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[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 李晓龙  李慷  汝高盟  江兴龙  刘利平  
通过分析星康吉鳗人工催熟过程中其外表形态、性腺发育和性类固醇激素含量的变化关系,以期为星康吉鳗的人工繁殖提供数据支撑。实验共收集野生星康吉鳗105尾(288.30±62.34 g),分为对照组和3个激素注射组:实验组A (CPE: 2 mg/kg),实验组B (HCG: 200 IU/kg)和实验组C (CPE: 1mg/kg和HCG: 100 IU/kg)。每周进行一次激素注射,一共注射12次激素,对照组不做处理。结果表明,实验组C亲鱼卵母细胞发育至细胞核移位阶段,实验组C中星康吉鳗性腺发育状态最佳。完成12次激素注射后,所有的实验组星康吉鳗卵母细胞发育均达到Ⅲ期,而对照组卵母细胞发育仍停滞在第Ⅱ期。通过对类固醇激素进行ELISA检测表明,在第12次注射后,实验组C星康吉鳗性腺中睾酮含量[(217±31.76) ng/g]显著高于对照组[(123.24±21.05) ng/g]。与对照组相比,注射激素实验组星康吉鳗性腺中17α-羟基孕酮含量呈现缓慢上升趋势。至实验结束时,CPE和HCG组合激素注射的星康吉鳗性腺发育到第Ⅴ期。综上所述,CPE+HCG能够有效的促进星康吉鳗的性腺发育,可作为首选催熟激素用于星康吉鳗的人工繁殖研究。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 蒲金成  湛嘉  刘登攀  杜力  黎原谷  刘利平  
[期刊] 水产学报  [作者] 林浩然  齐鑫  周雯伊  尹绍武  黄海  张勇  刘晓春  陈国华  
采用多次肌肉注射黄体生成素释放激素(luteinizing hormone releasing hormone,LHRH-A2)和鲤脑垂体匀浆(carp pituitary extract,CPE)的方法诱导花鳗鲡卵巢发育成熟。在任意挑选的15尾实验组鱼中,5尾卵巢发育完全成熟,平均性腺系数(gonadosomatic index,GSI)为(20.9±5.04)%(最大达到27.3%);5尾卵巢发育至成熟期,平均GSI为(7.2±2.86)%;5尾卵巢发育至卵黄生成期,平均GSI为(2.32±1.5)%;而对照组的性腺停留在未发育的Ⅱ期[GSI为(1.18±0.39)%],这表明注射的激素能...
[期刊] 水产学报  [作者] 林静  湛嘉  帅滇  王婷  王倩  王磊  俞雪钧  刘利平  
为分析成年花鳗鲡经多次注射鲤鱼脑垂体(carp pituitary extract,CPE,每周12 mg/kg)和人绒毛膜促性腺激素(h CG,每周300 IU/kg)后,卵巢发育成熟过程中6种性类固醇激素的含量及变化,实验采用超高效液相色谱—串联质谱(UPLC/MS/MS)联用方法对花鳗鲡性腺内这6种类固醇激素进行研究。结果发现,睾酮(testosterone,T)、孕酮(progesterone,P)、雌二醇(estradiol-17β,E2)、雌三醇(estriol,E3)、17α,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮(17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one,D...
[期刊] 水产学报  [作者] 方琼珊  翁幼竹  刘志刚  王涵生  方永强  
用兔抗血清对抗促黄体素生成素受体(LHR)或称绒毛膜促性腺激素受体(CGR)和雄激素受体(AR)进行LHR和AR免疫组织化学定位,以揭示外源性促性腺激素(鲤脑垂体激素和hCG)诱发日本鳗鲡精子发生及其内分泌机制。结果表明,经过注射激素处理后的实验组与注射前的对照组相比较,其精巢发育和精子发生出现十分显著的变化。组织学切片观察显示,激素处理前鳗鲡精巢处于精原细胞增殖期,而两种激素混合注射后第10天,实验组可见精小叶中精原细胞的有丝分裂和初级与次级精母细胞的数量显著的增加。注射后第35天,靠近生殖上皮除有少量精原细胞外,精小叶中有大量初级精母细胞和次级精母细胞和少数精子细胞以及管腔中存在少量精子。...
[期刊] 水产学报  [作者] 宋海霞  方琼珊  翁幼竹  王涵生  方永强  
用兔抗促黄体素生成素受体(LHR)或称绒毛膜促性腺激素受体(CGR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的抗体对LHR,ER和PR进行免疫组织化学定位。目的在于揭示外源性促性腺激素(鲤鱼脑垂体提取物,CPE和人绒毛膜促性腺激素,hCG)诱发日本鳗鲡卵子发生和卵母细胞成熟的内分泌机制。结果表明,注射激素前后卵巢发育和卵子发生出现了十分显著的变化。卵巢组织学切片观察显示激素处理前鳗鲡卵巢发育处于卵黄发生早期,卵母细胞平均直径(220±0.01)μm。第一次注射这两种激素后10d,实验组卵母细胞中卵黄核分散在核的周围,核仁数量显著增加,多达18~20个左右,而对照组8~10个。第3和4次激素处理...
[期刊] 水产学报  [作者] 王桂香   李慷   刘如聪   姜之信   巴旭冰   宋宗诚   刘利平  
星康吉鳗(Conger myriaster)是我国东海等近海常见鱼类,但随着过度捕捞和海洋环境的污染,星康吉鳗野生资源面临枯竭的风险,然而目前对于星康吉鳗繁殖的研究较少,缺乏星康吉鳗卵巢发育过程中的脂质需求的研究,因此本研究对人工诱导星康吉鳗卵巢发育组织脂质代谢进行了分析,以期为星康吉鳗人工繁殖提供理论基础。本研究使用超高效液相色谱四极杆轨道阱质谱(UHPLC/Q-Orbitrap MS)对人工诱导星康吉鳗卵巢发育不同时期肝脏、卵巢、肌肉和血浆进行了脂质组学分析,并测定了肝脏代谢酶活。通过对不同发育阶段星康吉鳗组织脂质成分分析,在肝脏、肌肉、卵巢和血浆中各鉴定出68、27、63和212种脂质标志物,主要包括磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)、甘油三酯(TG)和鞘磷脂(SM)等。四种组织中TG、甘油二酯(DG)和神经酰胺(Cer)等脂类物质在发育过程中呈现出不同的变化趋势。肝脏代谢中,脂肪酸合成酶、肝脂酶和脂蛋白脂酶浓度呈现先升高后降低的过程,主要参与了TG、磷脂和脂肪酸的代谢。结果表明,星康吉鳗卵巢发育过程中主要组织的TG、磷脂发生了不同程度的变化,脂质代谢相关酶活性变化也与脂质代谢特征相对应。本实验初步探究了星康吉鳗卵巢发育过程中主要组织脂质调动情况,为星康吉鳗人工繁殖和可持续发展提供基础的参考。
[期刊] 水产学报  [作者] 周雯伊  黄海  尹绍武  齐鑫  张勇  刘晓春  陈国华  林浩然  
用肌肉注射HCG的处理方式(剂量为500 U/kg体重,每周注射1次,注射时间为6周)诱导雄性花鳗鲡性腺发育成熟,成熟率达80.0%。对人工催熟花鳗鲡精子的生物学特性研究结果表明:花鳗鲡精子头部长径为(3.81±0.69)μm,短径为(1.24±0.15)μm;尾部长度为(24.83±3.05)μm;精液pH为7.3~7.5,精子密度每毫升1.02×1010尾。精子的适宜盐度为15~20,其中盐度为15时,精子激活比率最高,快速运动时间以及精子的寿命最长。精子的pH适宜范围为6.0~8.0,pH值过高或过低都会影响精子的活力与寿命。另外,4种金属离子(Mg2+、Ca2+、Na+和K+)对花鳗鲡...
[期刊] 水产学报  [作者] 谢骏  余德光  王广军  刘晓春  朱宏友  林浩然  
降海鳗鲡一直是作为研究鳗鲡人工繁殖的材料,由于降海鳗鲡的资源衰退,选用池塘养殖鳗鲡作为亲本的研究成为热点。尽管人工诱导野生降海鳗鲡获得的胚胎发育过程的研究已报道,但人工诱导池塘养殖鳗鲡的胚胎及仔鱼早期发育未见报道。本文应用池塘养殖日本鳗鲡取代野生降海日本鳗鲡进行人工繁殖,2002年的孵化批次共80次,其中大部分为人工授精卵(60次),一部分(20次)为自然产卵。受精率为(44.03±21.99)%,孵化率为(65.76±19.48)%,共计获得苗种349.9万尾。连续记录了鳗鲡的胚胎和早期仔鱼的发育过程。在水温为20.5℃时,胚胎发育需要时间为49h,所需积温1005℃.h;在水温为22.5℃...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 温海深  林浩然  
综述促性腺素释放激素类似物 (GnRH a)缓释制剂 (SRDS)、人绒毛膜促性腺激素 (HCG)SRDS、类固醇激素SRDS :雄烯二酮 (ADSD)和 17α 甲基睾丸酮 (MT)以及鲤垂体匀浆 (CPE)混合SRDS诱导海水养殖鱼类性腺发育成熟和生殖行为的效果。认为采用GnRH aSRDS处理性腺发育良好的鲈形目鱼类和鲆鲽鱼类 ,可以显著提高血液促性腺激素 (GtH)水平 ,且持续时间长 ,诱导排卵成功 ;HCG乳胶SRDS可诱导日本鳗鲡 (Anguilajaponicus)血液GtH持续升高 ,性成熟系数明显升高并且性腺发育成熟 ;HCG和CPE水 /油 /水 (W /O/W )复乳S...
[期刊] 海洋渔业  [作者] 徐长安  
鱼类在初次产卵后,以后每次产卵通常都有一定的时间间隔及季节节律,这是鱼类长期进化的结果。随着鱼类成为人工养殖对象,人们越来越希望养殖鱼类能在人为控制下成熟产卵,从而打破自然环境下的繁殖周期。迄今,真鲷、牙鲆等人工诱导提前产卵已获成功并应用到生产中。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 李和平  王韬  黄涛  张月芝  李梅芳  廖玉才  
为了筛选不受生长季节限制的大麦遗传转化受体,分析、比较了我国15个大麦品种成熟胚在1种诱导培养基和3种分化培养基上的愈伤诱导和分化率。结果表明,大麦品种间成熟胚愈伤诱导率差异非常显著,早熟3号的诱导率高达98.7%,而扬农啤2号和鄂大麦9号则低于10.0%。成熟胚在形成愈伤组织过程中,伴随胚发芽现象,但愈伤诱导与胚发芽之间没有相关性;品种间愈伤组织分化率也差异显著,早熟3号的分化率为43.3%,而其它品种的分化率均在10.0%以下;不同分化培养基的分化效率不同,在M1培养基上的平均分化率较高。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 祁永斌  李和平  廖玉才  
以长江流域及华中地区推广的24个小麦品种为材料,分析、比较其成熟胚在3种诱导培养基和1 种分化培养基上的愈伤诱导和分化频率。结果表明:不同诱导培养基在愈伤诱导率上存在显著差异,添加ABA的MB5培养基诱导效果最佳;不同小麦品种对培养条件的反应不同,华9943、华9914等4 个品种在3 种培养基上的诱导频率相同,而其余品种在3种培养基上的愈伤诱导率差异极显著。在分化绿点和成苗率上,品种间差异十分明显,农大146、苏麦6号、扬麦158、华麦12号和华麦8号的再生力强。因此,在小麦成熟胚培养中,筛选优良的基因型—培养基组合是必要的。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 李春歌  赵燕  陈红菊  付佩胜  王慧  季相山  
利用qRT-PCR系统分析了高温诱导对8月龄尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)性腺组织中8个性别分化相关基因、4个热激蛋白基因及2个甲基转移酶基因表达的影响。结果显示,高温诱导能显著下调卵巢发育相关基因Cyp19a1a、ERα和ERβ的表达水平(P0.05),这与高温对性腺分化期罗非鱼性别分化相关基因表达的影响不同。高温诱导后雌雄鱼性腺中Hsp70的表达水平显著上升(P<0.05),而DNAJB1的表达水平却显著下降(P<0.05),Hsp27和Hsp90的表达水平无显著变化。高温...
[期刊] 草业科学  [作者] 许蕾  韩佳婷  冯光燕  刘亚男  黄琳凯  张新全  
以鸭茅(Dactylis glomerata)成熟种胚为外植体,探讨了种子预处理、品种选择、培养基及激素配比对其愈伤组织诱导过程的影响,为鸭茅高频再生体系建立奠定了基础。结果表明,3个预处理条件中,次氯酸钠浓度对安巴鸭茅种子愈伤诱导率影响达显著水平(P
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