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[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
魏颖颖 赵秀香 吴元华
以嘧肽霉素生物合成阻断突变株UV2136为研究对象,建立了不吸水链霉菌辽宁变种的基因转移系统。UV2136对硫链丝菌素高度敏感,选择含有该抗生素标记的质粒pIJ702和pWHM3,探索其转化UV2136的可能性。结果表明:UV2136含有较强的限制修饰系统,采取热衰减法获得原生质体、原生质体热处理、冷处理、EDTA处理、质粒DNA变性等,均不能实现质粒pIJ702向UV2136的转化。来自非甲基化宿主E.coli ET12567的pWHM3也无法实现转化,而源于E.coli DH5α的甲基化pWHM3,可以低频转化菌株UV2136,转化效率分别为4转化子.μg-1 pWHM3,经自身修饰的pW...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
杨旻 陶美凤
对标准的链霉菌接合转移方法进行优化建立起适用于吸水链霉菌NRRL5491的接合转移系统。40℃温浴20 min为孢子的最佳热激处理条件;整合型质粒pSET152的接合转移效率是穿梭型质粒pOJ446的3~6倍;当阿泊拉霉素覆盖浓度为1μg/mL时,pSET152的接合转移效率是50μg/mL时的4.6倍,而pOJ446接合转移效率相应提高了2.4倍;MS培养基上接合转移效率是SY琼脂培养基上的3.4倍。采用最适优化条件时,接合转移频率可达到2×10-6,足够用于基因置换等遗传操作。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
杨卓 李佳丽 肖乐 何璟
利用单因素试验探索了热激处理、预萌发时间、供体宿主菌的类型、供受比及ＭｇＣｌ＿２浓度对链霉菌ＳＨ１２１接合转移效率的影响，结果显示：在５０℃热激１０Ｍｉｎ，３７℃预萌发１Ｈ，以大肠杆菌ＤＣＤＡ／ｐＵＺ８００２为供体宿主菌，在供受比为１００∶１时，使用添加４０ＭＭｏｌ／ｌ ＭｇＣｌ＿２的培养基Ｍ－ｉＳｐ４，接合转移效率最高可达到每受体１．０３×１０～（－３）个接合子。利用建立好的接合转移方法，将整合型质粒ｐＳＥＴ１５２和基因敲除质粒ｐＹＺ０９成功地导入链霉菌ＳＨ１２１，证实该方法可用于后期链霉菌ＳＨ１２１活性天然产物的挖掘及其相关生物合成基因簇的研究工作。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
孙军德 吴月 李海群 乔雪 姜治民
为提高不吸水链霉菌梧州专化型001菌株发酵的生物量,本研究采用响应面法对该菌株的液体发酵条件进行优化。在单因素试验的基础上,利用Plackett-Burman(P-B)试验设计证明可溶性淀粉(X1)、初始p H值(X4)以及温度(X5)3种因素对不吸水链霉菌生物量的积累存在着较为显著的影响。在响应面分析(response Surface Methodology,RSM)中,X1、二次项X42和X52均能显著影响该菌株生物量的积累。优化的最佳发酵条件组成为:可溶性淀粉34.66g·L-1、p H值7.62、温度28.29℃,此时不吸水链霉菌菌体生物量达0.0137g·L-1。验证试验结果表明:在...
关键词：
不吸水链霉菌 生物量 优化 响应面法
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
江曙 陈代杰 戈梅 黄为一
将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb基因 )克隆至链霉菌的质粒载体pIJ70 2中 ,构建成表达载体pLY70 2 ,并将pLY70 2质粒转化阿扎霉素B的高产菌株———吸水链霉菌NND 5 2 C的原生质体 ,获得转化子H。经发酵实验表明 ,在限氧的条件下 ,可以使NND 5 2 C菌株的生物量提高 14 4 % ,阿扎霉素B的产量提高 30 8%。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
彭开蔓 邓子新 周启
吸水链霉菌应城亚种１０－２２对外源载体ＤＮＡ显示强烈的限制性，来自变铅青链霉菌高拷贝质粒ｐＩＪ１０１的衍生载体ｐＩＪ７０２，能以较低频率转化吸水链霉菌应城亚种１０－２２的衍生菌株Ｑ１５１０。本研究先用质粒ＤＮＡ转化Ｑ１５１０，以获得一些硫链丝菌素的抗性转化子，再对这些混合转化子进行亚硝基胍和吖啶橙的多轮诱变。从经诱变后的单菌落群体中筛选获得６株对Ｃ３１敏感的个体，经鉴定均为限制和修饰基因的双突变子（Ｒ－Ｍ－）。进一步的研究证明，某些本不能转化出发菌株的质粒载体可以转化这些菌株，Ｃ３１能以高频率感染这些衍生菌株；另一个不能感染出发菌株的链霉菌噬菌体Ｒ４，也可以高频率感染这些衍生菌株；Ｃ３１和Ｒ４...
关键词：
限制-修饰 链霉菌 筛选 鉴定
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
何佳 王世梅 黄为一
提取纯化了吸水链霉菌NND 5 2胞内抗生素 ,结果表明 :它的Vanillin试剂染色、酸碱稳定性、对细菌的抗性 ,对金属离子的运载能力以及对鸡球虫作用阶段等性质与聚醚类抗生素相同。抗球虫指数 (ACI)与盐霉素相当但增重效果十分显著
关键词：
吸水链霉菌NND52 抗生素 抗球虫药物
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
张里 刘长远 赵奎华 王辉 关天舒 梁春浩 贾姝 谢小平
辣椒疫病是辽宁省辣椒生产上的重要病害,开展辽宁省辣椒疫病病菌生理小种鉴定,可为抗疫病辣椒新品种的选育提供理论依据。对来源于辽宁省不同辣椒产区的30个病样进行了分离鉴定,经致病性测定和形态特征观察,确定所分离的病菌均为辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici Leonian);利用中国辣椒疫霉菌生理小种鉴别通用寄主,对其进行了生理分化鉴定。根据供试菌株在鉴别寄主上的抗感反应,鉴定结果表明:辽宁地区辣椒疫霉菌划分为1号、2号和3号生理小种,发生频率分别为3.33%、26.67%和70%;其中3号生理小种为辽宁省辣椒疫霉菌的优势小种。从不同地区测定结果表明不同生理小种的分布与地域间的相关...
关键词：
辽宁省 辣椒疫病 生理小种鉴定 优势小种
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
方志锴 洪文荣 严凌斌 潘成奇 朱宝泉
以金色链霉菌J13基因组DNA为模板,扩增金霉素C6甲基化酶基因ctcF上下游序列作为两端同源交换臂,在两臂之间添加抗性筛选标记neo基因,并在该基因上游加入组成型强启动子ermE*,以强化筛选标记.将该外源DNA序列插入到质粒pSET152,构建重组质粒pFD106.转化大肠杆菌ET12567后,经接合转移导入金色链霉菌J13中,MS平板上筛选阳性接合子.PCR检测表明,重组质粒已整合到染色体DNA上.
关键词：
金色链霉菌 去甲基金霉素 接合转移
[期刊] 农业经济
[作者]
孟未来 吴禹 陈爱国
针对辽宁省目前农业生物基因资源数据保存分散和基因资源利用率偏低的问题,基于互联网+资源,设计了集种质库信息管理和发布、移动共享、远程数据提交为一体的综合信息管理平台。
关键词：
种质资源 种质库 数据库
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张桂敏 周秀芬 邓子新 庄永红
链霉菌抗生素的生物合成对培养环境中氧的供应相当敏感 ,为了改善这一溶氧问题 ,本研究通过将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)克隆到含ФC31int,attP基因的诱导型表达载体pIJ86 0 0上 ,构建了可接合转移到链霉菌的整合型表达vgb基因的质粒 pHZ12 76。pHZ12 76通过接合转移导入变铅青链霉菌 (Streptomyceslivi dans) ,所得重组子经Southern杂交验证后 ,进行诱导表达 ,菌体经破碎后所得蛋白粗提物经Western杂交和CO结合试验表明vgb基因在该菌中表达出了有活性的VHb蛋白。
[期刊] 农业经济
[作者]
由振宇 杜乃凡
当前,“三农”工作已成为国民经济发展的重中之重,实现农民增收是破解“三农”问题的主线,党和国家高度重视农民收入问题。农村经济结构调整和城乡经济社会协调发展,带动了农村就业结构和农民收入结构的调整优化。辽宁省农村劳动力转移在实现农民增收中的地位和作用日趋明显,但与江苏、浙江、四川、重庆等农村劳动力输出大省相比,还存在一定差距,需要加以分析研究,提出相应的对策和措施。
[期刊] 农业经济
[作者]
伊冬曼
随着我国建设小康进程的深入,"三农"问题日益显得突出。直接体现在农民收入上,城乡差距的扩大,农民收入增长缓慢,不仅影响了农村经济的发展,也抑制了整个市场的消费。据不完全统计,辽宁省农村劳动力资源总量为1227万人,其中农村富余劳动力为436万人,每年还新增20多万人。目前,农村富余劳动力中,已经转移的有136万人,其中跨区域流动的很少,出省及出
[期刊] 农业经济
[作者]
李文
简单的体力劳动在就业过程中位置越来越少,劳动者只有具备一定的劳动技能,提高综合素质,才能够找到理想的岗位。农村劳动力转移就业工作对辽宁省的经济建设有着重要的积极作用。本文在分析了辽宁劳动力转移现状和特点的基础之上,寻找劳动力培训过程中出现的问题,并提出相应解决对策,进步一促进辽宁省农村劳动力的转移与就业。
关键词：
劳动力转移 培训 就业 辽宁
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