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[期刊] 水产学报
[作者]
张瑶 刘瀚璐 陆婷婷 颜玲 吕雪峰 王昊 王志炎 白志毅
类胡萝卜素代谢是影响三角帆蚌贝壳颜色和珍珠颜色的重要功能物质。本实验从已有的全基因组库中获得的HcSR-B1基因序列进行生物信息学分析，其开放阅读框长1 626 bp (GenBank：OR296620)，编码541个氨基酸，包括一个典型的CD36结构域及2个跨膜结构域。系统进化树及氨基酸比对分析证实，HcSR-B1基因进化较为保守，与文蛤相似性最高。以具有高、中、低类胡萝卜素代谢能力的三角帆蚌品系金蚌、紫蚌和白蚌为研究对象，实时荧光定量PCR (qRT-PCR)分析结果显示，HcSR-B1基因在肝胰腺、边缘膜、中央膜、斧足及闭壳肌中表达量均为金蚌最高、白蚌最低，且在肝胰腺及外套膜两个组织中均呈现显著性差异；原位杂交实验发现该基因在外套膜边缘均具有阳性信号，并且在外褶（OF）、中褶（MF）、中褶与内褶连接处及腹膜区（VM）中出现的阳性信号较其余部分更强；RNA干扰沉默基因表达72 h后，最佳干扰组基因表达量显著降低71.72%，该组外套膜组织总类胡萝卜素含量 (TCC) 相应降低50.5%。研究表明，HcSR-B1基因能够影响三角帆蚌类胡萝卜素的吸收转运过程，进而通过生物矿化过程影响贝壳或珍珠颜色。本研究可以深化对三角帆蚌壳色和珍珠颜色形成分子机制的理解。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李西雷 李卿青 朱庭耀 白志毅 李家乐
三角帆蚌贝壳珍珠质颜色与体内总类胡萝卜素含量(total carotenoids content,TCC)密切相关。为研究养殖中添加β-胡萝卜素对三角帆蚌总类胡萝卜素含量(TCC)及贝壳珍珠质颜色的影响,选用不同颜色选育系(紫色选育系和白色选育系)的三角帆蚌进行了为期40 d的养殖实验。通过设置4种浓度梯度(5、10、20、40 mg/L)分别进行添加实验。结果显示,随着类胡萝卜素添加量的增加,三角帆蚌肝胰腺和外套膜组织中TCC也相应增加,但不同颜色选育系三角帆蚌对类胡萝卜素的累积效果差异显著(P0.05)。白色选育系三角帆蚌各实验组贝壳珍珠质的颜色参数值之间差异均不显著(P>0.05)。综上,紫色选育系三角帆蚌体内能够富集更高含量的类胡萝卜素,而白色选育系三角帆蚌对类胡萝卜素的富集能力较弱。
关键词：
三角帆蚌 类胡萝卜素 壳色 组织 累积
[期刊] 水产学报
[作者]
颜玲 钟婧妍 袁永斌 张瑶 胡宏辉 陆婷婷 白志毅
为了阐明谷胱甘肽硫转移酶Pi类基因(HcGSTP1)在三角帆蚌类胡萝卜素转运中的作用，并探讨该基因表达与三角帆蚌壳色的相关性。本实验克隆并鉴定了三角帆蚌HcGSTP1基因，对其进行了序列特征和进化分析，通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和原位杂交(ISH)技术检测了HcGSTP1基因在三角帆蚌中的表达及定位情况，利用RNAi技术对其功能及作用机制进行了初步分析。结果显示，HcGSTP1基因的全长cDNA序列为1 317bp，其中开放阅读框(ORF)区为618 bp，编码205个氨基酸，包含一个GST-N-pi结构域和GST-C-Pi结构域。qRT-PCR结果显示，HcGSTP1基因在紫蚌肝胰腺和斧足中表达量极显著高于白蚌，且在紫蚌边缘膜和中央膜中表达量显著高于白蚌。原位杂交结果显示，HcGSTP1基因在外套膜的外褶、背膜区、腹膜区、部分中褶以及外褶与中褶连接处出现明显的阳性信号。RNAi技术结果显示，HcGSTP1基因在边缘膜中表达的干扰率达83.74%，同时发现边缘膜中总类胡萝卜素含量(TCC)降低了30.12%。上述实验结果初步证实HcGSTP1基因参与三角帆蚌类胡萝卜素的转运，进而可能会影响贝壳及珍珠呈色，为深入理解三角帆蚌类胡萝卜素转运及贝壳和珍珠颜色形成机制补充了分子依据。
[期刊] 林业科学
[作者]
孙化雨 陈颖 赵韩生 董丽莉 王丽丽 娄永峰 高志民
【目的】β-胡萝卜素羟化酶(BCH)是催化β-胡萝卜素经中间产物β-隐黄素合成玉米黄质的关键酶,玉米黄质在植物光保护过程中发挥着重要作用。通过研究毛竹β-胡萝卜素羟化酶基因(Pe BCH)的结构特点、表达特征和功能,为揭示强光胁迫条件下PeBCH在竹子光保护中的作用提供证据,为培育抵抗强光胁迫的植物新品种提供新的基因资源。【方法】以毛竹为对象,通过同源克隆的方法分离PeBCH,利用生物信息学软件分析其结构特点,采用实时荧光定量PCR技术分析基因的组织表达特性,构建PeBCH基因的过量表达载体,并在拟南芥中异位表达,通过对转基因拟南芥植株的表型和生理变化来鉴定PeBCH基因的功能。【结果】从毛竹...
[期刊] 水产学报
[作者]
杨宁 周素明 王国良 刘顺 李猛
B型清道夫受体是清道夫受体超家族成员,可识别多种配体,在机体脂类转运及免疫防御过程中发挥重要作用。为深入研究三疣梭子蟹B型清道夫受体(Pt-SRB)的功能,本实验在前期工作基础上构建了Pt-SRB胞外结构域原核表达载体,并成功获得了重组蛋白rPt-SRB。利用亲和层析方法获得纯化的rPt-SRB,并将纯化rPt-SRB蛋白免疫大鼠获得抗rPt-SRB重组蛋白免疫抗血清以用于后续研究。SDS-PAGE检测发现,体外诱导表达重组rPt-SRB以包涵体的形式出现在大肠杆菌BL21裂解液的沉淀中,分子量大小约为4
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
刘佳敏 李文娟 施志仪 曹玉香 陆阿利
珍珠贝细胞体外培养存在细胞分裂迟缓问题，目前调控机制尚不清楚，制约了珍珠培育新工艺的发展。本研究通过现代分子生物学技术，从三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)中克隆了细胞周期蛋白B（cyclin B）基因的cDNA，得到长度为1024 bp的序列信息，包括768 bp的ORF，197 bp的3’-UTR，编码255个Aa。进一步分析表明，三角帆蚌cyclin B基因与牡蛎、扇贝具有较高的相似性，其氨基酸序列中具有一个典型的周期蛋白框（cyclin-box），并存在2个周期蛋白依赖性蛋白激酶（CDK）的作用位点。通过RT-Q PCR研究显示，三角帆蚌cyclin B基因在性腺中的表达最高，且cyclin B基因在雌性中的表达量显著高于雄性（P0.05）；沉默cyclin B基因后，除外套膜，其在性腺和鳃的表达显著降低（P
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
韩雅珊
β-胡萝卜素和类胡萝卡素广泛存在自然界中。作为维生素A的前体，可提高人体的免疫能力，也是一种抗氧化剂，可淬灭与清除机体内产生的自由基。重要的是β-胡萝卜素和类胡萝卜素能预防癌症和减缓癌症的发展，细胞缝间联结的理论支持了类胡萝卜素的具有这一效果的看法，但是根据人群调查也出现类胡萝卜素具有负结果的报道。本文就类胡萝卜素的营养功能的研究现状作一概要综述。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
陈慧聪 王茜 薛毓才 王伟隆 黄旭雄
为探究β-胡萝卜素强化对卤虫体内类胡萝卜素组成和含量的影响，以渤海湾卤虫（Artemia）为研究对象，设置5个β-胡萝卜素强化剂梯度（1、3、5、7、9mg·L~(-1)），并设1个无添加对照组，分别比较卤虫无节幼体和成虫在强化后体内类胡萝卜素组成和含量的变化。结果表明，强化后的卤虫体内检测到β-胡萝卜素、角黄素和海胆酮3种类胡萝卜素。营养强化后，卤虫无节幼体和成虫体内β-胡萝卜素含量随着强化剂量增大显著上升（P<0.05）；无节幼体海胆酮和成虫体内角黄素含量变化大致上与β-胡萝卜素强化梯度表现出显著相关性（P<0.05）。饥饿12h后，β-胡萝卜素下降显著，但强化组β-胡萝卜素沉积量依然显著高于对照组（P<0.05），表现出良好的富集效果。因此，通过营养强化的卤虫，不仅可以作为外源类胡萝卜素的生物载体，还可以利用其体内代谢转化为养殖苗种提供多级类胡萝卜素营养。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
曹慕莲 霍滢朵 刘宗雨 缪煜琳 金鑫 汪桂玲
性类固醇激素与生物生殖、配子排放以及性腺发育密切相关，Srd5a1在性类固醇激素合成过程中扮演重要角色。为了探究性类固醇激素合成相关酶基因Srd5a1对雌性三角帆蚌卵巢发育的影响，本实验应用RACE克隆得到了三角帆蚌Srd5a1全长cDNA序列，通过实时荧光定量（qRT-PCR）、原位杂交技术以及不同浓度17β-雌二醇（E2）和17α-甲基睾酮（MT）激素处理来探究Srd5a1的表达特性。结果显示，Srd5a1 cDNA全长2224 bp，包括446 bp 5′-UTR，953 bp 3′-UTR，825 bp ORF，编码274个氨基酸。Srd5a1在性腺中的表达呈二态性，在卵巢中表达量更高；Srd5a1在卵巢排放期的表达量最高，极显著高于其他各时期（P＜0.01）。原位杂交结果显示，Srd5a1在卵巢卵母细胞、卵泡以及精巢精母细胞中有表达。不同浓度E2和MT处理24天后，Srd5a1的表达发生了变化。综上，Srd5a1可能在雌性三角帆蚌卵巢卵母细胞发育成熟和配子排放中发挥一定作用，对探索三角帆蚌性腺生长发育具有重要意义，同时为实现三角帆蚌单性化养殖提供理论参考价值。
[期刊] 华中农业大学学报(自然科学版)
[作者]
曾旭梅 席婉 朱琳琳 袁金梅 熊康舜 王彩云 郑日如
类胡萝卜素是园艺植物中广泛存在的次生代谢物和色素物质,在植物生长发育和观赏价值中发挥重要作用。同时它也是高价值的天然活性物质,对人体健康有益。因此,类胡萝卜素的代谢调控一直是园艺植物的研究热点。类胡萝卜素组分和含量的差异是造成园艺植物色泽和营养成分多样性的重要原因之一,解析优质性状形成的分子机制是进行定向改良的前提和基础。目前,植物类胡萝卜素代谢途径已明确,大量研究表明代谢通路上基因的启动子和编码区变异是造成类胡萝卜素代谢多样性的关键因素之一。本文对园艺植物类胡萝卜素变异遗传机制的研究策略、启动子和编码区的变异类型及变异对类胡萝卜素代谢的影响进行综述,为园艺植物类胡萝卜素的定向改良提供理论依据。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
贺晓燕 龚义勤 徐良 赖德强 温天彩 柳李旺
运用PCR和RT-PCR技术从萝卜中克隆出RsIRT1基因,其cDNA包含一个长度为1 038 bp的开放阅读框,编码345个氨基酸,蛋白质相对分子质量为36.37×103。TMHMM Server v2.0分析RsIRT1蛋白有8个跨膜结构域,推测为一种膜蛋白;蛋白序列同源分析表明,萝卜RsIRT1(AFJ05595)与拟南芥AtIRT1(XP-002869968)、遏蓝菜TcIRT1-P(CAL25151)的遗传距离最近。半定量RT-PCR表达分析表明,正常铁营养时RsIRT1基因在萝卜花瓣、花蕾、叶片和根中均不表达,缺铁胁迫及缺铁加镉(100 mg·L-1)胁迫下表达,且缺铁加镉胁迫下,...
关键词：
萝卜 IRT1基因 镉 表达分析
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
董姝君 汪桂玲 白志毅 李家乐
以三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)为研究材料,根据实验室构建的三角帆蚌cDNA文库中已标注的EST序列,利用RACE克隆了三角帆蚌AMP基因的cDNA全序列。该cDNA序列全长为970 bp,5′端非翻译区123 bp,3′端非翻译区526 bp,开放阅读框(ORF)长为300 bp,共编码99个氨基酸,包含一段由27个氨基酸组成的信号肽和72个氨基酸的成熟肽,分子量为10 924.7 u。氨基酸序列分析表明,该序列存在明显的跨膜结构和疏水区。同源性分析表明,该基因编码的蛋白与海兔(Aplysia californica)theromacin氨基酸序列的相似度最高为56%,而与...
关键词：
三角帆蚌 AMP基因 RACE 分子特征
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
刘清 周光宏
选用两种有代表性的类胡萝卜素（β－胡萝卜素和黄体素）分别用蛋鸡、山羊的离体小肠细胞进行体外吸收实验。结果表明：β－胡萝卜素和黄体素的吸收均呈浓度依赖性，且β－胡萝卜素吸收率保持稳定（Ｐ＞０．０５）；培养温度对蛋鸡离体小肠粘膜细胞类胡萝卜素吸收无显著影响，而极显著地影响了山羊对黄体素和高浓度（≥１５μｍｏｌ／Ｌ）β－胡萝卜素的吸收；Ｔｗｅｅｎ２０对两种类胡萝卜素均有抑制作用，其中对黄体素抑制作用较大；体积分数（φ）为０．３％的Ｔｗｅｅｎ２０可能阻断了β－胡萝卜素转化为维生素Ａ；０．５ｍｏｌ／Ｌ的根皮素抑制了β－胡萝卜素的吸收而对黄体素吸收起促进作用（Ｐ＜０．０１）。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈银岳 孙叶 霍永久 占今舜 刘明美 詹康 赵国琦
以蛹虫草中类胡萝卜素的提取得率为考察指标,分别运用酸热提取法、超声提取法、酸热超声提取法、微波提取法、酸热微波提取法、丙酮提取法提取类胡萝卜素,比较6种方法的提取得率,得出酸热超声提取法是较好的提取方法。采用酸热超声提取法,设盐酸浓度、酸浸时间、沸水浴时间、超声功率、超声温度和超声时间等6个单因素试验,结合L27(313)正交试验设计,优化提取工艺参数。得出酸热超声提取法最优提取条件为盐酸浓度2.25 mol/L,酸浸时间30 min,沸水浴时间6 min,超声功率400 W,超声温度25℃,超声时间25 min,类胡萝卜素提取得率可达1 134.88μg/g;影响提取得率大小的因素依次为超声...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王海滨 任丹丹 张民 吕伟 杜鹃 张声华
采用有机溶剂提取类胡萝卜素 ,对冻干菹草类胡萝卜素的浸提条件进行了研究 ,得到的最佳参数是 :浸提液为石油醚 -丙酮 (1∶3,v/v)混合溶剂 ,料液比为 90mL/ g ,在常温下分 3次浸提 ,总浸提时间为 1.5h。在此条件下冻干菹草粉中总类胡萝卜素的提取率为 95 .5 %。
关键词：
菹草 类胡萝卜素 提取
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