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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王月影  范光丽  杨国宇  王艳玲  张永德  
为了探讨大鼠乳腺中孕酮受体(PR)的变化规律,试验采用RT-PCR方法对不同发育时期大鼠乳腺组织中的孕酮受体表达进行了半定量研究。结果表明,妊娠18 d的PR表达水平明显低于处女期和妊娠6,12 d (P0.05)。表明PR可能参与了乳腺细胞的发育和泌乳。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王月影  范光丽  杨国宇  王艳玲  张永德  
为了探讨不同发育时期大鼠乳腺中雌激素受体α(Estrogen receptor,ERα)的表达情况,采用RT-PCR方法对不同发育时期大鼠乳腺组织中的ERα进行了半定量研究。结果表明,妊娠和泌乳期大鼠乳腺组织中的ERα表达水平均低于处女期,且差异显著(P0.05)。表明ERα可能参与了乳腺细胞的发育和凋亡。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 郭旭东  刁其玉  王月影  屠焰  闫贵龙  汪新建  李军涛  邓东晓  
研究芦丁对哺乳母鼠乳腺发育、泌乳相关激素水平及其受体表达量的影响。试验选择18只Wistar哺乳母鼠,随机分为3组,分别为对照组(Lac-Con组)每日每只灌喂生理盐水(2 mL)1次;芦丁组(Lac-Rut组)每日每只灌服芦丁(60 mg/kg,BW)1次;雌二醇组(Lac-Est组)每周每只肌注(60μg/kg,BW)1次;从哺乳第4天开始连续给药2周,基础日粮相同。检测哺乳母鼠血浆与乳腺组织中雌激素(雌二醇,E2)、孕激素(P)、催乳素(PRL)和生长激素(GH)的含量,乳腺组织中雌激素受体(雌激素α受体,ERα)、孕激素受体(PR)、催乳素受体(PRLR)和生长激素受体(GHR)的表达...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 张成锋  闵宽洪  张汉华  朱健  周鑫  
对不同发育期的克氏原螯虾的肝胰腺和性腺指数进行了测定,并采用甲醇抽提的方法,利用电化学发光免疫分析仪测定了克氏原螯虾不同发育期的卵巢和肝胰腺中孕酮和雌二醇的含量变化。结果表明,随着卵巢发育,发育初期肝胰腺指数随着发育的进行逐步增加,到初级卵黄发声期到达最大值后随之下降。卵巢中孕酮和雌二醇含量随着卵巢发育的程度而逐步提高,在初级卵黄发生期到达峰值,随后逐渐下降,在肝胰腺中有着相似的趋势,但是峰值出现稍晚,在次级卵黄发生期。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 夏荣欣  李悦  刘婷婷  孙宣  钟黄欣  郭文晴  曾诚  张国敏  
[目的]本实验旨在探究神经介素B(neuromedin B, NMB)及其受体[神经介素B受体(neuromedin B receptor, NMBR)、胃泌素释放肽受体(gastrin releasing peptide receptor, GRPR)和蛙皮素受体(bombesin receptor subtype 3, BRS3)]在山羊不同发育阶段睾丸组织中的差异表达,为解析哺乳动物睾丸发育及功能调节的机制提供参考。[方法]选取系谱清晰和体况良好的雄性山羊12只(3和9月龄,各6只)进行阉割并采集睾丸组织,在NMB及其受体基因克隆与序列分析的基础上,采用免疫组化技术检测NMB及其受体在睾丸组织中的表达定位,利用RT-qPCR和western blot检测NMB及其受体在不同发育阶段山羊睾丸组织中的表达变化。[结果]NMB及其受体基因与绵羊和牛的进化关系最近,NMB及其受体基因编码区的核苷酸序列与牛和绵羊的同源性达96%以上,结构分析发现NMBR、GRPR和BRS3均属于七次跨膜受体。NMB及其受体在3月龄和9月龄山羊睾丸组织中广泛表达,其中在间质细胞、肌样细胞和精子细胞中呈高表达。与3月龄山羊相比,9月龄山羊睾丸组织中NMB与GRPR的mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05),而NMBR与BRS3的mRNA和蛋白表达量显著增高(P<0.05)。[结论]NMB及其受体可能参与山羊睾丸发育的调节,丰富了家畜生殖生理学的研究。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 苏少锋  赵一萍  李蓓  白东义  宋海燕  赵若阳  芒来  
为进一步揭示蒙古马发育与生殖调控的分子机制提供试验数据和理论依据,研究不同发育年龄蒙古马睾丸组织中生长激素(Growth hormone,GH)、生长激素受体(Growth hormone receptor,GHR)、胰岛素样生长因子Ⅰ(Insulin-like growth factorsⅠ,IGF-Ⅰ)和胰岛素样生长因子Ⅰ受体(Insulin-like growth factorⅠreceptor,IGF-ⅠR)表达的发育性变化模式,以性成熟前期(5匹)、性成熟期(5匹)、成年期(5匹)的蒙古公马为研究对象,采集其睾丸组织,利用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)对不同发育年龄蒙古马睾丸组织中的GH、GHR、IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因的表达差异进行分析,采用免疫组织化学方法对性成熟前期和性成熟期蒙古马睾丸组织中的GH和IGF-Ⅰ蛋白质进行定位。RT-qPCR试验结果表明蒙古马睾丸组织中上述4个基因的表达量从性成熟前期到性成熟期显著增加,成年期下降。免疫组织化学结果表明GH和IGF-Ⅰ免疫标记定位于精母细胞、精原细胞、精子细胞和睾丸间质细胞,其在相关细胞中的信号从性成熟前期到性成熟期逐渐增强。研究发现睾丸组织中GH、GHR、IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR的mRNA协同表达对蒙古马睾丸发育和性成熟有重要调节作用,GH和IGF-Ⅰ蛋白可能通过自分泌/旁分泌的方式调节蒙古马的精子形成和睾丸间质细胞的功能。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 曾诚  夏荣欣  李悦  刘婷婷  孙宣  钟黄欣  郭文晴  张国敏  
[目的]本试验旨在探究神经介素B(NMB)及其受体NMBR[还包括胃泌素释放肽受体(GRPR)和蛙皮素受体(BRS3)]在山羊不同发育阶段睾丸组织中的差异表达,为解析哺乳动物睾丸发育及功能调节机制提供参考。[方法]选取系谱清晰和体况良好的雄性山羊12只(3月龄和9月龄,各6只)进行阉割并采集睾丸组织,在克隆NMB及其受体基因与分析序列的基础上,采用免疫组化技术检测NMB及其受体在睾丸组织中的表达定位,利用RT-qPCR和Western blot检测NMB及其受体在不同发育阶段山羊睾丸组织中的表达变化。[结果]NMB及其受体基因与绵羊和牛的进化关系最近,NMB及其受体基因编码区的核苷酸序列与牛和绵羊的同源性达96%以上,结构分析发现NMBR、GRPR和BRS3均属于7次跨膜受体。NMB及其受体在3月龄和9月龄山羊睾丸组织中广泛表达,其中在间质细胞、肌样细胞和精子细胞中呈高表达。与3月龄山羊相比,9月龄山羊睾丸组织中NMB与GRPR的mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05),而NMBR与BRS3的mRNA和蛋白表达量显著增加(P<0.05)。[结论]NMB及其受体可能参与山羊睾丸发育的调节。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 张金勇  柳学周  史宝  徐永江  李晓妮  常亚青  王滨  
运用同源克隆和RACE方法获得了半滑舌鳎(Cynoglossus sEmilAEvis)孕酮受体膜组分1(PgRmC1)的C DnA全长序列,生物信息学分析显示,半滑舌鳎PgRmC1 C DnA序列全长1335 bP,开放阅读框长546 bP;其编码的蛋白是单次跨膜蛋白,在n端13~35位氨基酸残基处有一个跨膜区域。半滑舌鳎PgRmC1氨基酸序列与青鳉(oRyziAs lAtiPEs)相似性最高,达到了82.9%;与青斑河鲀(tEtRAoDon nigRoviRiDis)相似度为81.2%。系统进化分析表明,半滑舌鳎PgRmC1与鳉形目和鲀形目鱼类PgRmC1聚为一个分支。采用实时荧光定量Rt...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李萌  李庆章  
【目的】探讨瘦素在奶山羊乳腺发育、泌乳和退化各时期的表达与作用。【方法】采用激光共聚焦技术及Western Blot方法,检测瘦素及其受体(OB-Rb)的表达情况;采用乳腺组织体外培养联合免疫组化及毛细管电泳技术,测定瘦素对乳腺结构及泌乳功能的影响。【结果】乳腺整个发育过程中瘦素与瘦素受体的表达呈显著正相关,青春期最高,妊娠期下降,泌乳期维持在低水平,退化期显著升高,在退化21 d恢复到青春晚期水平。妊娠期瘦素处理组乳腺导管分支增多,泌乳期瘦素处理组乳腺组织培养基中β-酪蛋白(β-CN)含量增加;退化期瘦素处理组乳腺组织导管和腺泡结构发生部分解体,乳腺组织中可以检测到较多的凋亡细胞。【结论】瘦...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 郭旭东  刁其玉  王月影  屠焰  闫贵龙  付彤  汪新建  邓凯东  张乃锋  鞠翠芳  李军涛  宋凯  顾小卫  吕宗友  徐俊  
【目的】通过考察芦丁对去卵巢处女大鼠内分泌激素水平、激素受体表达的影响以及乳腺组织形态学的观察,来研究芦丁促进乳腺发育的类雌激素样作用。【方法】试验选择32只去卵巢处女Wistar大鼠,随机分为四个处理组,假手术Sham组,每日每只灌胃生理盐水(2 mL)一次;卵巢切除Ovx组,每日每只灌胃生理盐水(2 mL)一次;芦丁Ovx+Rut组,每日每只灌服芦丁(60mg.kg-1BW)一次;雌二醇Ovx+Est组,每周每只肌注雌二醇(60μg.kg-1BW)一次。试验为期两周,试验结束后采集大鼠血液样品、乳腺组织样品等,运用放免技术检测血浆和乳腺组织中雌激素(E2)、催乳素(PRL)、生长激素(GH...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 张金勇  柳学周  史宝  徐永江  
采用qRT-PCR方法分析性成熟半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)不同发育时期卵巢卵母细胞的孕酮受体膜组分1(PGRMC1)mRNA的表达,研究发现,在发育Ⅳ期的卵巢,处于第Ⅳ时相的卵母细胞PGRMC1 mRNA表达量最高(P<0.05),表明PGRMC1主要在卵母细胞成熟阶段发挥作用。PGRMC1对HCG调控作用的正向应答效应预示其参与了卵母细胞成熟调控,为进一步探讨PGRMC1在半滑舌鳎繁殖过程的功能提供重要基础资料。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 阿依木古丽  蔡勇  曹忻  龙玲  陈士恩  余四九  崔燕  
【目的】观察发情周期不同阶段牦牛子宫中ERα、PR mRNA和蛋白的表达变化。【方法】采用实时荧光定量PCR技术和免疫组织化学SP法分别对发情期、发情后期、间情期和发情前期牦牛子宫中ERα和PR mRNA及ERα和PR蛋白的表达特点进行了研究。【结果】发情周期不同阶段牦牛子宫内膜和肌层中均有ERαmRNA和PR mRNA的表达,ERα和PR蛋白免疫阳性产物表达于子宫腔上皮细胞、腺上皮细胞、基质细胞、血管内皮细胞和子宫肌层平滑肌细胞中;子宫内膜中ERαmRNA和PR mRNA在发情后期表达最强,间情期显著下降(P<0.05),发情前期回升;ERα和PR蛋白表达在发情期最强而间情期最弱;子宫肌层中...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘笙腩  于萌  颜润川  张伟  段明慧  胡新德  华进联  陈树林  赵善廷  
【目的】研究microRNA-34c(简称miR-34c)在出生后不同发育时期小鼠嗅球、大脑皮质、小脑皮质及海马中的表达情况,并分析其与小鼠行为活动之间的相关性。【方法】以出生后0,3,7,14,21,28,60和90d的雄性昆明小白鼠为试验动物,以5SrRNA为内参基因,运用荧光实时定量PCR技术,检测miR-34c在小鼠出生后8个不同发育时期嗅球、大脑皮质、小脑皮质和海马中的相对表达量以及在成年鼠脑组织中4个不同部位的相对表达量。【结果】随着小鼠的发育,miR-34c在嗅球、大脑皮质、小脑皮质及海马中的相对表达量均呈现不同程度的递增趋势。在成年鼠中,miR-34c在嗅球、大脑皮质、小脑皮质...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 罗金  袁小松  郝佳伟  田占成  谢俊仁  陈泽  任巧云  殷宏  罗建勋  刘光远  
[目的]micro rNA(mirNA)作为一类内源性的非编码rNA,仅有18—25 Nt,其广泛存在于动植物细胞中,可诱导生物基因沉默,参与细胞生长、发育、基因转录和翻译等诸多生命活动的调控过程。以亚洲璃眼蜱为研究对象,对mir-451及其靶基因(巨噬细胞游走因子,miF)在相互作用关系进行分析。[方法]参考mir-451成熟体序列(AAA ccG UUA ccA UUA cUG AGU UU)来自研究单元亚洲璃眼蜱高通量测序所获得的结果。根据该成熟体序列设计stem-loop及pcr引物,rt-pcr扩增获得蜱源性mir-451序列;并对不同物种来源的mir-451序列特征进行分析。基因合...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 肖钢  张秀英  张振乾  官春云  
以授粉后27d的种子mRNA为目标群体,授粉后7d的种子mRNA为对照,构建甘蓝型油菜种子发育期基因差异表达文库.文库包括560个克隆,经菌落PCR检测,456个菌落含有插入片段,占全部克隆的91.2%,片段大小200~600bp.对PCR阳性克隆进行斑点杂交,得到201个上调的阳性斑点杂交阳性克隆,对其进行测序,得到有效ESTs序列198个.BLASTN结果显示,134个ESTs序列没有同源序列,可能是新基因,另外64个ESTs序列在油菜或拟南芥核酸数据库中存在同源序列.这64个ESTs序列和已知功能(主要是能量代谢、物质代谢、基因调控、衰老及抗性等)的蛋白有高度相似性.
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