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[期刊] 华北农学报  [作者] 符秀梅  韩淑梅  朱红林  周秀  李小靖  吴辉  谢俊  陈银华  
红树作为一种重要的耐盐植物,为耐盐研究提供了重要的基因资源。本研究分别采用SDS、TR IZOL、CTAB等3种不同的方法进行了红树RNA提取,经电泳分析、紫外吸收检测、cDNA合成等技术手段检测表明,改进的CTAB法所提取的红树总RNA质量最好。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 丁勇  刘英  杨鸯鸯  甘莉  
设计了1种从油菜种子中分离高质量总RNA的方法,有效的排除了种子中富含的多酚、多糖和蛋白质等杂质的污染。分离的总RNA经甲醛变性凝胶电泳和紫外光检测,可见28S和18S rRNA的2条清晰的带型,完整无降解,其A260/A280在1.8~2.0之间。研究结果证明,利用本方法提取的油菜种子总RNA具有很高的质量和纯度,且得率高,完全能满足后续的RT-PCR、全长基因的克隆和Northern blotting分析等分子生物学研究。
[期刊] 华北农学报  [作者] 郭陈刚  李顺国  魏志敏  夏雪岩  
为了从转录组水平研究黄伞菌的抗肿瘤等药用价值,需要提取分离得到高纯度、高质量的黄伞菌RNA样品。利用液氮研磨TRIzol一步法提取黄伞菌总RNA,并且对经过和未经液氮研磨的黄伞菌RNA提取产物进行了质量检测和统计对比分析。检测结果显示,经液氮研磨样品RNA浓度远远高于未经研磨样品,oD260/280都约等于2,说明其纯度很高。同时,3个重复样品25S和18S亚基条带荧光强度比值分别为1.8,1.9,1.9,接近于2,证明RNA完整性较好,AgIleNT 2100的RIN值检测结果分别为9.1,8.7,9.3,均远大于6.8标准,进一步佐证了其完整性。所以,液氮研磨TRIzol一步法是非常适用于...
[期刊] 华北农学报  [作者] 刘芬  于秀梅  刘大群  
为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiquitin的表达情况进行分析。扩增结果表明,选定的各持家基因在叶锈菌侵染不同时间的小麦叶片中的表达量并不一致,且各基因在小麦叶片中的丰度也存在差异。通过对几种基因的扩增,进一步证实该方法能够满足一般分子生物学下游操作的要求,是一种理想的植物总RNA提取方法。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 李佳  沈斌章  韩继祥  甘莉  
一种有效提取油菜叶片总DNA的方法李佳,沈斌章,韩继祥,甘莉(华中农业大学中心实验室武汉430070;华中农业大学农学系武汉430070)关键词DNA,提取方法,试剂,国产,油菜AEFFECTIVEPROCEDUREFOREXTRACTINGTOTA...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 徐坤  李铎  张优优  李陇平  麻丽霞  张智英  
【目的】尝试自制一种价格低廉的RNA分离试剂,并检验其应用效果。【方法】以商业化的TRizolReagent为对照,使用自制RNA分离试剂提取草鱼皮肤组织总RNA,采用分光光度计法、变性琼脂糖凝胶电泳法和RT-PCR检测其品质,并用提取的总RNA合成草鱼皮肤cDNA。同时使用自制RNA分离试剂提取斑马鱼总RNA,通过RT-PCR进行E2F5基因全长(1 092bp)的克隆,构建其真核和酵母表达载体并测序。【结果】使用自制RNA分离试剂提取草鱼皮肤组织总RNA的品质与用TRizol Reagent提取的总RNA品质相当,用之成功地合成了草鱼皮肤cDNA。使用自制RNA分离试剂提取得到了更高品质的...
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 丁勇  范红波  张高磊  严宇庭  李瑞阳  
采用RNAiso Plus法、RNApure Plant Kit法和改良CTAB法分别提取麻疯树种子总RNA,以期筛选适合于麻疯树种子高质量总RNA提取方法。用琼脂糖甲醛变性凝胶电泳检测总RNA的完整性,以紫外分光光度计检测总RNA的纯度和得率。结果表明:RNAiso Plus法提取麻疯树种子总RNA的A260/A280比值为2.030,28S和18S rRNA条带清晰,且前者的亮度约为后者的2倍,无可见的弥散现象,利用该方法提取的总RNA进行RT-PCR,成功克隆获得了麻疯树oleosin基因长603 bp的cDNA序列。证明RNAiso Plus法提取麻疯树种子总RNA可满足后续RT-PC...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 赵洋  段承俐  
从三七种子中提取高质量的RNA。采用CTAB法、天根试剂盒法、普通Trizol法、改良Trizol法对三七种子总RNA进行提取比较。结果表明,改良Trizol法提取的三七种子RNA纯度好、浓度高、无DNA污染,且成本低廉、操作简单,质量符合后续的基因克隆、cDNA文库构建、基因表达等分子生物学研究的要求。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘易科  孙洪波  简波  胡珀  高小伟  侯文胜  
对大豆总RNA的提取方法T rizo l法和异硫氰酸胍法进行了改良,比较了改良前后2种方法的提取效果。结果表明,2种改良方法提取的大豆总RNA质量较高、完整性较好,完全可以满足后续研究要求,RNA产率均超过220μg/g。改良T rizo l法适用于大豆根、茎、叶及生长点总RNA的提取,而改良异硫氰酸胍法适用于大豆根、茎及生长点总RNA的提取。
[期刊] 华北农学报  [作者] 任杰  徐秀红  张素丽  冷平  
为了提高植物不同组织提取质量和效率,降低成本,在热硼酸法的基础上探索出一种适于植物不同组织总RNA提取方法。利用该方法从植物根、茎、叶、不同成熟期果实、不同成熟期种子和不同成熟期果柄中提取的总RNA经紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳分析证明具有较高的纯度和完整性。所得RNA的A260/A230大于2.3,A260/A280为1.8~2.0,并且RNA产量高,可以满足RT-PCR和Real time RT-PCR的实验需要。该方法能够满足一般分子生物学下游操作的要求,是一种理想的植物不同组织总RNA提取方法。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 孟晓庆  侯智霞  张兰  朴蕾  
【目的】探讨榛子总RNA提取的有效方法,为今后开展榛子的分子生物学等研究奠定基础。【方法】以榛子的成龄叶片、幼嫩叶片和雄花芽为试材,采用植物RNA提取试剂盒、Trizol法、改良的CTAB法Ⅰ、改良的CTAB法Ⅱ、CTAB法和改良的SDS法提取其总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和PCR检测所提取总RNA样品的品质。【结果】除了Trizol法,其他5种方法都能提取到总RNA,但是改良的CTAB法Ⅰ更适合榛子幼嫩叶片、成龄叶片和雄花芽总RNA的提取,此方法提得的总RNA较完整,条带清晰,品质较优,28SrRNA亮度约是18SrRNA的2倍,且无降解现象。经RT-PCR验证,以改良的CT...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 刘永忠  刘庆  陶能国  邓秀新  
研究了一种适合脐橙果实成熟过程中有效的RNA提取方法。结果表明利用该方法从不同成熟时期果实的果皮和果肉中提取的RNA可以有效用于RT-PC,cDNA-AFLP和RNA杂交。其A260/A230的比值超过2.0,A260/A280的比值在1.65-1.92的范围之间。另外该方法也证明可以广泛用于柑橘叶片,未成熟的幼果,枳壳幼苗和柑橘愈伤组织的RNA提取,是一种安全、方便和适用性较广的RNA提取方法。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 王晓松  黄心渊  
在自然场景中拍摄的树木图像包含了丰富的信息,并受环境、光照、天气、噪声等的干扰,树木本身及其周围景物的多样性使得自然场景中的树木图像提取成为一项复杂的、探索性很强的工作。本文采用自然图像抠图技术进行树木图像的提取,较好地解决了树木图像内部存在大量空洞和透明现象的问题;提出了关注区域的概念,并引入区域生长的方法,从简化三分图划分、尽可能多地确定前景像素点和减少未知区域待运算像素数目3个方面对基于马尔可夫随机场(MRF)的抠图方法进行了改进。实验结果表明:改进的基于MRF的树木图像抠图算法能够有效地提取树木图像,并简化了人机交互过程,增强了颜色的准确性,同时使运算速度大幅度提高。
[期刊] 华北农学报  [作者] 段西飞  王静华  崔江慧  薛薇  李霄  常金华  
介绍一种高粱总RNA的提取方法。该方法以CTAB为主要提取试剂,成功地提取出了高粱叶片的总RNA。获得的RNA条带清晰,A260/A280在1.8~2.0。这些结果表明提取的总RNA质量好,完整性好,可用于cDNA文库的构建、差异表达等工作。
[期刊] 中国卫生经济  [作者] 韩涛  乔同元  崔萍  
奖金作为一种超额劳动的报酬,已经构成职工收入中一个相对稳定的组成部分。如何通过奖金分配充分调动职工的积极性,从而发挥奖金的“经济杠杆”作用?如何从根本上解决分配过程中“一手硬、一手软”的问题,使奖金核算溶于医院管理之中,并为医院管理服务?现将我们的做法介绍如下: (一)定编定编是指床位和人员定编。编制床位数=历年床位利用率×实际开放床位数;人员定编以编制床位数和卫生部颁发的人员编制标准为依据,结合本单位的实际情况来确定。定编是奖
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