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[期刊] 华北农学报
[作者]
陈静廷 卜登攀 马露 杨晋辉 李发第
旨在研究不同物种泌乳奶牛牛乳中活性物质免疫球蛋白和乳铁蛋白绝对含量的特性。采用双抗夹心ELISA法对牦牛乳、水牛乳和荷斯坦奶牛乳乳样中主要免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)和乳铁蛋白(Lf)含量进行了定量测定并做出了相关性分析。结果显示,牦牛乳、水牛乳和荷斯坦奶牛乳乳样中免疫球蛋白和乳铁蛋白活性质量浓度与吸光值存在良好的线性关系,各标准曲线方程的R均大于0.99。不同物种牛乳中IgA、IgG、IgM和Lf的绝对含量差异显著(P<0.05)。同一品种牛乳中免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和Lf的绝对含量显示出不同的个体性差异。除荷斯坦奶牛乳乳样中IgA与IgM呈现较低程度的负相关外,牛乳中Ig...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨永新 王加启 卜登攀 李珊珊 周凌云
【目的】分析不同体细胞数牛乳中乳蛋白的表达变化。【方法】采用二维凝胶电泳技术分离了低体细胞数、中体细胞数、高体细胞数和临床乳房炎的牛乳蛋白,考马斯亮蓝G-250溶液染色,液相色谱串联质谱检测表达变化的蛋白点。【结果】在中体细胞数和高体细胞数乳中酪蛋白水解产物和白蛋白增加,在临床乳房炎牛乳中α-、β-和κ-酪蛋白几乎全部水解,而白蛋白、转铁蛋白、纤维蛋白原β链和结合珠蛋白等乳清蛋白表达量增加。【结论】展示了不同体细胞数牛乳中乳蛋白的凝胶表达图谱,同时表明牛乳酪蛋白的水解程度随着体细胞数的增加而增加,至严重临床乳房炎时牛乳中酪蛋白几乎全部水解而乳清蛋白急剧增加。
关键词：
奶牛 体细胞数 乳蛋白 质谱检测
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨晓宇 李娜 杨华 陈锦屏 张富新
研究了酸、碱、胃蛋白酶、胰蛋白酶对羊初乳中免疫球蛋白IgG稳定性的影响。结果表明,IgG在pH 值为5．0～10．0时十分稳定,在pH值低于5．0的条件下,随pH值降低,变性率急剧上升;正交试验结果表明,胃蛋白酶对IgG的影响因素为pH值>作用时间>酶液浓度;最佳条件为pH 4．0,作用时间1 h,胃蛋白酶的质量浓度为0．5 mg／mL;胰蛋白酶对IgG活性的影响相对较小。
关键词：
羊初乳 免疫球蛋白 稳定性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
程金波 王加启 卜登攀 刘光磊 张春刚 董晓丽 魏宏阳 周凌云 刘开朗
研究小鼠不同生理阶段以及免疫条件下,乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量的变化。选择120只健康昆明小白鼠,于分娩后4 d进行如下制剂处理:脂肪酶蛋白(Lipase)、空免疫刺激复合物(ISCOM)和Lipase。于分娩后8和12 d(即注射后4和8 d)用间接ELISA法测定乳中和血清中的特异性IgG含量,用Real Time PCR检测小鼠乳腺中乳铁蛋白基因的相对表达量。另外,正常生理状态乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量的变化分别是在分娩后1、4、8和12 d进行检测。结果表明,正常状态下,小鼠分娩后1 d时,乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量相对较高,而在分娩后4、8和12 d时较低;免疫条件...
关键词：
小鼠 免疫刺激 乳腺 乳铁蛋白 基因表达
[期刊] 华北农学报
[作者]
程金波 王加启 李珊珊 甄云鹏 刘光磊 卜登攀 刘开朗
功能乳制品的加工失活是目前乳制品工业中的重要难题。本试验旨在研究不同热处理方式对于乳中活性物质免疫球蛋白(IgG)和乳铁蛋白(Lf)的影响。本研究参照目前乳品工业中常用的热处理方式,共选用12种温度和时间组合。结果表明,乳品加工过程中的均质化处理提高了乳中IgG以及Lf的活性;不同的温度与时间的热处理方式组合可以显著的影响乳中IgG和Lf的活性;综合考虑乳中IgG和Lf活性变化,本研究表明70～75℃,15s的加工工艺适合于这两种功能性蛋白的大规模工业化生产。
关键词：
热处理 牛奶 IgG 乳铁蛋白
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
荆强 苗晋锋 顾蓓蓓 邓月娥 邹思湘
选择同处于泌乳初期的睢宁白山羊6头,产后第5、8天分别向左、右乳区灌注等体积的灭菌PBS和10μg.kg-1CpG-ODN(cytosine-phosphate-guanosine dinucleotides),第9天于左、右乳区经乳导管灌注大肠杆菌(2×109CFU.mL-1)和金黄色葡萄球菌(2×109CFU.mL-1)混合菌液3 mL。分别于灌注细菌前0 h,灌注后8、16、24、48和72 h采集乳样,动态监测乳中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)和髓过氧化物酶(MPO)的活力及乳铁蛋白含量变化。灌注72 h后处死动物,取乳腺组织进行组织学观察。结果显示:灌注细菌后72 ...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
杨晋辉 张军民 卜登攀 周凌云 杨永新 马露 张娟霞
分别在北京、滁州、哈尔滨、呼和浩特、乌鲁木齐、西安6个地区选取采样牛场进行春季和夏季采样,测定乳中IgA、IgM、乳铁蛋白和SCC,数据采用SAS 8.0进行描述统计和相关性分析,并以牛场、季节为主效应进行方差分析,研究牛奶中免疫球蛋白IgA、IgM和乳铁蛋白统计特征,及其随体细胞计数(SCC)的变化趋势。结果显示:乳中IgA、IgM、乳铁蛋白浓度呈对数正态分布;不同牛场奶牛乳中的IgA、IgM、乳铁蛋白差异较大,春季和夏季牛奶中IgM和乳铁蛋白含量变化显著,但IgA和SCC无显著差异。乳中IgA、IgM、乳铁蛋白(对数形式)以及体细胞评分(SCS)之间呈极显著的正相关,并且随SCS的升高,I...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
戴珊 赵燕 刘芬 滕慧 张学文
以pET–30a和pEGX为出发载体，构建牛乳铁蛋白功能片段BlfFf基因工程表达的非融合性表达质粒pET–BlfFf和和融合性表达质粒pEGX–BlfFf，并在大肠杆菌BL21中诱导了蛋白表达。表达产物经SDS–PAGE分析，非融合型表达pET–BlfFf导表达的目标蛋白主要以包涵体形式存在，而融合型的pEGX–BlfFf表达的目标蛋白则可大量溶于细胞破碎上清液中，说明后者更适合表达可溶性目标蛋白。pEGX–BlfFf诱导表达产物经GST标签填料柱亲和层析纯化后，可制备出可溶性融合蛋白GST–BlfFf，其产量约为60 mg/L。该蛋白经凝血酶去除GST标签，获得纯化的目标肽BlfFf。对BlfFf的生物活性的试验表明，经过胃蛋白酶水解后的多肽对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有抗菌活性。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
戴珊 赵燕 刘芬 滕慧 张学文
以pET–30a和pEGX为出发载体，构建牛乳铁蛋白功能片段BlfFf基因工程表达的非融合性表达质粒pET–BlfFf和和融合性表达质粒pEGX–BlfFf，并在大肠杆菌BL21中诱导了蛋白表达。表达产物经SDS–PAGE分析，非融合型表达pET–BlfFf导表达的目标蛋白主要以包涵体形式存在，而融合型的pEGX–BlfFf表达的目标蛋白则可大量溶于细胞破碎上清液中，说明后者更适合表达可溶性目标蛋白。pEGX–BlfFf诱导表达产物经GST标签填料柱亲和层析纯化后，可制备出可溶性融合蛋白GST–BlfFf，其产量约为60 mg/L。该蛋白经凝血酶去除GST标签，获得纯化的目标肽BlfFf。对BlfFf的生物活性的试验表明，经过胃蛋白酶水解后的多肽对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有抗菌活性。
[期刊] 华北农学报
[作者]
何高明 李大全 孙庆华
采用PCR-SSCP技术分别对80头健康和隐性乳房炎奶牛的IL-8受体基因、乳铁蛋白基因进行了多态性检测,并与相对应的奶牛乳汁中的体细胞数进行了相关分析,结果表明,两者都与奶牛隐性乳房炎存在关联;在IL-8受体CXCR1基因PCR-SSCP分析中,SSCP5、SSCP7在健康奶牛个体中出现程度较高,说明个体对隐性乳房炎表现较好的抗性;在乳铁蛋白基因5′调控区的不同基因型中,SSCP1对奶牛隐性乳房炎有很好的抗性。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
郑回勇 郑金贵 黄碧芳
乳铁蛋白具有抗菌、抗病毒感染和促进 Fe吸收等多种功能 .把人乳铁蛋白基因转入胡萝卜 ,为其添加新的营养保健因子 ,同时增强植株抗性 ,具有重要意义 .本试验把人乳铁蛋白基因插入 p BIN1 2 1质粒 Xba 、Sac 位点之间 ,经农杆菌介导 ,转入胡萝卜受体 ,在抗性筛选培养基上诱导形成抗性愈伤组织 ,进而经胚状体途径得到抗性苗 .经 PCR检测 ,初步确定抗性植株为转人乳铁蛋白基因植株
关键词：
胡萝卜 人乳铁蛋白 遗传转化
[期刊] 水产学报
[作者]
杨桂文 安利国 温武军 王长法
以正常生活状态下的非免疫鲤为材料，采用盐析、高速离心、柱层析等方法，从鲤胆汁与血清中分离提取了免疫球蛋白，并对它们的理化性质和免疫原性进行了比较研究。结果表明：鲤胆汁中存在的免疫球蛋白的某些理化性质同血清中免疫球蛋白的相似，并且二者具有相同的免疫原性。由此推断，鲤胆汁中免疫球蛋白的来源可能与血清中免疫球蛋白具有一定的同源性。
关键词：
鲤,免疫球蛋白,血清,胆汁
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
邹思湘 W Hurley
利用酶标板固定乳铁蛋白,用生物素标记肝素,研究 pH 和某些阳离子对乳铁蛋白与肝素结合的影响.结果表明,在100 mmol/L NaCl 时,两者结合的最适 pH 为6.0;无 NaCl 时,为6.5.Na~+和 Ca~+对于乳铁蛋白与肝素的结合有协同的效应,两者的最大结合发生在125mmol/L NaCl 和无 Ca~(2+)或低 Ca~(2+)浓度下;而在低 NaCl 浓度时,Ca~(2+)则促进两者的结合.Zn~(2+)和 Cu~(2+)对乳铁蛋白与肝素的结合有抑制,在100 mmol/L NaCl 时,800μmol/L 的 Cu~2+和900μmol/L 的 Zn~(2+)分别使结合...
关键词：
乳铁蛋白 肝素 糖胺多糖 抗菌作用
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
杨永新 王加启 卜登攀 张乐颖 李珊珊 张春林 周凌云
为分析初乳与常乳乳蛋白的表达变化,揭示乳蛋白分泌及乳腺易感疾病的机理,采用二维凝胶电泳结合液相色谱串联质谱的方法分析了产后第1天、第7天和第21天牛乳中蛋白表达变化。结果发现,相对于第7天和第21天牛乳蛋白的表达丰度,第1天牛乳蛋白中有5个蛋白表达量增加;而第7天与第21天牛乳蛋白表达无变化。且第1天牛乳蛋白表达量增加的是具有免疫活性的免疫球蛋白M和G以及运输功能的白蛋白和转铁蛋白等。结果表明由初乳向常乳转换过程中,这些乳蛋白表达量的降低可能与乳腺易感乳房炎等疾病相关。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王二先 徐旭俊 苗晋锋 陈建泉 成国祥 杨倩
选用30只100 g左右清洁级SD大鼠,雌雄各半,随机均分为3组,转基因乳组每天2次灌胃转人乳铁蛋白基因(hLF)波尔山羊乳1 mL(蛋白含量0.93 g.mL-1),普通乳组灌胃未经任何处理的普通波尔山羊乳1 mL(蛋白浓度0.93 g.mL-1),生理盐水组灌胃等量灭菌生理盐水;自由采食、饮水,连续15 d;颈部静脉采血致死,收集血清。结果显示:灌胃转hLF基因山羊乳显著提高了雌、雄大鼠的日增重,与生理盐水组相比差异极显著(P<0.01),与普通乳组相比差异显著(P0.05)。试...
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人乳铁蛋白 转基因山羊乳 大鼠 代谢
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