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[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
赵春燕 王源 孟晓曦 刘长江
以乳酸链球菌素效价和菌体生物量为检测指标,通过单因素试验研究碳源、氮源、磷酸盐、金属离子和发酵条件对乳酸链球菌肽菌株(Lactococcu lactis subsp.lactics)W4摇瓶发酵产生乳酸链球菌素的影响。结果表明:葡萄糖是W4菌株发酵的最佳碳源,酵母膏为最佳氮源,K2HPO4、Fe2+、Mg2+对其发酵有促进作用,而Cu2+有强抑制作用;初始pH6.5、2%接种量、35℃下振荡培养有利于W4菌株生长和乳酸链球菌素的产生。
关键词：
乳酸链球菌素 发酵条件 抑菌能力 效价
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张燕 敖日格乐 王纯洁 姜晶 赵称赫 曹晓波
为研究乳酸链球菌素（ｎｉｓｉｎ）和大黄联合药效对牛源致病性大肠杆菌的抑菌作用，通过二倍稀释法测定ｎｉｓｉｎ、大黄、抗生素及联合用药的最小抑菌浓度（ＭｉＣ）；微板法测定各药物ＭｉＣ剂量下致病性大肠秆菌的生长曲线、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）以及总蛋白含量。结果表明：１）ｎｉｓｉｎ单独使用对ＥｓＣｈＥｒｉＣｈｉＡ Ｃｏｌｉ ｏ＿（７８）无抑菌效果；大黄单独使用时ＭｉＣ为６２．５Ｍｇ／Ｍｌ，抗生素的ＭｉＣ为０．０１６Ｍｇ／Ｍｌ，ｎｉｓｉｎ和大黄联合使用ＭｉＣ分别为０．３３３和１０．４１７Ｍｇ／Ｍｌ。２）大黄和ｎｉｓｉｎ联合药效，能够有效抑制Ｅ．Ｃｏｌｉ ｏ＿（７８）的生长，缩短对数期，效果优于大黄组（Ｐ＜０．．．
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
赵春燕 李籽潼 乌日娜 张旋
为研究乳酸链球菌素产生菌Lactococcus lactis LN26在酸胁迫条件下的应激反应,本试验测定了在不同pH值梯度条件下,Lactococcus lactis LN26菌体浓度、胞内pH、H+-ATPase活性、胞内ATP浓度、细菌素产量。结果表明:随着酸度的增加Lactococcus lactis LN26生长受到明显抑制,在pH值3.0条件下,菌体浓度最低;酸胁迫增强了H+-ATPase活性,在pH值3.0处理时,H+-ATPase活性最高;酸胁迫对乳酸链球菌素的合成具有抑制作用。pH值为6.0时最适合乳酸链球菌素产生菌Lactococcus lactis LN26的生长以及乳酸...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李志成 徐怀德 王敏 蒋爱民 方勇
对传统酸奶发酵剂菌种嗜热链球菌 (L N- 6 )和保加利亚乳杆菌 (L N- 8)的基础培养基和生长促进物质分别进行了研究。结果表明 ,无脂乳固体为 110 g/kg的脱脂乳作为基础培养基效果较好 ,L N- 6和 L N- 8的活菌数分别为 2 .8× 10 8和 1.9× 10 8m L- 1。生长促进物质番茄汁、猕猴桃汁、肝浸汁对 L N- 6有一定的抑制作用 ,蜜桔汁和酵母膏则有较明显的促进作用。对 L N- 8来说生长促进物质都有一定的促进作用
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
贾知锋 敖日格乐 贺美玲 张欣 徐进 高思明 王纯洁
为研究乳酸链球菌素(Nisin)及大黄组方对患子宫内膜炎大鼠生殖系统内分泌调控与结肠炎症因子的影响,进一步揭示子宫内膜炎与结肠之间的关系,构建子宫内膜炎模型,建模前后用ELISA试剂盒检测各组大鼠子宫中髓过氧化物酶(MPO)、催产素(OXT)和检测患子宫内膜炎大鼠结肠中白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及结肠菌群的变化情况来确定治疗效果。结果表明:1)造模前后,空白对照组中MPO和OXT的浓度无显著性差异;造模24h,Nisin组、大黄组方中和高剂量组中MPO的浓度显著降低;大黄组方高剂量组和阳性对照组中OXT的浓度显著高于阴性对照组和空白对照组,阴性对照组显著降低;造模48h,阴性对照组中OXT的浓度显著降低,且显著低于其他各组;造模72h,阴性对照组中MPO显著升高,OXT的浓度显著降低,大黄组方高剂量组和阳性对照组可显著降低子宫中MPO的浓度和显著增加OXT的浓度。2)在结肠中,患子宫内膜炎大鼠在0~72h阶段,阴性对照组中IL-1β和TNF-α的浓度显著升高,大黄组方高剂量组、Nisin组及阳性对照组中IL-1β和TNF-α的浓度显著降低。3)Nisin及大黄组方高剂量组显著增加结肠中乳酸杆菌和双歧杆菌的数量,显著减少大肠杆菌和肠球菌的数量。研究发现Nisin和大黄组方高剂量组可降低子宫内膜炎大鼠子宫中MPO和OXT的浓度,患子宫内膜炎大鼠使结肠中IL-1β和TNF-α的浓度升高,Nisin、大黄组方高剂量组和阳性对照组可降低IL-1β和TNF-α的浓度,还可以调节结肠中菌群结构。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
孙军德 刘先
从酸菜汁和生鲜奶中筛选出一株高产胞外多糖的乳酸菌L3,应用苯酚—硫酸法测定其胞外多糖的产量。分别改变基础培养基的碳源、氮源、发酵温度、时间、pH等条件,探索其对乳酸菌L3胞外多糖生物合成能力的影响。结果表明:葡萄糖和蛋白胨分别是乳酸菌产生多糖的良好碳源和氮源。该菌株胞外多糖的最佳生物合成条件为:初始pH值6.5,发酵温度37℃,发酵时间24h,此条件下胞外多糖的生物合成量为108.49mg·L-1。
关键词：
乳酸菌 胞外多糖 筛选 培养条件优化
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
郑艳 刘长江 薛景珍
通过正交试验确定了L-乳酸高产菌株HT的最适发酵培养基为:麦根4%、磷酸氢二钾0.5%、硫酸铵0.5%、豆饼粉0.5%、玉米淀粉水解糖5%、碳酸钙5%、pH值为6.5;通过变温培养试验确定其最适的生长温度为28℃,最适的发酵温度为46℃;采用优化后的发酵培养基进行L-乳酸发酵,HT菌株在第4天就到达了发酵终点,L-乳酸产量为40.19g.L-1,对糖的转化率为92.6%。
关键词：
L-乳酸 菌种选育 发酵条件 培养基
[期刊] 水产学报
[作者]
师红亚 董浚键 张德锋 孙成飞 田园园 卢迈新 叶星
为了解尼罗罗非鱼无乳链球菌(GBS)荚膜多糖合成基因的表达及其与荚膜唾液酸含量、菌株致病性的关系,本实验克隆了尼罗罗非鱼荚膜多糖合成基因cps E、cps K和neu A,通过q RT-PCR方法分析了这3个基因在不同培养温度下表达水平的变化,同时通过比色法测定了不同培养温度下GBS荚膜唾液酸含量的变化,通过人工感染实验分析了不同水温条件下GBS对罗非鱼的致病性。结果显示,cps E、cps K和neu A编码的氨基酸序列均具有保守的与荚膜多糖合成相关的酶活性位点,Cps E、Neu A与已知鱼源GBS(
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
高明明 王淑杰 刘永刚 姜成刚 王刚 涂亚斌 蔡雪辉
【目的】快速高效筛选7型猪链球菌免疫原性蛋白,以作为猪链球菌疫苗的候选分子。【方法】以7型猪链球菌分离株WH07为样品,应用免疫蛋白质组学技术建立了WH07株全菌蛋白的双向电泳体系,并利用蛋白质免疫杂交技术筛选免疫原性蛋白。【结果】获得了分辨率及重复性良好的双向电泳(2-DE)图谱,且得到3个具有免疫反应性的蛋白质点,经质谱鉴定其归属于1个蛋白,即乳酸脱氢酶(LDH)。生物信息学预测表明,该蛋白分子质量为35 420ku,理论等电点为5.05,具有2个跨膜区,分别位于第10~28位和第110~129位,并根据预测分析结果成功模拟了蛋白质的三级结构。【结论】从猪链球菌WH07菌株中筛选并鉴定了1...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
高明明 王淑杰 刘永刚 姜成刚 王刚 涂亚斌 蔡雪辉
【目的】快速高效筛选7型猪链球菌免疫原性蛋白，以作为猪链球菌疫苗的候选分子。【方法】以7型猪链球菌分离株WH07为样品，应用免疫蛋白质组学技术建立了WH07株全菌蛋白的双向电泳体系，并利用蛋白质免疫杂交技术筛选免疫原性蛋白。【结果】获得了分辨率及重复性良好的双向电泳（2DE）图谱，且得到3个具有免疫反应性的蛋白质点，经质谱鉴定其归属于1个蛋白，即乳酸脱氢酶（LDH）。生物信息学预测表明，该蛋白分子质量为 35 420 ku，理论等电点为5.05，具有2个跨膜区，分别位于第10～28位和第110～129位，并根据预测分析结果成功模拟了蛋白质的三级结构。【结论】从猪链球菌WH07菌株中筛选并鉴定了...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘观斌 王淼 卢迈新 可小丽 刘志刚 朱华平 高风英 曹建萌
从尼罗罗非鱼（ＯｒｅＯｃｈｒＯｍｉｓ ｎｉｌＯｔｉｃｕｓ）肠道内容物中分离筛选出具有反硝化能力并拮抗无乳链球菌（ｓｔｒｅｐｔＯｃＯｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）的芽孢杆菌好氧菌株，并对其中拮抗性最强的１株芽孢杆菌进行形态学、生理生化特性、１６ｓ ｒｒｎａ基因序列鉴定，进一步研究其最适生长条件、水解淀粉和蛋白的能力，并进行菌株药物敏感试验及安全性检测。经鉴定，筛选出的菌株（命名为ｎＹ ５）为蜡样芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）。在反硝化性能检测培养基中接种１％的ｎＹ５菌液后，对５０ ｍｇ／ｌ的亚硝酸盐氮１２ ｈ去除效率达到１００％；对本实验室保存的２１株不同来源的无乳链球菌均有拮抗作．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
吴颖瑞 龚庆芳 方宏 梁万文 陈明 袁耀彬 何瑞杰
【目的】研究中草药对罗非鱼无乳链球菌和海豚链球菌的抑菌活性,为生产中罗非鱼链球菌病害的防治提供参考。【方法】采用琼脂扩散法,测定153种中草药乙醇提取物对罗非鱼(Tilapiasp.)无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)和海豚链球菌(S.iniae)的体外抑菌作用,并采用二倍稀释法测定中草药乙醇提取物的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。【结果】153种中草药中,博落回(Macleaya cordata)、十大功劳(Mahonia fortunei)、三颗针(Berberis spp.)、紫草(Lithospermum erythrorhizon)、田七须...
关键词：
中草药 无乳链球菌 海豚链球菌 抑菌活性
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
黎炯 叶星 卢迈新 邓国成 田园园 江小燕 黎坚平
根据无乳链球菌的cfb基因和海豚链球菌16SrRNA基因序列,设计、合成2对引物,优化扩增条件,建立了快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌的双重PCR方法.用该方法扩增无乳链球菌和海豚链球菌,可分别获得474、296bp的特异性片段,扩增嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌等其他常见鱼病原菌无特异性片段.该方法可实现对无乳链球菌和海豚链球菌的快速鉴别,具较高的灵敏度,可检测到基因组含量分别为3.2×10-3ng/μL的无乳链球菌和3.0×10-2ng/μL的海豚链球菌.对采集自广东与海南两省养殖罗非鱼病鱼的11份病原样品进行检测,均可获得474bp片段,测序与BLAST分析结果表明,扩增到的序列均为无乳链球菌...
[期刊] 水产学报
[作者]
蔡玉臻 刘志刚 卢迈新 可小丽 高风英 曹建萌
链球菌病是威胁我国罗非鱼养殖产业健康发展的重要病害之一。为研制出免疫效果好、操作简便的罗非鱼链球菌病疫苗,本研究构建重组表达无乳链球菌Sip蛋白的穿梭质粒pNZ8124-Sip,通过酶切和测序验证后电转化乳酸乳球菌NZ9000,获得能够诱导重组表达无乳链球菌Sip蛋白的乳酸菌活菌载体疫苗。采用SPS-PAGE电泳摸索最佳诱导浓度和诱导时间以获得最大表达量,通过镍柱纯化目的蛋白并进行Western blot检测;利用不同浓度的重组乳酸菌活载体疫苗灌胃口服免疫尼罗罗非鱼,采用间接ELISA法测定免疫后血清抗体水平变化,通过人工腹腔注射感染无乳链球菌获得相对免疫保护率。研究结果显示,构建的重组乳酸乳球菌可通过nisin诱导表达大小为48 ku特异性蛋白,与目的蛋白大小一致;PAGE电泳显示,重组蛋白主要以可溶蛋白和包涵体2种形式存在,其中胞内可溶性蛋白浓度达7.65 mg/mL;诱导表达的最佳条件为100 ng/mL nisin诱导6 h;Western blot检测结果显示,诱导蛋白可与鼠抗His标签抗体特异性结合。口服免疫结果显示,中浓度组(2.24×10~(10) CFU/mL)和低浓度组(2.24×10~9 CFU/mL)免疫2次能够显著提高尼罗罗非鱼的血清抗体水平和抗无乳链球菌感染能力,中浓度免疫组的相对免疫保护率最高为41.0%。本研究可为罗非鱼链球菌病口服疫苗的研究奠定基础,具有广阔的应用前景。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘晶晶 宋成洁 刘晋欢 温博婷 王小芬 袁旭峰 崔宗均
为揭示乳酸菌发酵液直接吸附生产秸秆饲料的新工艺中,发酵液对秸秆饲料的保鲜作用及其机制,以玉米秸秆为原料,以乳酸菌复合系SFC-2发酵液为处理剂,设不同添加量(0、75、150、375mL/kg),研究吸附后24h内秸秆的理化性质、微生物群动态变化及有氧稳定性。结果表明添加SFC-2发酵液后:1)提高秸秆的营养价值和风味,添加量越大,效果越明显;2)添加75mL/kg时,秸秆的有氧稳定性提高,其余处理有氧稳定性降低;3)添加发酵液可以减少饲料有氧放置过程中粗蛋白的损失;4)变性梯度凝胶电泳(Denaturing gel gradient electrophoresis,DGGE)图谱分析表明,添...
关键词：
乳酸菌复合系 发酵液 秸秆饲料 防腐作用
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