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[期刊] 实验技术与管理
[作者]
颜菲 孙金平 刘爱丽 刘迢迢 张美玲
为定向获得某种特定的、遗传特性稳定的营养缺陷型菌株,解决产紫杉醇真菌PM6基因改造过程中遗传筛选标记不足的问题,通过基因敲除技术建立高效构建特定营养缺陷型菌株的方法,并将该方法经过简化,作为综合实验"基因敲除法构建产紫杉醇真菌营养缺陷型菌株"应用于本科生实验教学。以构建产紫杉醇真菌腺嘌呤营养缺陷型菌株为例,通过基因同源重组方法定向敲除PM6菌株腺嘌呤合成途径关键基因ADE,利用分子生物学方法和菌落形态分析筛选鉴定缺陷型突变株。通过构建营养缺陷型菌株,为丝状真菌的转化提供了新的筛选标记。使学生系统地了解和掌握了基因定向敲除技术,提高了本科生综合实践能力和科研素养,取得了良好的教学成果。
[期刊] 林业科学
[作者]
程广有 唐晓杰 刘景威 梁春祥
东北红豆杉优良种源紫杉醇含量高(60.5μg·g-1),比其他种源的紫杉醇含量高出1.5～3倍,生长量与其它种源相同。可以通过播种或扦插方法繁殖。播种前积种需要层积处理,变温层子可以缩短休眠期。扦插繁殖用休眠枝或绿枝。苗期主要管理措施是遮荫、保湿、防寒、防干热风。林下造林成活率较高,生长良好。东北红豆杉优良种源适宜在东北地区空气湿润、pH值小于7.0的沙壤土种植。
关键词：
东北红豆杉 良种 选育
[期刊] 林业科学研究
[作者]
罗凡 费学谦 汤富彬 李辛雷
1963年美国化学家M.C.Wani和M.E.Wall首次从一种生长在美国西部森林中称为太平洋紫杉(Pacific yew)的树皮和木材中分离到了紫杉醇粗提物。筛选实验发现,紫杉醇粗提物对离体培养的鼠肿瘤细胞有很高的活性。1971年,他们同其他科学家合作,通过X-射线分析确定了该活性成分的
关键词：
高效液相色谱-质谱 紫杉醇 毛榛
[期刊] 林业科学研究
[作者]
苏建荣 张志钧 邓疆
系统采集了10个龄级和12个地理种源的云南红豆杉样品,用高效液相色谱(HPLC)测定树皮、3年生小枝和当年生叶的紫杉醇含量,其平均值分别为0.0048%、0.0040%和0.0151%,3年生枝和叶的紫杉醇含量相近,差异不显著。树皮的紫杉醇含量与年龄存在回归关系:Y=0.0316×e0.0067x;3年生小枝和当年生叶的紫杉醇含量与树龄不相关,但树龄小于72a时其含量随树龄增加而递增,树龄超过72a和114a后,3年生小枝和当年生叶的紫杉醇含量逐渐减少。12个云南红豆杉地理种源中,新平、宁蒗和泸水种源当年生叶的紫杉醇含量最高,在0.0077%～0.0098%间;兰坪、宁蒗和新平种源3年生小枝紫...
关键词：
云南红豆杉 紫杉醇 含量 树龄 地理种源
[期刊] 林业科学研究
[作者]
周志春 余能健
选择不同年龄、不同生长季节的南方红豆杉人工栽培幼树及通过不同海拔地和不同施肥措施的栽培试验,研究不同采收年龄、器官、部位和季节及不同栽培措施对南方红豆杉短周期药用林紫杉醇含量的影响。研究结果表明:南方红豆杉不同年龄幼树及其不同器官和部位的紫杉醇含量差异很大。1、2年生幼树枝叶紫杉醇含量明显高于3~4年生幼树;在不同器官中,根皮紫杉醇含量最高,树皮和枝条皮部次之,叶片和树干木质部含量最低;在树冠不同部位中,以上部枝叶的紫杉醇含量最高,中部次之,下部最低。在一年中,以气候条件适宜的5月及秋冬季的1月与9—12月时的枝叶紫杉醇含量较高,而在气温高、光照辐射强的7—8月幼树枝叶紫杉醇含量低;考虑到截干...
[期刊] 世界农业
[作者]
杨海霞 朱祥瑞 陆洪省
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
臧新 梅兴国 周忠强 常俊丽
红豆杉细胞培养生产紫杉醇,是一种潜在的大规模生产紫杉醇的重要途径,然而和其它植物细胞培养一样,红豆杉细胞的紫杉醇含量较低等问题,限制着该技术的产业化进程。寻找提高和稳定紫杉醇产量的方法,是目前需要解决的主要问题。筛选合适的生物或非生物诱导子(如真菌培养物、茉莉酸甲酯、水杨酸、Cu2+、Ce4+、Ag+),提高细胞的紫杉醇产量,成为国内外研究的热点。
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
付顺华 史小娟 苗国丽 徐志明 张新凤 何照斌 斯金平 杜红亮
从国内8个不同产地采集曼地亚红豆杉Taxus media枝条和林下土壤,利用高效液相色谱(HPLC)法测定了紫杉醇(taxol)和10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetylbaccatin,10-DAB)质量分数,用常规方法测定了土壤的矿质元素及肥力结构等。结果表明:不同产地的曼地亚红豆杉紫杉醇和10-DAB质量分数差异很大,紫杉醇有随北纬纬度增高而递减的趋势;紫杉醇和10-DAB与多数土壤因子相关性不显著,其中:紫杉醇与有机质呈显著正相关,与北纬纬度呈显著负相关,10-DAB与土壤矿质元素钴和锰质量分数呈显著负相关;紫杉醇与10-DAB之间不存在相关性(r=-0.197);用多元逐步回归...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李云 梁庆丰 曹孜义
该文从培养基组成、培养条件、培养基中不同添加物对红豆杉细胞培养和细胞中紫杉醇产量的影响 ,以及在提高紫杉醇产量中有关酶代谢调节、细胞株系选择和培养方法的改进等方面 ,着重介绍了近几年来的研究成果 .同时在毛状根培养、冠瘿瘤组织培养、水培根培养和瘤培养等培养材料的扩展方面 ,对国内外所作的尝试性研究和新的报道进行了综述 .国内外学者围绕红豆杉体外培养方法优化、提高紫杉醇产量等问题进行了许多尝试和深入细致的研究工作 ,取得了令人瞩目的进展 ,为利用红豆杉体外培养进行紫杉醇商业化生产提供了可能
关键词：
红豆杉 紫杉醇 细胞工程
[期刊] 长江流域资源与环境
[作者]
吴彦 刘庆 胡科 许维宏
红豆杉资源匮乏是制约我国紫杉醇产业化发展的关键问题。野生资源的合理利用、红豆杉的人工种植和细胞培养技术是目前主要的解决途径。在分析我国红豆杉植物的野生资源的分布和资源蕴藏量、总结我国红豆杉人工扦插技术研究的主要成果和综述了国内红豆杉细胞培养的研究进展的基础上,通过对上述主要资源提供途径的现状和可操作性的比较分析,明确指出大规模、规范化人工种植红豆杉是当前解决红豆杉产业化过程中的资源匮乏的主要途径;建议在切实保护野生红豆杉资源的同时,有计划地合理利用野生红豆杉植株的小枝和针叶。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
肖颖 赵冬 王刚
【目的】研究紫杉烯合成酶超表达对紫杉醇代谢的影响,以提高红豆杉属植物细胞中紫杉醇的含量。【方法】从南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)愈伤组织提取总RNA,根据已发表的中国红豆杉紫杉烯合成酶cDNA序列设计两对引物,通过RT-PCR技术扩增出该酶5′端长度为1 201 bp和3′端长度为1 388 bp的两个cDNA片段,将其克隆到pGEM-T Vector上并转化到E.coli DH5α中,5′端片段经XbaⅠ和BglⅡ双酶切鉴定,3′端片段经BglⅡ和SacⅠ双酶切鉴定后,对阳性克隆进行序列测定。两片段与双元载体pCAMBIA1300-35S::GUS以T4 ...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
何冬云 杨芳 石岭 刘同祥 张宗申
为了利用植物生长调节剂组合促进东北矮紫杉愈伤组织生长和紫杉醇的积累,以东北矮紫杉幼茎为材料诱导愈伤组织,分析不同种类和水平植物生长调节剂条件下愈伤组织的增殖速度和紫杉醇含量。结果表明,东北矮紫杉愈伤组织在24 d的培养过程中基本呈"S"型;细胞生长对数期,紫杉醇积累下降或上升缓慢,进入生长稳定期,紫杉醇的含量达到最高值。适宜浓度的2,4-D和NAA均能促进东北矮紫杉细胞的生长,以1.5 mg/L 2,4-D组合最有利于东北矮紫杉愈伤组织的增值;6-BA组合有利于紫杉醇积累,其平均含量在100μg.g-1之上。因此,利用植物生长调节剂促进东北矮紫杉愈伤组织生长及紫杉醇的积累是可行的。
关键词：
东北矮紫杉 愈伤组织 紫杉醇 激素
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
陈灵 罗先权 饶红欣 彭静 彭信海
以紫科1号红豆杉为材料,对其不同年份的生长量、生物量和紫杉醇含量进行观测和检测。结果表明:结果分析得出存在显著差异,其中5年生紫科1号红豆杉无论是生长量、生物量还是紫杉醇含量都具有明显优势;生长量方面其株高平均122.37 cm,分支数与6、7年生苗没明显差异,地径虽不是最大,与6年生苗相比没有差异;生物量达3.35 kg;根与枝叶紫杉醇含量没明显差异,紫杉醇含量都较高平均0.005 2%。确定了紫科1号红豆杉采收的最佳时间和部位:5年生枝叶。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
常醉 周志强 夏春梅 刘彤
为研究天然东北红豆杉枝中紫杉醇和三尖杉宁碱的积累特点,系统采集了不同年龄、不同性别、不同营养时期和不同坡向的天然东北红豆杉枝样品,利用反相高效液相色谱对当年生、2年生和多年生枝中紫杉醇及三尖杉宁碱含量进行测定分析。结果表明:1)随树龄增加枝中的紫杉醇含量呈先上升后下降的趋势,而三尖杉宁碱含量随树龄增加而降低;2)雌株和雄株枝中两种紫杉烷类物质含量只在较大径级(>60cm)时有明显差异,即雌株中含量低于雄株,而在<60cm径级范围内,雌株和雄株间两种物质含量没有显著差异;3)随着营养时期的变化,从4月到10月,枝中两种紫杉烷类物质的含量整体呈先上升后下降并趋于稳定的变化趋势,其中紫杉醇含量在8、...
关键词：
东北红豆杉枝 紫杉醇 三尖杉宁碱
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
冯斌 汪懋华
利用计算机视觉技术识别水果表面缺陷 ,提出了分割缺陷和识别缺陷的新方法。该方法考虑了水果的形状特点 ,使不同灰度级的缺陷一次分割成功。在识别过程中利用水果的三维空间特征 ,实现了缺陷与果梗、花萼的区分。试验结果表明 ,该方法检测速度快 ,正确率高 ,能够满足计算机视觉进行在线检测的要求
关键词：
计算机视觉 分割 缺陷
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