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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李博宇 郭勇 倪和民 盛熙晖 陈余 王梁 王相国 肖龙菲 邢凯 齐晓龙
旨在研究不同抗冻保护剂对鸡精液的冷冻保存效果,并通过比较差异表达基因,以解释不同保护剂的抗冻机制。以海兰褐种公鸡为研究对象,检测了不同抗冻保护剂(保护剂Ⅰ和保护剂Ⅱ)冷冻保存后的精子活性,并利用Affymetrix表达谱芯片检测技术,对差异表达相关基因进行筛选。结果表明:1)保护剂Ⅰ组的精液冻后活力活率(27.05±1.22vs 47.65±5.89)显著高于保护剂Ⅱ组(20.65±1.50vs 35.15±5.15)(P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张树山 李青旺 李刚 陈晓宇 胡建宏 韩增胜 王立强
比较了在冷冻保存液中添加不同水平海藻糖、蔗糖和乳糖对猪精液冷冻保护的效果。结果表明,添加3种双糖均能提高精液的冷冻保护效果,其最佳添加水平均为0.035 g/mL,在该添加水平下,海藻糖组的精子活率、活力和精子质膜完整率分别为(46.34±0.52)%,(41.38±0.39)%和(43.51±1.78)%,与蔗糖组差异均不显著(P>0.05),但均显著高于乳糖和对照组(P<0.05);海藻糖组的有线粒体活性精子百分率和精子顶体完整率分别为(44.56±1.16)%,(64.09±0.81)%,显著高于蔗糖、乳糖和对照组(P<0.05),3种双糖均随添加水平升高精子的顶体完整率逐渐升高;海藻糖...
关键词：
猪精液 精液冷冻 海藻糖 蔗糖 乳糖
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李青旺 江中良 王立强 胡建宏 于永生 夏凡
采用液氮熏蒸法制作猪冻精颗粒 ,对稀释液及冷冻保护剂进行优化筛选。结果表明 ,在 5种稀释液中 ,5号稀释液优于其他 4种 (P
[期刊] 中国水产科学
[作者]
舒雪密 叶欢 仲嘉 张鸣 罗江 刘源 杜浩
中华鲟(Acipenser sinensis)是我国一级重点保护水生动物,其精原干细胞等种质资源冷冻保护技术尚不完善。本研究在前期建立的匙吻鲟(Polyodon spathula)精原干细胞冷冻保存液配方基础上,研究解冻温度、抗氧化剂和抗冻蛋白对中华鲟精原干细胞冷冻保存效果的影响,以期建立高效的中华鲟精原干细胞超低温冷冻保存方法。研究结果表明,实验设置的解冻温度(20、25、30和40℃)中25℃组冷冻保存效果最佳:解冻后细胞数目为(3.86±0.51)×10～5,细胞存活率可达(96.36±0.53)%;比较不同浓度组(500、1000和1500 mg/L)的谷胱甘肽、抗坏血酸和α-生育酚等3种抗氧化剂对中华鲟精原干细胞冷冻保存效果的影响,结果显示,冷冻保存液中添加1000 mg/L α-生育酚的实验组,解冻后得到的细胞数目最多(7.64±0.34)×10～5,显著高于其他抗氧化剂添加组,细胞存活率可达(92.82±0.72)%;通过比较不同浓度(0.1、1.0和10μg/mL)的两种类型抗冻蛋白(AFPI和AFPIII)对中华鲟精原干细胞的冷冻保存效果,发现添加了1.0μg/m L AFPI的实验组解冻效果最好,解冻后得到的细胞数目为(6.85±0.19)×10～5,显著高于其他实验组,细胞存活率为(86.89±0.73)%。综上所述,中华鲟精原干细胞冷冻保存的最佳解冻温度为25℃,1000 mg/L α-生育酚作为抗氧化剂,和1.0μg/m L AFPI作为抗冻蛋白对其冷冻保存效果最佳。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
席利萌 罗军 杨地坤 王维 孙爽 史怀平 马雪瑶
【目的】探索渗透性冷冻保护剂甘油、乙二醇、二甲基亚砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMA)对山羊精子的冷冻保护效果。【方法】采用假阴道法采集繁殖性能正常、健康、年龄2~4岁的6只西农萨能奶山羊种公羊精液,以Tris-卵黄为基础稀释液,分别添加体积分数为6%的甘油、3%和6%的乙二醇、3%和6%的DMSO、3%和6%的DMA,测定冷冻-解冻后精子活率、顶体完整性、质膜完整率、线粒体完整性、谷胱甘肽还原酶活性和丙二醛(MDA)浓度,对比不同冷冻保护剂对山羊精子的冷冻保护效果。【结果】甘油(6%)和乙二醇(3%,6%)组解冻后精子活率均极显著(P<0.01)高于DMSO(3%,6%)和DMA(3%,6...
关键词：
山羊 冷冻保护剂 精液 冷冻保存
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张树山 李青旺 胡建宏 江中良 刘宏 王立强
【目的】研究N,N-二甲基甲酰胺(N,N-Di methylformamide,DMF)与甘油配制的混合保护剂对猪冷冻精子的保护效果。【方法】以DMF和甘油配制成混合冷冻保护剂对猪精液进行冷冻,试验共设对照组(30mL/L甘油)、A组(10mL/L DMF+20mL/L甘油)、B组(20mL/L DMF+10mL/L甘油)、C组(30mL/L DMF)和D组(50mL/L DMF)5个处理组,以活动精子百分率、精子活率、精子直线运动速率、精子顶体完整率以及精子质膜完整率为检测指标,对猪精子冷冻效果进行评价。【结果】20mL/L DMF+10mL/L甘油混合冷冻保护剂对猪精子有较好的冷冻保护作用...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
梁鹏 钟机 张浩 程文健 陈丽娇
以蓝圆鯵冷冻鱼糜为材料，研究复合磷酸钠、山梨糖醇和聚葡萄糖对盐溶性蛋白溶解量和肌原纤维蛋白Ｃａ～（２＋）－ａＴＰａｓｅ活性的影响，并通过正交试验优化了抗冻剂的配方．结果表明：山梨糖醇添加量为４％、聚葡萄糖添加量为４％、复合磷酸钠添加量为０．３％时，抗冻效果最好．在此条件下，蓝圆鲹鱼糜冻藏６周后，测得盐溶性蛋白溶解量为３１．６７ ｍｇ·ｇ～（－１），Ｃａ～（２＋）－ａＴＰａｓｅ活性为０．０９０１μｍｏｌ·ｍｇ～（－１）·ｍｉｎ～（－１），较未经处理的鱼糜分别高３１．１９％和４２．３０％．
关键词：
蓝圆鯵 冷冻鱼糜 冻藏 复合抗冻剂
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
唐国梁 史文清 侯云鹏 路永强 刘庆宇 朱士恩
为研究冷冻保存和常温((17±0.5)℃)保存后猪精子活率、活力和顶体完整率,比较了猪精液冷冻稀释液中2种甘油含量细管法的快速冷冻效果,以及不同解冻温度对冷冻精液的影响,采用细胞计数法、FDA-PI双重染色法与Giemsa染色方法检测精子的活率、活力和顶体完整率。结果显示:3%(体积分数,下同)甘油冷冻解冻后精液的活率、活力(38.54%、52.24%)显著(P<0.05)高于2%甘油组(15.63%、28.22%),但3%甘油组顶体完整率(11.55%)显著(P
关键词：
猪 精液 冷冻保存 常温保存
[期刊] 西南农业学报
[作者]
胡传活 王献伟 胡传水 凌泽继 卢晟盛 卢克焕
研究共4个试验:①按入氮温度分为-5、-30、-60、-90、-120℃5个组;②按鲜精液预处理方式分为未预稀释和预稀释2个组;③按解冻温度设37、50、70℃3个组;④按稀释后精子密度分为1.25×108、2.50×108、5.00×108spz/mL 3个组。结果表明:①不同入氮温度下精子冻后活力差异不显著,但随着入氮温度的降低,精子冻后活力呈升高趋势;②预稀释不能显著提高平衡后精子活力,但可以显著或极显著提高精子稀释后活力、冻后活力、VAP、VSL及VCL等运动指标;③3种解冻温度在精子冻后活力、VAP、VSL、VCL等4个冻后运动指标上没有显著差异,但是,随着解冻温度的上升,冻后活力呈...
关键词：
猪 精液 冷冻保存 程序 运动参数
[期刊] 中国农业科学
[作者]
蔡勇 阿依木古丽 臧荣鑫 刘翊中 杨具田 乔自林 曹忻 徐红伟 吴建平
【目的】探讨绵羊前体脂肪细胞冷冻保存的最佳冻存保护剂种类和浓度。【方法】在含20%胎牛血清的DMEM/F12培养液中分别添加不同浓度的DMSO、EG、PG、G和PVP作为冻存液,对原代培养的绵羊前体脂肪细胞进行冷冻保存后,检测复苏细胞存活率、细胞增殖能力、细胞中脂肪沉积量,测量GPDH活性,并用实时荧光定量PCR检测PPARγ和LPL mRNA的表达水平,最后对复苏细胞进行染色体核型分析。【结果】各种冻存保护液中,10%DMSO和5%DMSO+5%PVP组细胞存活率最高,与对照组相比差异不显著(P>0.05),其它各试验组复苏细胞存活率均显著低于对照组(P<0.05);各试验组中10%DMSO...
关键词：
冷冻保存 前体脂肪细胞 绵羊 冷冻保护剂
[期刊] 中国水产科学
[作者]
周磊 罗渡 卢薛 王鹏飞 胥鹏 曾雷 李桂峰
实验所用翘嘴鳜(♀,Siniperca chuatsi)2~3龄,体质量1 000~1 500 g;斑鳜(♂,Siniperca scherzeri Steindachner)1~2龄,体质量300~500 g。于繁殖季节选取成熟度好的亲鱼以促黄体素释放激素类似物(LHRH-A2)、绒毛膜促性腺激素(HCG)和马来酸地欧酮(DOM)进行催产。通过筛选D-15、D-17、Ringer液和M-Hank’s液4种稀释液和二甲基亚砜(DMSO)、甘油(Gly)、乙二醇(EG)、1,2-丙二醇(PG)和二甲基甲酰胺(DMF)5种抗冻剂,发现DMSO和D-17分别是优选的抗冻剂和稀释液。以D-17作为斑鳜...
关键词：
斑鳜 精子 冷冻保存 杂交育种 种质资源
[期刊] 西南农业学报
[作者]
周洲 李世凯 赵飞 陈飞雄 孔杰
【目的】研究不同抗冻剂对西伯利亚鲟精子的冷冻保存效果,筛选出合适的鲟鱼精子超低温冷冻保存抗冻剂。【方法】采用计算机辅助精子分析系统(CASA),检测10%、15%、20%的甲醇(MeOH)和二甲基亚砜(DMSO)分别作为抗冻剂超低温保存西伯利亚鲟精液活力及运动参数差异。【结果】以MeOH和DMSO作为抗冻剂,在浓度分别为10%、15%、20%条件下,精子解冻激活后DMSO保存的精子活力及精子的运动参数均高于MeOH保存的精子。各处理抗冻效果以15%DMSO最优,其A+B级精子活力占比最高,为44.83%;精子的平均曲线运动速度(VCL)、平均路径速度(VAP)最高,分别为24.33、22.16μm/s,显著高于10%DMSO组精子,与20%DMSO间差异不显著;精子头侧摆幅度(ALH)、运动的摆动性(WOB)、平均移动角度(MAD)指标3种浓度间差异不显著。【结论】西伯利亚鲟的精子超低温冷冻保存抗冻剂以15%DMSO的抗冻效果最好。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杜立银 曹少先 刘铁铮
【目的】优化冷冻-解冻方法,提高0.5ml细管快速冷冻保存猪精液的质量。【方法】冷冻方法:分别将细管水平置于液氮面上方3、5、7、9和11cm处,每一水平位置细管分别熏蒸3、5、10、15和20min后投入液氮保存,37℃×30s水浴解冻,确定最优冷冻方法;在选择最优冷冻方法的基础上,分别采用37℃×30s(对照组)、42℃×25s、47℃×20s、52℃×15s、57℃×10s和62℃×5s共6种方法水浴解冻,确定最佳解冻方法。【结果】采用3cm×10min冷冻方法,解冻0、8h精液中精子活率、质膜完整率和顶体完整率均最高。采用相对"高温短时"解冻,精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
昝林森 张莺莺 耿繁军 田万强
【目的】研究海藻糖(TH)和牛血清白蛋白(BSA)单独或配合使用对牛精液冷冻效果的影响。【方法】向种公牛精液商业稀释液中添加不同浓度的TH(0,0.000 37,0.025和0.05 mol/L)和BSA(0,1,2,3 g/L),TH和BSA的4个添加水平分别两两组合,组成16个处理,以其中二者添加水平均为0作为对照,制作0.25 mL细管冻精,解冻(40℃,10 s)后比较分析精子活率、顶体完整率和质膜完整性3个指标。【结果】单独添加TH、BSA及其互作对牛精液的冷冻效果与对照组相比达到显著水平。与对照组相比,单独添加不同水平的TH或BSA对冻后牛精子活率和质膜完整率均有明显影响(P<0....
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