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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蒋建林 蒋金书
本研究改进了用 PCR合成 c DNA的方法。先用具有长链合成能力的高效反转录酶 (Superscript TM Rnase H-Reverse Transcriptase)合成第一链 c DNA,用多种 RNA酶去除 RNA后 ,在第一链 c DNA3′端用末端转移酶特异性加上多个 d GTP,再用具高保真和长链合成能力的耐高温 DNA聚合酶 (Taq和 Pwo DNA聚合酶 ) PCR扩增总 c DNA。总 c DNA长度分析试验结果表明本法合成的总 c DNA质量高
关键词：
cDNA合成 PCR
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘文文 郝转芳 翁建峰 李新海 宋新元 张世煌 谢传晓
【目的】基于PCR技术与DNA样本混合策略建立一种高效定性筛查大量待检样本中转基因阳性样本的方法。【方法】以480个样本为研究案例,对待检样本DNA模板随机编号后构建虚拟三维混合池,置于5×96孔板中,将各板、各行和各列分别混合,构建所有板各行的X维行池(A,B,C,……G,H)和所有板各列的Y维混合池(1,2,3,……11,12),各板所有样本混合的Z维混合池(I,II,III,IV,V)。利用三维交叉唯一性原理与PCR检测的灵敏性与特异性,高效定性筛查样本中的阳性个体。将浓度为500 ng.μL-1的阳性对照分别用ddH2O和同浓度阴性DNA模板进行96倍(96×)稀释,检测该方法的灵敏性...
关键词：
转基因阳性个体 筛查 混合 PCR 高效
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张成桂 甘莉
cDNA -AFLP结合了RFLP和RT- PCR的优点,在无需了解序列信息的同时,集中显示基因组表达序列的多态性差异,灵敏性高,重复性好。但实验室开展常规的cDNA- AFLP研究需要昂贵的设备和大量的投入。本试验改用小面积变性聚丙烯胺凝胶电泳检测扩增产物,银染显带法来完成cDNA- AFLP的全套技术体系,使cDNA -AFLP分析方法更为简便、经济并减少污染。
关键词：
cDNA-AFLP 甘蓝型油菜 分析方法
[期刊] 林业科学
[作者]
苟大平 王曦茁 汪来发 田国忠 朱天辉 郭民伟
【目的】本研究旨在探索快速、简便地直接从病木中提取松材线虫DNA的方法。【方法】运用Chelex-100结合异硫氰酸胍蛋白变性缓冲液建立新的高效快速提取微量木块中线虫DNA的方法,并通过普通PCR与环介导等温扩增(LAMP)对提取的DNA进行检测验证。【结果】建立了提取线虫DNA的新方法 Chelex-100法,并对影响提取效率的Chelex-100浓度、冻融时间和煮沸时间进行了优化。Chelex-100法最适Chelex-100终浓度为1.5%(W/V),最适冻融时间为5 min,最适煮沸时间为8 min。与传统的CTAB法和蛋白酶K法比较,Chelex-100法提取的DNA得率高,相同条件...
[期刊] 统计与决策
[作者]
周德强
文章提出了一种改进的基于概率的权数确定方法。该方法不需要对研究指标做正态分布的假设,可直接根据样本数据计算出样本均值和方差,从而得到权数。该方法能较好地避免主观因素的影响,并且较概率权法更具一般性。文章通过实例将该方法和熵权法、变异系数法等客观赋权法进行了对比,结果表明该方法具有可行性和有效性。
关键词：
权数 概率 客观赋权法 综合评价指标
[期刊] 统计与决策
[作者]
刘叶玲 翟建国
一、引言在统计学中,离群值就是含粗差(粗大误差、疏失误差)的统计数据,粗差是明显超出规定条件下预期的误差。统计数据中的疏忽(如读错、记错、算错、仪器有故障、操作不当)和巨大误差(残差的绝对值特别大)都是粗差。对于离群值的出现,我们必须认真对待,不能盲目地取舍。首先要考虑离群值的出现是否由于实验技术或仪器操作等方面的原因造成的,
[期刊] 软科学
[作者]
傅道臣 张新兰
确定指标权重的一种改进方法中国地质大学人文与管理学院傅道臣，张新兰当人们需要对复杂事物作出评判时，常借助层次分析法，构造判断矩阵，确定指标权重，在一定准则下，实现对事物的相对科学的评判。判断的客观性和科学性在很大程度上取决于各评判指标的权重，然而，层...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
赵先海 黄浩 邓小梅 袁金英 湛欣
改建了基于Cre/LoxP重组的2个供体载体和1个兼容Gateway系统的供体载体:pYLd1GW/pYLd2GW、pYLd1GW35s/pYLd2GW35s和pYLd1GWMPK/pYLd2GWMPK。在改建载体的基础上构建了2个供体载体pYLd1GWMdSPDS1和pYLd2GWCBF1,并将2个基因构建于受体载体pYL1305,得到双价表达载体pYL1305MC。采用农杆菌介导的叶盘法转化烟草,经PCR检测和GUS组织化学染色检测发现,双价基因已成功转入烟草。对6株转基因烟草进行荧光定量PCR检测,发现在不同植株中同一基因表达量差异很大,但2个基因表达量差异趋势一致。
关键词：
烟草 载体 多基因 Gateway 组装
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
胡远志 李东峻 刘西 聂相虹 李世杰
在现有自动驾驶场景仿真软件中构建真实道路模型是对场景开发与验证的必要前提，如何快速及真实地构建是实现场景仿真的关键。该文创新性地采用GIS数据与RoadXML数据格式相结合，使用程序化自动提取道路参数，实现三维道路的真实构建，解决了不借助相关设备情况下获取道路高程信息困难的问题，并通过实车采集GPS数据分析对比和场景仿真工具验证了该方法的合理有效性。
关键词：
道路建模 场景仿真 自动构建 GIS数据
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
刘飞 黄绍书 郝正航 陈卓 谈竹奎 徐玉韬
由于直流输电系统中开关数量过多,且受仿真机存储容量和CPU处理能力的限制,给直流输电系统的实时仿真带来了很大困难。为了实现高压直流输电系统的实时仿真,采用理想变压器模型法在直流线路上对高压直流输电系统进行模型分割。以12脉波高压直流输电系统为例,将上述模型分割方法与原整体模型进行了仿真对比分析。结果表明,模型分割方法适用于直流输电系统实时仿真测试平台的构建。
[期刊] 统计与决策
[作者]
肖文 王正友 王耀德
区间数是表示不精确信息的常用表达方式。在无法获得精确信息的情况下,信度结构需要扩展为区间值信度结构,相应的基本信度分配由区间数表示。文章提出利用证据理论合成区间信度的新方法,通过对区间值信度结构的分析,将区间信度分为"确知信度"和"未知信度"两部分,从而将区间值信度结构转换为识别框架下的扩展信度分配;然后利用Dempster合成规则合成扩展的信度分配,并且证明得到的综合区间值信度结构仍是有效的;最后给出一个对比实例验证了该方法的有效性。
关键词：
区间值信度结构 证据理论 扩展分配 合成
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
丁勇 刘英 杨鸯鸯 甘莉
设计了1种从油菜种子中分离高质量总RNA的方法,有效的排除了种子中富含的多酚、多糖和蛋白质等杂质的污染。分离的总RNA经甲醛变性凝胶电泳和紫外光检测,可见28S和18S rRNA的2条清晰的带型,完整无降解,其A260/A280在1.8~2.0之间。研究结果证明,利用本方法提取的油菜种子总RNA具有很高的质量和纯度,且得率高,完全能满足后续的RT-PCR、全长基因的克隆和Northern blotting分析等分子生物学研究。
关键词：
油菜种子 RNA提取 多酚 多糖 方法
[期刊] 图书情报工作
[作者]
胡志刚 陈超美 刘则渊 侯海燕
定义和比较"引文"和"引用"两个紧密相关而又相互独立的概念,并基于Journal of Informetrics(JOI)期刊中的论文数据进行相关的实证分析。通过从JOI期刊全文数据中识别出在正文中出现的引用信息,统计文章中引用个数的分布情况,计算引用个数与引文篇数之间的相关系数,分析引用和引文之间的多对多关系,并提出一种新的加权的计算引文总被引次数的方法。结果表明,这种方法可以更早地识别出最新发表的高被引论文,因此在科学预见和科学评价方面具有重要的应用价值和前景。
关键词：
引文分析 引用分析 被引次数
[期刊] 华北农学报
[作者]
郭陈刚 李顺国 魏志敏 夏雪岩
为了从转录组水平研究黄伞菌的抗肿瘤等药用价值，需要提取分离得到高纯度、高质量的黄伞菌ＲＮＡ样品。利用液氮研磨ＴＲＩｚｏｌ一步法提取黄伞菌总ＲＮＡ，并且对经过和未经液氮研磨的黄伞菌ＲＮＡ提取产物进行了质量检测和统计对比分析。检测结果显示，经液氮研磨样品ＲＮＡ浓度远远高于未经研磨样品，ｏＤ２６０／２８０都约等于２，说明其纯度很高。同时，３个重复样品２５Ｓ和１８Ｓ亚基条带荧光强度比值分别为１．８，１．９，１．９，接近于２，证明ＲＮＡ完整性较好，ＡｇＩｌｅＮＴ ２１００的ＲＩＮ值检测结果分别为９．１，８．７，９．３，均远大于６．８标准，进一步佐证了其完整性。所以，液氮研磨ＴＲＩｚｏｌ一步法是非常适用于．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘芬 于秀梅 刘大群
为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiquitin的表达情况进行分析。扩增结果表明,选定的各持家基因在叶锈菌侵染不同时间的小麦叶片中的表达量并不一致,且各基因在小麦叶片中的丰度也存在差异。通过对几种基因的扩增,进一步证实该方法能够满足一般分子生物学下游操作的要求,是一种理想的植物总RNA提取方法。
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