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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张皓 刘雪莹 钱铭 高鸿儒 汤超 张华 王鹏 张绍铃 吴巨友
[目的]本文旨在建立一种快速添加或替换蛋白标签的新方法——多标签重组连接酶法,为进一步研究目的基因的功能奠定基础。[方法]利用同源重组连接酶反应,将目的基因、蛋白标签和酶切的表达载体同时进行连接,建立一种快速添加或替换目的基因蛋白标签的新方法。[结果]多标签重组连接酶法在用时和步骤上比融合PCR法和T_4 DNA连接酶法具有一定的优势。以梨S_7-RNase为目的基因,基于同源重组连接酶反应,成功将S_7-RNase和GFP蛋白标签构建到pCold-TF载体上,并在15℃和IPTG终浓度为0.5 mmol·L~(-1)时,对重组质粒S_7-RNase-GFP-pCold-TF进行原核表达并成功表达出了重组蛋白。同时,将p1300-35S-GFP载体中的GFP蛋白标签成功替换为mCherry蛋白标签,并将重组质粒p1300-35S-S_7-RNase-mCherry在烟草细胞中成功表达。[结论]多标签重组连接酶法具有快速、简单和高效等特点,并且适用于构建多个蛋白标签或替换某个蛋白标签的表达载体,是一种可靠的高效获得目的基因所需蛋白标签的新方法。
关键词：
目的基因 蛋白标签 重组酶 添加 替换
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
冯典兴 刘广纯
以蛆症异蚤蝇为试材,提出一种盐酸胍结合NaCl的DNA快速提取新方法,并用随机引物对提取的DNA进行扩增。结果表明:该方法可以快速提取蚤绳幼虫、蛹、成虫及乙醇浸泡成虫的DNA。RAPD结果显示,该法提取的DNA能够满足蚤蝇分子生物学研究的需要。
关键词：
蚤绳 盐酸胍 基因组DNA
[期刊] 华北农学报
[作者]
郝丽梅 王立安 马春红 陈霞 陈颖
[期刊] 统计与决策
[作者]
武小平 安静 熊高江
在网络计划中,通过安排各个工作优先顺序使人员配置合理化是网络计划有效性的关键,在工作规划过程中,人力资源受限条件下,使任何时段人力资源的需求量不超过资源限量,并且尽可能的减少对工期的影响。文章以计划评审技术为基础,考虑资源、风险和成本对工期的影响,结合层次分析法设计了不考虑时差的优化策略,该策略可以有效的解决人员供需不平衡达到人力资源的合理配置,提高资源使用效率。算例分析表明该策略是可行且有效的。
关键词：
人力资源 PERT 资源优化 人员配置
[期刊] 预测
[作者]
石琴 梁梁
一种评价技术产品的新方法石琴，梁梁（安徽工学院汽车工程系２３００６９）（中国科技大学管理科学系）１前言目前国内外在不同的领域中使用的评价方法很多，常见的有多目标决策方法、数据包络方法、层次分析法和模糊综合评价方法等［１］．这些评价方法几乎都是从待评价...
[期刊] 统计与决策
[作者]
艾小青 叶章琪 张雪薇
分割指数(Segregation Index)是度量群体分割程度的统计指标,其理论、方法和应用是西方学术界的研究热点,而国内目前较少有专门针对分割指数的系统介绍和研究。文章梳理了相关研究文献,介绍并分析了各种已有分割指数的构建方法及其性质,勾勒出一幅较为全面的研究图谱;提出并论证了一种新方法,在已有指数的基础上构建了相应的加权分割指数。最后,对2013—2017年我国城镇职工的行业分割情况进行了测算,例示了各种分割指数的应用,验证了加权分割指数应用的良好效果。
关键词：
分割指数 分割曲线 加权分割指数
[期刊] 统计与决策
[作者]
孙祝岭
文章提出了用已知估计量构造新估计量的点估计的新方法,称这种新估计法为派生估计法,由派生估计法得到的估计量称为派生估计量,并证明了若原估计量具有相合性,则派生估计量也具有相合性。
关键词：
点估计 派生 相合性
[期刊] 技术经济
[作者]
孙巍 刘心报 杨印生
一种项目评估的新方法孙巍，刘心报，杨印生一、有关概念设某项目的计划指标体系及实际执行指标体系分别用系统Ａ、Ｂ来表示：般取ｋ＝ｌ，且ａｉ、ｂｉ为对应指标。称ａｉ、ｂｉ分别为Ａ、Ｂ的要素。当进行两个项目评比时，Ａ、Ｂ分别表示两项目的实际执行指标体系。若ａ...
[期刊] 水产学报
[作者]
杨文鸽 金淼 颜伟华 徐大伦 徐培芳
鱼肉盐溶蛋白的凝胶特性与鱼糜制品的质地密切相关,而盐溶蛋白的凝胶特性又受到许多因素影响。为研究添加转谷氨酰胺酶(TGase)、海藻酸钠、卡拉胶、魔芋胶对宽体舌鳎盐溶蛋白凝胶特性的影响,本实验通过四元二次通用旋转试验设计,采用响应面法建立了宽体舌鳎盐溶蛋白凝胶保水性(Y)和凝胶强度(y)与各添加剂用量的二次多项回归方程,确定了TGase、海藻酸钠、卡拉胶、魔芋胶的适宜添加量分别为0.36%,1.00%,1.00%,0.71%,添加后舌宽体鳎盐溶蛋白凝胶网状结构致密均匀,保水性和凝胶强度分别为60.36%和55.20 g,比对照组分别增加了36.41%和351.80%。结果说明,合适的添加剂组合可...
[期刊] 预测
[作者]
范金 万兴 胡汉辉
更新投入产出(input-output,IO)表作为一种非调查技术一直受到普遍重视。已有的文献强调整合目标表的信息,在不同程度上忽视了保持初始表的原有结构。本文提出添加保零约束以保持初始表的零值结构,并采用九种更新方法,将中国1997年和2002年的IO表分别向前和倒推更新到2000年的IO表。通过与现有2000年的IO延长表进行比较检验,我们发现:第一,添加保零约束不仅能继承初始表的零值结构,而且极大提高了各种更新方法计算结果的精度;第二,添加保零约束不仅提高了各种更新方法的局部精度,而且提高了整体精度,其中以交叉熵法的精度提高最大;第三,以1997年为初始表的更新结果好于以2002年为初始...
关键词：
投入产出表 更新 保零约束
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
江坤生 陈芳 张关荣 黄泽葵 关俊锋 麻永财 陈宇航 谢帝芝 李远友
目前，大口黑鲈(Micropterus salmoides)配合饲料对鱼粉的依赖性大，而鱼粉价格不断上涨，导致其饲料成本居高不下，严重制约了其养殖业的健康发展。为降低饲料成本，本研究以鱼粉、鸡肉粉和猪肉粉为饲料动物蛋白源，制作7种配合饲料(D1～D7)，其鱼粉/鸡肉粉/猪肉粉的添加百分比分别为45.0/22.6/0、37.1/22.6/8.0、28.8/22.6/16.0、45.0/14.5/8.0、45.0/5.3/16.0、41.6/18.0/8.0和37.0/13.8/16.0。采用上述饲料投喂大口黑鲈幼鱼(初始体重约为55 g) 60 d，评估饲料动物蛋白源组合对鱼生长性能、组织生化指标、肌肉质构特性以及肝脏蛋白质代谢和肠道炎性因子相关基因表达的影响。结果显示，相比于其他饲料投喂组，D3组鱼的终末体重、增重率、特定生长率显著提高，饲料系数显著降低(P<0.05);D3组全鱼粗蛋白质显著高于D5组，其粗脂肪水平显著低于D4和D6组(P<0.05)。在组织生理生化指标方面，D3组鱼血清总氨基酸含量显著高于D1和D4组(P<0.05)，而其谷草转氨酶活性显著低于D5组(P<0.05);D3组鱼肝脏总蛋白含量显著高于D7组(P<0.05)。在肌肉品质方面，D3组肌肉硬度和胶着性以及咀嚼性分别显著低于D4组和D6组(P<0.05)。上述结果表明，饲料中添加28.8%鱼粉、16.0%猪肉粉和22.6%鸡肉粉对大口黑鲈的促生长效果最优，且有利于提高肝脏蛋白质合成，维护肠道健康。研究结果可为降低大口黑鲈配合饲料对鱼粉的依赖提供技术支撑。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
曹中赞 王晓娜 李静 陈美月 许建文 栾新红
为探讨抗应激添加剂对肉牛因运输应激导致机体应激蛋白表达波动的影响,揭示抗应激添加剂的作用以及肉牛运输应激发生的分子机理奠定理论基础,本试验选择27头体重和体况相近的健康出栏育肥辽育白牛,随机分成3组(n=9),其中对照组饲喂常规基础饲粮,2个添加剂组饲粮中分别添加抗应激1号和2号,饲喂10d后,在20℃、相对湿度51%的环境条件下,以50～60km·h-1的速度在公路上运输5h,分别采集运输前及运输后的肉牛血液及运输后的肉牛肌肉组织,制备血清,提取组织RNA及蛋白,采用ELISA、qRT-PCR、Western Blotting等方法分别检测血清中HSP70含量和肌肉组织中应激蛋白HSP27、HSP70及HSP90的mRNA和蛋白水平的表达量。结果表明:运输后各组肉牛血清HSP70含量显著高于运输前(p<0.05);添加剂组同对照组相比,运输前后血清HSP70均明显下降(p<0.05或p<0.01)。抗应激1号组肌肉组织HSP27、HSP70和HSP90的mRNA相对表达量较对照组明显下降(p<0.05),抗应激2号组肌肉组织中HSP90mRNA的表达量较抗应激1号组显著升高(p<0.05)。两个抗应激添加剂组肌肉组织HSP70和HSP90的蛋白表达量较对照组明显减少(p<0.05)。运输使肉牛血清和肌肉组织中应激蛋白含量增加,而抗应激添加剂可影响运输后肉牛血清及肌肉组织中应激蛋白的水平,尤以抗应激1号作用更明显。
关键词：
应激蛋白 抗应激 运输 添加剂 肉牛
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