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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 沈赞明  韩正廉  
在系列Ⅰ(青草、干草、稻草)和系列Ⅱ(稻草添加精料及非蛋白氮)日粮条件下.分别测定了3头装有永久性瘤胃瘘管的去势公水牛瘤胃真菌孢子数量,体外培养120h的混合真菌胞外羧甲基纤维素酶(CMCase)和滤纸酶(FPase)的活力变化。结果表明:青草期瘤胃真菌数量及CMCase和FPase活力均显著高于稻草期(P<0.05);干草期CMCBse和FPase活力居中。稻草添加精料日粮时.稻草日粮(!期)添加混合精料(2kg/d)(Ⅱ期),瘤胃真菌数量无明显变化,但FPase活力显著降低(P<0.05);精料加羟甲基尿素(80g/d)添加于稻草日粮(Ⅲ期)对瘤胃真菌数量基本无影响,CMCase和FPas...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 卢忠民  陈杰  韩正康  
用两头装有永久性瘤胃瘘管及T型十二指肠瘘管的海仔水牛,研究了在饲喂稻草+精料(Ⅰ期)及青草日粮(Ⅱ期)条件下,瘤胃液及十二指肠食糜常量元素S、P、K、Na、Ca、Mg浓度及纤维素消化的变化。结果表明,在青草日粮条件下,瘤胃液及十二指肠食糜常量元素水平比稻草+精料日粮时要高;青草期瘤胃液pH下降(P<0.01),挥发性脂肪酸(TVFA)含量增加(P<0.01),纤维素消化率提高(P<0.05)。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 沈赞明  韩正康  
试验用 3头安装永久性瘤胃瘘管的成年水牛。采用自身对照方式在不同日粮条件下分别测定了瘤胃液内纤维素酶 (CMCase和FPase)活力以及厌氧真菌孢子数量。试验分为 4期 :稻草期 (Ⅰ期 ) ,稻草 +精料期 (Ⅱ期 ) ,稻草、精料 +羟甲基尿素期 (Ⅲ期 )和稻草、精料、羟甲基尿素 +硫酸铵期 (Ⅳ期 ) ,每期 2 0d。Ⅱ期稻草添喂精料 (2kg/d)时CMCase和Fpase平均活力分别下降 39% (P
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 曾燕  孙朋  倪学勤  杨杰  曾东  张洪瑜  
为探讨瘤胃细菌多样性,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(Polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术结合共性及特异性条带的克隆测序和聚类分析及主成分分析,对牛体外厌氧条件下瘤胃细菌在CMC、PCS、J、K培养基及37和50℃培养温度下的多样性进行研究。结果表明:1)37℃条件下不同培养基的DGGE图谱差异较大,虽然具有较高的平均条带数,CMC和K培养基样品分别为20和27条,但各样品间的相似性系数较低,J和CMC培养基间的相似性系数为0.84,J和PCS培养基间的相似性系数仅为0....
[期刊] 西南农业学报  [作者] 赵红波  王星凌  盛清凯  
采用3×3拉丁方试验设计,3头安装永久性大口径瘤胃瘘管的青年黄母牛饲喂3种不同精饲料的日粮,3种精饲料分别为豆粕+玉米(日粮1),猪血粉+玉米(日粮2)和豆粕+小麦(日粮3)。精料日喂量按活牛体重的1%喂给,干玉米秸等量组成的日粮配给。试验为3个试验周期,每一周期为37 d,其中适应期30 d,在早晨采食后2、4、8、16和24 h,分别5次实施瘤胃掏空,全量测定瘤胃内容物存留量。试验结果表明,日粮1在采食后2~8 h瘤胃干物质、液体和NDF的存留量最低,与其他2种日粮相比差异显著(P<0.05);日粮1和日粮3瘤胃液氨氮数量和细菌氮的数量在采食后2~8h始终高于日粮2(P<0.05);日粮1...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 胥清富  陈杰  王子荣  任明强  陆天水  
从 6头装有瘤胃瘘管的公水牛收集瘤胃液和唾液 ,加干草粉作底物 ,进行体外厌氧培养。每隔 2h采样测pH、挥发性脂肪酸 (VFA)、氨氮 (NH3 N)、微生物粗蛋白 (MCP) ,并在培养结束后测干物质 (DM)和酸性洗涤纤维 (ADF)消失率。结果显示 ,与人工唾液相比 ,唾液使草粉DM和ADF消失率分别提高 17 95 % (P 0 0 5 ) ,12 2 4% (P >0 0 5 )和10 5 4% (P
[期刊] 草业科学  [作者] 邹爱爱  魏亚琴  杨宇泽  曹磊  孙康永杰  万学瑞  王川  
为构建高效表达的内切葡聚糖酶基因工程菌,本研究以牛瘤胃液中微生物全基因组为模板,通过PCR扩增方法得到eg片段,将其克隆至表达载体pMG36e中获得分泌型表达载体pMG36e::eg;将测序正确后的重组质粒电转导到乳酸菌(Lactococcus lactis NZ9000)中,得到L. lactis NZ9000/pMG36e::eg重组菌株,将发酵上清液通过10%三氯乙酸(Trichloroacetic acid, TCA)/丙酮沉淀法浓缩蛋白后,用刚果红染色法和3, 5-二硝基水杨酸(3, 5-Dinitrosalicylic acid, DNS)法检测该蛋白酶活性,使用滤纸酶活力(filter paper enzyme activity, FPA)法检测该蛋白酶的总酶活,并对重组内切葡聚糖酶进行酶学性质研究。结果表明:从牛瘤胃微生物中克隆得到一个基因大小为1 500 bp左右的条带,该酶分子量为50 kDa左右,经刚果红染色有明显水解圈,水解圈直径为2.32 cm;采用DNS法测定该重组蛋白的酶活为12.401 9U·mL~(-1),用FPA法测定总酶活为12.246 9 U·mL~(-1);重组蛋白酶对羧甲基纤维素钠、滤纸、微晶纤维素、脱脂棉均有酶活性;最适反应温度为90℃;最适反应pH为6;其中Cu~(2+)、Mn~(2+)、Ba~(2+)、Zn~(2+)、Co~(2+)等均可以提高重组酶的酶活力,而Fe~(2+)可抑制重组内切葡聚糖酶活力。本试验纤维素酶eg基因在L. lactis NZ9000中的稳定高效表达为提高青贮饲料的营养价值和消化率提供了技术支持。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 王浩杰  索风梅  郭付新  徐天森  丁中文  
选用生产上较常用的Ag+、Na+、Ca2+、Cu2+、Mn2+、Pb2+、Zn2+、Fe2+共8种金属盐离子进行试验,研究其在活体条件下对松墨天牛纤维素酶3种组分(Cx酶、C1酶和β-葡萄糖苷酶)活性的影响。结果表明:处理24 h后,Fe2+对纤维素酶有明显的激活作用,离子浓度为1、2 mmol.L-1时Cx酶分别增加4.35%和9.76%,而其余7种离子则抑制纤维素酶的活性,尤其Ag+、Cu2+和Pb2+抑制纤维素酶活性作用效果显著,低浓度时Cx酶分别下降35.20%、36.84%和32.49%;但处理7 d后,参试的8种金属离子对该纤维素酶系表现为一致的抑制作用。随着离子浓度(0.1~50...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 索风梅  王浩杰  陈洪宝  徐天森  
本文研究了Cu++、Mn++、Ca++、Pb++、Ag+、Zn++、Na+、Fe++8种金属离子对松墨天牛(幼虫、成虫)消化道纤维素酶活性(离体条件下)的影响。结果表明:不同的金属离子对纤维素酶有不同程度的影响,除Fe++有激活作用外,其它7种金属离子对纤维素酶各组分酶活性在实验所取浓度范围内(0.1~50 mmol.L-1)表现为程度不同的抑制作用,其中Cu++和Pb++的抑制效应最强,这在纤维素酶的组分(Cx酶、-βl,4-葡萄糖苷酶、C1酶)都有很鲜明的体现,与对照相比较,在不同浓度梯度下使Cx酶的活性下降13.19%~99.98%和42.27%~100%。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 曹阳春  杨红建  沈博通  
为获得高产纤维降解酶瘤胃厌氧真菌,从放牧饲养条件下随机选出10头屠宰后的青海大通牦牛瘤胃中采集食糜样本,通过亨盖特滚管技术筛选得到29株厌氧真菌菌株。以小麦秸秆为底物,测定这些菌株第6天培养液中乙酰酯酶、阿魏酸酯酶、木聚糖酶、羧甲基纤维素酶和微晶纤维素酶的活性。29株真菌之间5种酶活性差异显著,阿魏酸酯酶活性最高的菌株比活性最低的菌株活性高出7.9倍,差异最显著;而羧甲基纤维素仅高出2.5倍,差异最不显著。对各菌株5种酶活性进行相关分析,乙酰酯酶、阿魏酸酯酶、木聚糖酶和羧甲基纤维素酶相互之间均存在显著的正相关性(r>0.67,P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王炳晓  柴同杰  苏鹏程  吕静  姚美玲  戈胜强  秦梅  
【目的】从奶牛瘤胃液中分离出具有分解纤维素能力的兼性厌氧细菌,用于绿色粗饲料微生物添加剂的研发。【方法】从奶牛瘤胃中采取瘤胃液,接种于羧甲基纤维素钠平板,采用严格厌氧结合需氧培养方式进行培养,通过刚果红染色,筛选出分解纤维素能力强的兼性厌氧细菌;采用生化试验结合16S rDNA序列分析方法对细菌进行鉴定,并绘制系统发育树;同时对细菌生长特性及有无致病性进行初步测定。【结果】共分离到63株具有分解纤维素能力的细菌,其中29株有较强的分解纤维素能力,包括24株G-菌,5株G+菌;24株G-细菌中,18株为肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种,3株为铜绿假单胞杆菌,2株为大肠杆菌,1株为产酸克雷伯氏菌;5株G+细...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 姚文  陈杰  韩正康  
以4头装有永久性瘤胃痿管的海子母水牛为实验动物,研究了稻草日粮条件下添加羟甲基尿素对瘤胃内纤维素消化代谢的影响。实验采用自身对照设计。结果表明:添加羟甲基尿素后,瘤胃内总脱氢酶活力和纤维素酶活力均显著上升;总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度明显提高;纤维素消失率显著增加。可见,稻草日粮条件下添加羟甲基尿素能提高瘤胃微生物的活力,尤其是纤维素分解力,从而对瘤胃内纤维素消化代谢有一定的改善。
[期刊] 华北农学报  [作者] 邱立友  
以麸质饲料为培养基,培养黑曲霉F27(AspergillusnigerF27)和绿色木霉T1(TirichodermavirideT1)生产纤维素酶。两种真菌的CMC酶活力均低于在稻草粉营养盐培养基中的酶活力,麸质饲料的还原糖含量明显下降。表明饲用纤维素酶以外加酶法为佳。在猪和家禽消化系统环境条件下,黑曲霉F27的纤维素酶的作用适宜温度范围、热稳定性和对麸质饲料、肉鸡饲料及猪饲料的糖化率等方面,均优于绿色木霉T1。在作用适宜pH值范围和pH稳定性方面,此两种真菌的纤维素酶具有一定的互补性。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 索风梅  王浩杰  丁中文  徐天森  
纤维素酶是天牛体内重要的消化酶类,本文以松墨天牛为对象,研究了该虫肠道纤维素酶随禁食时间、取食时间不同的变化规律。结果显示,随着禁食时间的延长,纤维素酶3种组分酶活性均表现为先升高,后降低;而随着取食时间的延长,松墨天牛体内的纤维素3种组分酶活性变化规律相一致,由开始的低活性逐渐升高,并最终趋于稳定。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 李亮亮  牛森  刘文娥  秦蓁  李海锋  
研究结果表明 ,荧光定糖法测定纤维素酶活力的反应最佳条件 :反应液浓度为46.7mg·g-1,反应时间为10min,反应温度为150℃。将荧光定糖法与滤纸酶活测定法相结合应用于纤维素酶蛋白组分及土壤纤维素酶活力的研究与测定。
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