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[期刊] 水产学报  [作者] 王磊  李响  柳峰松  刘利平  
为评估不同激素诱导花鳗鲡卵巢发育的效果并探究促性腺激素在花鳗鲡发育过程中的作用,实验比较了不同激素组合处理后花鳗鲡性体指数(gonadosomatic index,GSI)的变化,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对处于不同发育阶段雌鱼脑垂体中促性腺激素基因Gt Hα(促性腺激素亚基),LHβ(促黄体生成素亚基)及FSHβ(卵泡刺激素亚基)的表达进行了定量研究。结果发现,鲤脑垂体萃取液(CPE)与人类绒毛膜促性腺激素(h CG)组合能够有效促使雌性花鳗鲡性腺发育成熟,GSI平均达22.9%,与对照组相比差异显著。单独注射雄烯二酮(ADSD)和注射ADSD、CPE、h CG混合制剂诱导效...
[期刊] 水产学报  [作者] 汪小东  林浩然  谢刚  
雄鳗注射 5~ 6次、雌鳗注射 9~ 10次鲤脑垂体匀浆液 (CPE) +人绒毛膜促性腺激素 (HCG)能分别诱导精巢和卵巢发育成熟。在雌雄鳗鲡 ,注射CPE +HCG可显著增加端脑、间脑、中脑和下丘脑mGnRH的含量 ,而对后脑和延髓mGnRH的影响较小 ;注射CPE +HCG增加雄鳗后脑和延髓cGnRH -Ⅱ含量 ,对雌鳗脑区cGnRH -Ⅱ则无显著影响。雌雄鳗鲡每次注射CPE +HCG后 1天 ,血清促性腺激素 (GtH)急剧上升 ,10天后逐渐下降 ,但雌鳗在注射 7次后 10天血清GtH水平仍然显著高于相应对照组。雄鳗注射CPE +HCG 1~ 4次后 ,血清睾酮浓度无显著变化 ;雌...
[期刊] 水产学报  [作者] 宋海霞  方琼珊  翁幼竹  王涵生  方永强  
用兔抗促黄体素生成素受体(LHR)或称绒毛膜促性腺激素受体(CGR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的抗体对LHR,ER和PR进行免疫组织化学定位。目的在于揭示外源性促性腺激素(鲤鱼脑垂体提取物,CPE和人绒毛膜促性腺激素,hCG)诱发日本鳗鲡卵子发生和卵母细胞成熟的内分泌机制。结果表明,注射激素前后卵巢发育和卵子发生出现了十分显著的变化。卵巢组织学切片观察显示激素处理前鳗鲡卵巢发育处于卵黄发生早期,卵母细胞平均直径(220±0.01)μm。第一次注射这两种激素后10d,实验组卵母细胞中卵黄核分散在核的周围,核仁数量显著增加,多达18~20个左右,而对照组8~10个。第3和4次激素处理...
[期刊] 水产学报  [作者] 方琼珊  翁幼竹  刘志刚  王涵生  方永强  
用兔抗血清对抗促黄体素生成素受体(LHR)或称绒毛膜促性腺激素受体(CGR)和雄激素受体(AR)进行LHR和AR免疫组织化学定位,以揭示外源性促性腺激素(鲤脑垂体激素和hCG)诱发日本鳗鲡精子发生及其内分泌机制。结果表明,经过注射激素处理后的实验组与注射前的对照组相比较,其精巢发育和精子发生出现十分显著的变化。组织学切片观察显示,激素处理前鳗鲡精巢处于精原细胞增殖期,而两种激素混合注射后第10天,实验组可见精小叶中精原细胞的有丝分裂和初级与次级精母细胞的数量显著的增加。注射后第35天,靠近生殖上皮除有少量精原细胞外,精小叶中有大量初级精母细胞和次级精母细胞和少数精子细胞以及管腔中存在少量精子。...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王尧尧  李冉  李运生  蒋书东  王勇  时代  岳晓琳  方富贵  李福宝  
为探究侧脑室注射Nesfatin-1对雌性大鼠促性腺激素水平及其mRNA表达的影响,对初情期前雌性大鼠的侧脑室注射Nesfatin-1,采用实时荧光定量PCR法检测促黄体素(Luteinizing hormone,LH)和促卵泡素(Folliclestimulating hormone,FSH)mRNA在垂体中的变化,采用酶联免疫分析法检测血清LH和FSH的浓度。结果表明:在初情期前的雌性大鼠中,Nesfatin-1可促进初情期启动、增加卵巢重量、血清LH水平、垂体LH mRNA和FSH mRNA的表达增加(P<0.05);但Nesfatin-1对FSH水平的影响不突出,注射后15min时增加...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王尧尧  李冉  李运生  蒋书东  王勇  时代  岳晓琳  方富贵  李福宝  
为探究侧脑室注射NesfatiN-1对雌性大鼠促性腺激素水平及其mRNa表达的影响,对初情期前雌性大鼠的侧脑室注射NesfatiN-1,采用实时荧光定量PCR法检测促黄体素(LuteiNiziNg hoRmoNe,Lh)和促卵泡素(foLLiCLestimuLatiNg hoRmoNe,fsh)mRNa在垂体中的变化,采用酶联免疫分析法检测血清Lh和fsh的浓度。结果表明:在初情期前的雌性大鼠中,NesfatiN-1可促进初情期启动、增加卵巢重量、血清Lh水平、垂体Lh mRNa和fsh mRNa的表达增加(P<0.05);但NesfatiN-1对fsh水平的影响不突出,注射后15miN时增加...
[期刊] 水产学报  [作者] 张逛  王武  段征宇  桂朗  苏冒亮  牟幸江  张俊彬  
为了解金钱鱼促性腺激素受体基因(GtHRs)在金钱鱼性腺发育中的作用,采用反转录PCR(Rt-PCR)与cDNA末端快速克隆(RACE)首次克隆了金钱鱼卵泡刺激素受体(FSHR)和促黄体生成素受体(LHR)的cDNA序列全长。FSHR的cDNA全长2538 bp,编码702个氨基酸,LHR的cDNA全长3315 bp,编码722个氨基酸,它们都含有属于糖蛋白激素受体(GHR)家族的典型跨膜螺旋结构区域(TM helix)。同源性分析显示金钱鱼GtHRs与欧洲鲈的相似性最高,且GtHRs在进化中具有一定的保
[期刊] 西南农业学报  [作者] 兰宗宝  韩晓慧  梁世忠  何若钢  卢晟盛  卢克焕  
为探讨不同来源的促性腺激素对猪卵母细胞早期孤雌发育的影响,将猪卵母细胞置于添加有不同来源促性腺激素(分别来自美国Sigma公司和中国科学院动物研究所)的成熟液中体外成熟40~44 h,成熟卵母细胞经化学孤雌激活后放入胚胎培养液中继续培养,分别于第48小时和第168小时统计卵裂率和囊胚发育率。结果发现,成熟液中同时添加0.5μg/mL中国科学院动物研究所生产的促性腺激素(FSH和LH)的卵裂率和囊胚发育率均略高于其他处理组,分别达到(65.68±24.13)%和(28.41±18.74)%;在囊胚细胞数方面,无论是添加中国科学院动物研究所还是Sigma公司生产的促性腺激素,均以添加浓度为0.5μ...
[期刊] 水产学报  [作者] 马广智  林浩然  张为民  
采用CdCl2浸没法处理鲤,研究镉对鲤血清促性腺激素(GtH)和生长激素(GH)水平的影响。结果表明:较高浓度镉(CdCl29mg/L)处理引起血清GtH水平降低,GH水平升高;提高水中钙浓度,能使由镉引起的GtH水平的降低恢复到正常水平,并对镉引起的GH水平升高起延迟作用;镉处理使鲤对LHRH-A刺激GtH分泌的反应性下降,提高水中钙浓度也不能恢复正常。实验结果提示:镉引起的GtH和GH的变化可能主要是镉干扰了钙的生理作用。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 蒲金成  湛嘉  刘登攀  杜力  黎原谷  刘利平  
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 韩丹  李广  曹斌云  王娅娜  李玲  朱广琴  王建刚  宋宇轩  
在所选具有头3胎产羔记录的西农萨能奶山羊和布尔山羊群中检测促性腺激素释放激素受体基因(GnRHR)的多态性,根据检测结果分析GnRHR基因对产羔性状的影响。设计7对引物,采用单链构象多态(PCR-SSCP)技术检测该基因第1和第2外显子在西农萨能奶山羊和布尔山羊中的单核苷酸多态性。结果发现:引物P3和P7扩增片段具有多态性。P3扩增片段,在西农萨能奶山羊和布尔山羊都检测到AA和AB基因型,AB型与AA型相比在外显子1有+714缺失A和+731插入G二个突变;P7扩增片段,在布尔山羊中检测到CC和CD基因型,在西农萨能奶山羊中只检测到CC基因型,CD型与CC型相比在外显子2有+1440C→A一个...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 曲宪成  崔严慧  周正峰  曲学伟  金一春  胡萍华  尚晓莉  程翠  张开岳  张勇  蒋骄云  
利用改进的锚定PCR方法克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)促性腺激素Ⅱβ(GtHⅡβ)亚基基因5′端侧翼序列,并在生物信息学方法分析的基础上构建了荧光素酶质粒表达载体。序列分析结果显示:克隆得到的GtHⅡβ亚基基因5′端侧翼序列长度为1354bp,其中包括TATA盒、ERE、ARE、PRE、GRE、LHX3、SF-1、Sp1、Pit-1、NF-Y和AP1等可能对GtHⅡβ亚基基因转录调控起重要作用的功能转录因子结合位点;转录起始位点位于-40~10bp。进一步利用PCR方法扩增得到了811bp(-771~+40bp)、601bp(-561~+40bp)、386bp...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 吕慎金  刘兆斌  
促性腺激素释放激素(GnRHs)是调节动物繁殖的关键激素,在哺乳动物中主要以2种形式存在。GnRHⅠ调节促性腺激素,GnRHⅡ则具有神经调节和促进性行为作用。GnRHs可通过自/旁分泌在生殖组织和肿瘤中发挥作用。但GnRHⅠ和GnRHⅡ似乎仍有信号的差异,通过I型受体而产生不同的下游效应。配体受体的相互作用和受体构象变化参与受体激活原理已被部分确定。这些研究结果为选择新的促性腺激素释放激素类似物提供潜在的更广泛和更具体的应用前景。另外,通过合成新的促性腺激素释放激素类似物,可在生产中发挥更广泛和更具体的应用。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 房保海  郑法新  孙修勤  曲凌云  张进兴  
GnRH(gonadotropin-releasing hormone)是下丘脑-垂体-性腺轴中重要的十肽信息分子,在所有的脊椎动物的生殖神经内分泌调控中具有重要的作用。GnRH成熟的十肽沿着轴突被运送到下丘脑正中隆起(median eminence)末端,然后进入下丘脑垂体门脉循环(hypothalamo?hypophyseal portal circulation)(四足动物)或直接通过轴突末梢(大多数硬骨鱼)把信号传递给刺激性腺的细胞,与特异性受体结合,刺激促性腺激素(GtHs,gonadotropins)的合成与释放,参与脊椎动物繁殖的起始和维持正常生殖功能。伴随着GnRH的研究,研究...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 帅滇  张利娜  蒲金成  唐肖峰  刘利平  
通过组织切片和电子显微镜观察经多次注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)和鲤鱼脑垂体匀浆液(carp pituitary extract,CPE)促熟的雄性鳗鲡(Anguilla japonica)精巢和脑垂体超微结构的变化,并采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC/MS/MS)联用的方法,观察性腺和血液中7种类固醇激素含量的变化。结果发现:成熟组鳗鲡精巢发育至第Ⅴ期,排精10 d时鳗鲡精巢进入退化吸收期。性成熟雄性鳗鲡的脑垂体GtH分泌细胞代谢活动旺盛
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