1 0g/ 10 0mL纤维素酶 (OnozukaR 10 ) ,0 1g/ 10 0mL果胶酶 (MecerozymeR 10 )及 10mmol/LCaCl2 ·2H2 O ,0 7mmol/LKH2 PO4 和 0 5mol/L甘露醇的混合酶液 ,从 14~ 18d苗龄的不结球白菜子叶上分离出高产率的原生质体。原生质体培养在KM8P1附加 2 ,4 D 0 5mg/L、 6 BA 0 2 5mg/L、NAA 0 5mg/L、葡萄糖 9 0g/ 10 0mL、蔗糖 1 0g/ 10 0mL、半乳糖0 0 3g/ 10 0mL液体培养基上 ,分裂旺盛。形成愈伤组织后经芽诱...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 侯喜林  曹寿椿  
用矮脚黄的子叶建立了不结球白菜高频率再生体系。在MS+6-BA10mg/L+NAA0.3mg/L培养基上,外植体分化率达70%,每一外植体可产生9.6个不定芽。研究了各种因素对子时离体再生植株的影响,发现11~15d苗龄的子叶分化效果最佳。MS+NAA0.2mg/L对根的诱导最好。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 吴昌银  叶志彪  李汉霞  
不结球白菜(Brasicacampestrissp.chinensisMakino)俗称小白菜、青菜、油菜,是我国南方大众化蔬菜。在蔬菜的周年生产、缓解淡季供应中具有重要作用。目前,国内有关利用不结球白菜子叶为外植体再生得到植株的报道并不多[1,2]...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 成妍  班青宇  王倩  侯喜林  
对影响不结球白菜小孢子培养和植株再生的几个因素及再生植株的倍性进行分析。结果表明:基因型是影响小孢子胚诱导率的最重要因子,正反交材料的胚诱导率无显著差异;供体植株开花后6~10 d培养可获得高的胚诱导率;琼脂在8~12 g.L-1范围内,随着质量浓度的提高可显著提高小孢子胚再生率。结合流式细胞仪和植株形态鉴定,不结球白菜小孢子再生植株自然加倍率总体水平较高,有的高达90%,但不同基因型间有明显差异。
[期刊] 林业科学  [作者] 王影  黄敏仁  陈道明  卫志明  孙勇如  
从小叶杨(Populussimonii)胚性悬浮细胞分离得到大量有活力的原生质体,产量高达3.8×107g-1FW。高密度(3×106/mL)液体浅层培养可促进小叶杨原生质体的分裂和生长;以葡萄糖为唯一碳源的Km8p培养基,有利于原生质体的持续分裂;在培养基中添加有机氮,有助于提高原生质体的植板率。原生质体形成细胞团后,逐步降渗和分皿培养,能有效促进细胞团的持续分裂。愈伤组织在不同分化培养基上的分化频率存在着明显的差异,同工酶分析说明,分化能力强的愈伤组织,其TCA循环和磷酸戊糖途径较为活跃,GOT、EST和PEROX的活性比较高。当芽伸长到2—3cm时,从基部切下转移到无激素的1/2MS培养...
[期刊] 华北农学报  [作者] 吕复兵  张献龙  刘金兰  
以陆地棉品种“珂字201”为材料,比较了IAA+KT和2,4-D+KT在愈伤诱导和悬浮培养中的效应,结果表明,愈伤组织诱导中,IAA和2,4-D表现为正效应,且2,4-D的效应强于IAA;KT表现为负效应;胚性愈伤悬浮培养中,3种激素都表现出负效应。以胚性细胞悬浮系为材料进行了原生质体的分离和培养试验,分离原生质体的最佳酶组合为纤维素酶(OnozukaR10)3%+果胶酶(Pectinase)1.5%,原生质体培养的最佳激素组合为IAA0.5mg/L+KT0.1mg/L,适当提高原生质体密度有利于原生质体培养。光照,温度等物理因素对原生质体培养也有明显影响。原生质体再生的愈伤组织直接在无激素的...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 朱根发  葛台明  余毓君  
用缩短继代间隔的方法,从小麦35816幼穗愈伤组织中筛选到由小颗粒组成的松脆型胚性愈伤组织,并建立了胚性细胞悬浮系。从中分离的原生质体培养在经高压灭菌的改良MS或改良N6培养基中,得到了大量的再生愈伤组织和胚状体。经直接分化或增殖后分化均得到再生植株。生长迅速的再生愈伤组织具有较高的植株再生能力;将再生细胞团增殖后分化能明显提高植株再生率和再生植株数。随着悬浮培养时间的增加,原生质体培养中直接胚胎发生途径将减少。
[期刊] 华北农学报  [作者] 赵军良  逯宝德  赵美华  
选用8个大白菜亲本材料进行离体培养试验,探讨了植物激素、品种、苗龄、取材部位及外植体放置方式对大白菜子叶不定芽再生的影响。研究结果表明,大白菜子叶再生培养基为MS附加6-BA 2 mg/L,NAA 0.5 mg/L和AgNO3 5 mg/L;生根培养基为1/2MS附加NAA 0.2 mg/L。再生植株移栽时,最好在春季,成活率可达90%以上。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 孙敏红  张蜀宁  
以6个同源四倍体和2个二倍体不结球白菜(Brassica campestrisssp.chinensisM ak ino)的子叶为外植体,正交设计筛选不定芽诱导优化培养基,测定二、四倍体不结球白菜子叶内源生长素IAA(吲哚-3-乙酸)和细胞分裂素ZRS(玉米素核苷类)的含量及ZRS/IAA比值大小,探讨再生能力与内源激素的相关性。结果表明:四倍体不定芽再生率变化范围是33.4%~83.3%,2个二倍体材料的最高再生率分别是33.3%和80.3%。四倍体白菜内源激素ZRS和IAA含量高于其相应二倍体白菜。用2种方法确定四倍体材料再生能力与内源激素含量的相关性,结果表明再生能力与ZRS/IAA比值...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 侯喜林  曹寿椿  佘建明  陆维忠  
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 陈敏敏  侯喜林  
为了筛选较易再生的不结球白菜品种,为转基因工作建立良好的再生体系,以暑绿、苏州青、亮白叶和矮抗5号为材料,研究了基因型、外植体类型以及不同的激素配比对再生频率的影响。结果表明:不同品种中,暑绿的再生频率最高。不同外植体类型中,子叶-子叶柄再生频率最高。种子发芽培养基中添加苯基噻二唑基脲(TDZ)使幼苗生长健壮,利于外植体分化,不定芽分化率均在60.00%以上,子叶-子叶柄在培养基MN+0.5 mg.L-1TDZ+0.5 mg.L-1NAA+7.5 mg.L-1AgNO3中再生频率最高,达到80.00%,表明TDZ在诱导器官的发生中有较强的持续效应。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 文峰  肖诗鑫  聂扬眉  马秋香  张鹏  郭文武  
【目的】建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础。【方法】酶解木薯品种TMS60444的脆性胚性愈伤组织(FEC)的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90%。用TM2G培养基以液体浅层法分别在5×105个/mL和2×105个/mL密度下培养,培养过程中前30 d用0.3 mol.L-1TM2G新鲜培养基每10 d更换1次,此后每10 d用0.25 mol.L-1TM2G新鲜培养基更换。原生质体培养45 d后即可挑出1—2 mm大小的愈伤组织分别在MSN培养基上分化胚、CMM上促胚成熟、CEM上茎伸长、MS上生根。【结...
[期刊] 华北农学报  [作者] 周钟信  张宗江  刘艳军  江倩云  米景九  
随意收集到的8个商品辣椒品种的子叶外植体在PD培养基上形成芽丛,转移到PE培养基上伸长为具2~3个节的茎芽,茎芽在PR培养基上生根,得到了再生植株。芽分化率达100%,移栽成活率100%。外植体切除芽后回到PD培养基上的反复操作可重复诱导芽的分化,提高繁殖系数。
[期刊] 华北农学报  [作者] 张凤兰  高田义人  徐家炳  
探讨了基因型对白菜子叶培养不定芽再生的影响。结果表明 ,不同基因型的不定芽再生率和平均每子叶生芽数差异极大 ,在被检索的 12 3个大白菜和 2 0个小白菜品种中 ,芽再生率为0~ 97 5 % ,平均每子叶生芽数为 1 0~ 10 7个。 17个大白菜和 5个小白菜品种的不定芽再生率在 80 %以上。芽再生率与品种起源地、结球类型及熟性无相关。
[期刊] 华北农学报  [作者] 王怀名  A.舍弗尔-门沃尔  G.米克斯-瓦格纳  
研究了8个杂种一代嫩茎花椰菜品种,在5个品种中得到了细胞分裂、多细胞团和愈伤组织;1个品种的愈伤组织再生了新枝。离体繁殖的无菌苗叶片剪成细条,酶液由2%纤维素酶和1%解析酶组成,21℃、50转/分摇床上分离3小时。0.5M蔗糖液漂浮纯化。接种于1%琼脂糖滴上,滴加液体培养基,25℃、光照16小时、光强4000lux下培养。3~5天细胞分裂;1周左右形成4个或更多细孢团;3~5周形成小愈伤组织。愈伤组织达2~3mm时,移到愈伤组织固体培养基上;直径达1cm时,移到固体分化培养基上,分化出根和新枝。
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