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[期刊] 水产学报
[作者]
雷存科 陈中元 张奇亚
利用３个不同物种的水生动物细胞系，包括爪蟾肾细胞系（Ａ６）、大鲵胸腺细胞系（ＧＳＴＣ）和鲤上皮瘤细胞系（ＥＰＣ），分别用沼泽绿牛蛙蛙病毒（ＲＧＶ）和大鲵蛙病毒（ＡＤＲＶ）感染，进一步研究细胞病变显微形态、病毒滴度、细胞病变与不同感染时间的相关性等。结果显示，在光镜下可见感染病毒的细胞发生病变，Ａ６和ＥＰＣ细胞肿胀或破裂；ＧＳＴＣ细胞收缩或聚在一起形成多层。同种水产动物细胞系对不同蛙病毒的敏感性不同，在Ａ６、ＥＰＣ和ＧＳＴＣ细胞中，ＲＧＶ的滴度分别为１０～（３．６）、１０～（５．９）和１０～（６．６） ＴＣＩＤ＿（５０）／ｍ Ｌ；ＡＤＲＶ的滴度分别为１０～（４．３）、１０～（５．４）和１０～（６．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
刘荭 王侃 彭锦新 罗新安 赵俊和 张小清
测定了碘伏消毒液对三种感染水生动物的病毒的杀灭作用和一些因素对碘伏消毒液消毒效果的影响。结果显示，含有效碘浓度为５ｍｇ／ｌ的消毒液室温下处理５分钟，可灭活滴度为１０７５ＴＣＩＤ５０／ｍｌ的草鱼呼肠孤病毒和１０７０ＴＣＩＤ５０／ｍｌ的病毒性出血败血症病毒；含有效碘浓度为５０ｍｇ／ｌ的消毒液可灭活滴度为１０５７５ＴＣＩＤ５０／ｍｌ的甲鱼虹彩病毒。细胞培养液中的有机成分对碘伏消毒液中有效碘浓度有较大的影响；酸碱度６～９之间，碘伏消毒液中有效碘浓度没有明显变化。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
罗晓雯 曾令兵 江南 艾桃山 范玉顶 李波 谢德兵 孟彦 周勇
鱼类细胞是开展鱼类病毒分离鉴定、功能基因分析以及生物制品制备等研究的重要物质基础。鳜(Siniperca chuatsi)是深受养殖者和消费者欢迎的养殖品种。随着鳜鱼养殖产量的逐年增加，其病害问题尤其是病毒病问题也日趋严重，但是，可用于鳜鱼病毒分离和基因功能分析的鳜细胞系缺乏。本研究采用组织块消化法，对来源鳜脑组织的细胞进行原代培养，建立了鳜脑组织细胞系，命名为MFB。MFB细胞在28℃含10%胎牛血清的L-15中已稳定传代超过70次，第25代鳜脑组织细胞的染色体众数为56。采用免疫荧光细胞化学技术(β-tubulin和Neu-N)鉴定MFB细胞的神经元纯度，结果显示，培养的MFB细胞为神经元类细胞。病毒敏感性实验结果显示，鳜蛙虹彩(MFRaIV)、大口黑鲈蛙虹彩(LMBRaIV)和大鲵虹彩病毒(GSIV)均可在MFB细胞中产生典型细胞病变效应，病毒滴度分别为10~(8.68±0.12)、10~(8.36±0.15)、10~(10.15±1.85) TCID_(50)/mL。使用脂质体Lipofectamine~(?)2000将pEGFP-N1转入MFB细胞，转染效率可达20%。本研究建立的鳜脑组织细胞系不仅对多种蛙虹彩病毒敏感，而且转染质粒效率较高，为鳜病毒性病原的分离及基因功能研究奠定了前期基础。
[期刊] 华北农学报
[作者]
潘李珍 樊玉珍 李根
Aa-778单层细胞接种BTV-17后,于第三天出现细胞集聚,进而融合,脱落。细胞病变在第四天达高潮,第六天后,由于抗感染细胞繁殖逐渐覆盖单层空洞而恢复原样。用荧光抗体技术观察到Aa-778病变细胞中BTV-17包涵体和病毒抗原堆积物。TCID_(50)测定,初步表明第一代细胞病毒不仅能在Aa-778细胞中繁殖传代,而且它的毒力类似于在BHK_(21)细胞中的毒力。
关键词：
细胞系 蓝舌病病毒 敏感性 白纹伊蚊
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
王津津 刘莹 于力 贾鹏 陈兵 史秀杰 郑晓聪 兰文升 何俊强 刘荭
草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎ ｉｄｅｌｌｕｓ）性腺细胞系（ｇＣｏ）是中国科学院水生生物研究所在２０世纪７０年代开展草鱼出血病研究时建立的一株细胞系，迄今已传至３００多代，在中国鱼类病毒学研究领域发挥了重要作用。本研究采用形态学观察、细胞生长曲线测定、细胞周期测定、细胞核型分析、细胞凋亡检测、电镜观察等方法，对ｇＣｏ的生长特性及鲤春病毒血症病毒（ｓＶＣＶ）在该细胞中的增殖特性等进行了研究。结果显示，ｇＣｏ细胞的最适生长温度为２５℃，在Ｍ１９９和ＭｅＭ等细胞培养液中均能较好地生长，培养液中最适的胎牛血清浓度为１０％。测定了ｇＣｏ细胞系对ｓＶＣＶ病毒的敏感性，发现与鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓ Ｃ．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
方兵 李槿年 祖国掌 余为一
粘附素(aha1)、气溶素(aerA)和细胞兴奋性肠毒素(alt)是气单胞菌的主要毒力因子。根据aha1、aerA和alt基因序列设计三对引物建立了可同时检测三种毒力基因的多重PCR方法(MPCR)。该方法扩增出气单胞菌的aha1大小为1087bp,aerA为721bp,alt为480bp,其敏感度为102CFU·mL-1。而对金黄色葡萄球菌、恶臭假单胞菌、拟态弧菌以及非致病性气单胞菌均未扩增出任何条带。用限制性内切酶EcoRⅤ、BamHⅠ和FbaⅠ分别酶切PCR扩增产物,均获得与预期一致的酶切图谱。用建立的MPCR对15株水生动物源气单胞菌安徽分离株进行毒力基因检测,结果显示在13株致病性气...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
王建国 陆宏达
采用急性毒性实验方法测试了硫酸锌对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)仔蟹、克氏原螯虾(Procambarus clar-kii)幼虾、异育银鲫(Carassius auratus gibelio♀×Cyprinus carpiovar.singuonensis♂)幼鱼及田螺(CipangopaludinachinensisGray)4种常见淡水经济养殖动物的半致死浓度(LC50)及安全浓度。结果显示:中华绒螯蟹仔蟹24、48、72、96 h LC50(Zn2+)分别为18.39、11.10、7.63、5.84 mg/L;克氏原螯虾幼虾分别为84.48、16.50、4.78、2....
[期刊] 海洋渔业
[作者]
蒋闰兰 肖佰财 禹娜 陈立侨
多环芳烃(PAHs)是广泛存在于水体环境中的一类持久性有机污染物,因其具有致癌、致畸和致突变性而备受关注。本文简述了PAHs的定义、分类、来源及其污染现状,并综述了PAHs在水生生物体内蓄积、代谢规律及其对水生生物的毒性效应:在急性毒性层面综述了PAHs对不同水生动物的毒性程度及急性致死效应;在亚急性及慢性毒性层面分别从分子水平、生理生化酶水平、细胞组织水平,综述了:PAHs暴露对水生生物的分子毒性,导致DNA单链断裂、PAHs-DNA加合物的形成;PAHs暴露对水生生物抗氧化酶系统(SOD、CAT、GPx、GSH/GSSG)、外源性有机污染物代谢酶(EROD、GST)活力的影响;PAHs暴露...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
冯书营 黄倢 张士璀
通过差速离心法提取桡足类组织细胞膜,依照本实验室确立的细胞膜与WSSV特异性的结合关系,进行了桡足类细胞膜与白斑综合症病毒(WSSV)结合实验。结果表明,桡足类细胞膜与WSSV之间存在着特异性的结合,二者的结合说明了桡足类细胞膜上存在有WSSV的受体蛋白,其为确定桡足类属于WSSV感染宿主提供了重要证据。同时,比较了凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)鳃细胞膜对桡足类细胞膜与WSSV结合的影响作用,证实了凡纳滨对虾鳃细胞膜对二者的结合具有明显的封闭作用,侧面说明了WSSV在二者细胞膜上存在有相同的受体蛋白或结合位点。桡足类细胞膜经表面活性剂TritonX100处理后,与WSSV...
关键词：
桡足类 细胞膜 WSSV 结合研究
[期刊] 西南农业学报
[作者]
郑永华 赵杨 汪官余
以鲫鱼 （ Ｃａｒａｓｓｉｕｓａｕｒａｔｕｓ）、泥鳅 （ Ｍｉｓｇｕｒｎｕｓａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓ）、大型蚤（ Ｄａｐｈｉｎｉａｍ ａｇｎａ）、田螺 （ Ｖｉｖｉｐａｒｕｓｃｈｅｎｇｔｅｈｅｎｓｉｓ） 等水生动物材料， 在２０℃条件下应用换液的方法进行了灭扫利的急性毒性试验， 同时对鲫鱼进行亚急性暴露， 研究农药灭扫利对鱼体器官的损伤作用。试验结果： ①对鲫鱼４８ｈ 的半致死浓度（ Ｌ Ｃ５０） 为００１１ｍ ｇ／ Ｌ， 泥鳅的 Ｌ Ｃ５０为０１１２ｍ ｇ／ Ｌ、田螺的 Ｌ Ｃ５０为２３１ｍ ｇ／ Ｌ， 对大型蚤２４ｈ 的 Ｅ Ｃ５０为０２０ｍ ｇ／ Ｌ。②在亚急性暴露中，大...
关键词：
鲫鱼 水生动物 灭扫利农药 毒性 肝脏
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
冯亚萍 孔杰 罗坤 栾生 曹宝祥 刘宁 卢霞 曹家旺 王明珠 王军 孟宪红
[期刊] 水产学报
[作者]
赵柳兰 杨筱珍 范朋 杨丽丽 张金彪 梁攀 洪宇航 成永旭
实验采用Giemsa与Wright’s两种染色方法对黑褐新糠虾血细胞进行染色,根据血细胞大小,所含颗粒与否,颗粒多少和核质比将其分型,并对各型血细胞所占比例进行统计。结果表明,通过比较Giemsa染色与Wright’s染色两种方法的染色时间和效果,Wright’s染色更加适合糠虾血细胞。通过染色,将黑褐新糠虾血细胞分为3种类型,它们分别为透明细胞、半颗粒细胞和颗粒细胞。它们的胞体大小依次增大,核质比依次降低。对此3种类型血细胞比例分别统计后发现,颗粒细胞所占比例最多约(48.38%±0.05%),其次是半颗粒细胞约为(35.22%±0.04%),最少的为透明细胞约为(16.40%±0.01%)...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨凤美 王飞 张雯 酒立君 罗静 吴楠 吴恒
【目的】建立葡萄风信子体细胞胚再生体系,通过外部形态判断愈伤组织的类型,并探索胚性愈伤组织对头孢霉素和潮霉素的敏感性。【方法】以多年生葡萄风信子‘蓝穗’的盛花期叶片为试验材料,通过正交试验筛选胚性愈伤组织诱导时适宜的植物生长调节剂质量浓度及配比;石蜡切片法观察不同愈伤组织内部的细胞结构,诱导具有胚性的愈伤组织形成体细胞胚,进而获得再生植株;在培养基中加入头孢霉素或潮霉素,观察2种抗生素对胚性愈伤组织生长和体细胞胚发生的影响。【结果】葡萄风信子胚性愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+0.5mg/L 2,4-D+0.1mg/L TDZ,在该培养基上诱导率高达100%。石蜡切片观察发现,外观质地紧密、节...
[期刊] 华北农学报
[作者]
张成玲 赵永强 徐振 杨冬静 孙厚俊 谢逸萍
为有针对性地开展病害防治和育种工作,利用菌丝生长抑制法测定了己唑醇等7种杀菌剂对3株镰刀菌的抑菌毒力。结果表明,枯草芽孢杆菌对3株镰刀菌的抑菌活性最强,EC50最大为0.002 3μg/mL;世苗和己唑醇对12Z-1和12Z-2 2种病菌具有较好的菌丝生长抑制活性,EC50为0.002 5~0.86μg/mL,EC90为11.01~46.48μg/mL,但对12Z-3的抑制活性较低,EC50分别为1.54,12.36μg/mL,EC90分别为1 893.29,1 101.14μg/mL;利用针刺法接种不同甘薯品种,结果表明,烟薯25对12Z-1和12Z-2具有较好的抗耐性,其次分别为栗子香和徐...
关键词：
镰刀菌 甘薯 药剂 致病性
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