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[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘文文 郝转芳 翁建峰 李新海 宋新元 张世煌 谢传晓
【目的】基于PCR技术与DNA样本混合策略建立一种高效定性筛查大量待检样本中转基因阳性样本的方法。【方法】以480个样本为研究案例,对待检样本DNA模板随机编号后构建虚拟三维混合池,置于5×96孔板中,将各板、各行和各列分别混合,构建所有板各行的X维行池(A,B,C,……G,H)和所有板各列的Y维混合池(1,2,3,……11,12),各板所有样本混合的Z维混合池(I,II,III,IV,V)。利用三维交叉唯一性原理与PCR检测的灵敏性与特异性,高效定性筛查样本中的阳性个体。将浓度为500 ng.μL-1的阳性对照分别用ddH2O和同浓度阴性DNA模板进行96倍(96×)稀释,检测该方法的灵敏性...
关键词：
转基因阳性个体 筛查 混合 PCR 高效
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘晓鑫 谢传晓 赵琦 路明 曲延英 张滨 梁业红 张世煌
【目的】建立玉米群体混合样本等位基因及其频率的分析方法。【方法】采用ABI全自动遗传分析仪,利用5′端荧光标记的SSR引物,通过混合样本中PCR扩增产物检测峰高与丰度对应,分析基因频率。【结果】与聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法相比,ABI全自动遗传分析仪的检测灵敏度高。20个供试玉米群体中,荧光引物Phi072(6-Fam)共检测到82个等位基因位点,平均每个群体4.1个;引物Phi084(Hex)检测到43个等位基因位点,平均每个群体2.15个。多重PCR(multiplex PCR)荧光SSR检测结果显示,可以明确区分不同等位基因。荧光SSR能准确地读出片段大小,定量PCR扩增产物的丰度。用Ge...
关键词：
荧光SSR 玉米群体 混合样本 基因频率
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李俊 李夏莹 王颢潜 翟杉杉 陈子言 高鸿飞 李允静 吴刚 张秀杰 武玉花
【目的】转基因油菜是四大转基因作物之一,是中国转基因生物安全监管的重要对象,转基因检测为转基因安全监管提供技术支撑。转基因筛查是转基因检测的第一步,筛查靶标设置不合理会导致漏检部分转基因成分。建立转基因油菜筛查策略,并研制与筛查策略配套的阳性质粒分子,将为中国的转基因油菜安全监管提供强有力的技术支撑。【方法】通过收集数据库中登记的转基因油菜品种的外源基因元件信息,分析转基因油菜品种中常用的调控元件和标记基因,基于最大筛查覆盖率原则,确定转基因油菜的筛查靶标。通过检索数据库或查询专利,收集筛查元件的核苷酸序列。一个筛查元件通常有多个标准方法,查阅各筛查元件的检测标准,分析各标准中普通PCR引物对和实时荧光PCR引物/探针组合在筛查元件核苷酸序列中的位置,根据引物探针的结合位点,确定拟构建到质粒上的各筛查元件的核苷酸序列。人工合成各筛查元件和油菜内标基因的融合序列,克隆到常用质粒pUC18,构建阳性质粒分子。采用各筛查元件的普通PCR和实时荧光PCR方法,评估阳性质粒分子的适用性。【结果】建立了转基因油菜的筛查策略,通过检测CaMV 35S启动子、FMV 35S启动子、Bar、PAT、CP4-EPSPS、NPTⅡ、HPT、NOS终止子和PinⅡ终止子共9个基因元件,可实现已知信息转基因油菜品种的全覆盖。构建出聚合9个筛查元件和2个油菜内标基因HMG I/Y和CruA的转基因油菜筛查质粒分子pYCSC-1905。9个筛查元件和2个油菜内标基因的扩增效率均在90%—110%,证明质粒分子上的不同靶标序列没有相互干扰,影响PCR的扩增效率。质粒分子pYCSC-1905可用作9个筛查元件和2个油菜内标基因的通用阳性对照,适用于国家标准(GB/T和农业农村部公告)、出入境检验检疫行业标准(SN/T)和欧盟标准。【结论】提出的转基因油菜筛查策略涵盖9个基因元件,可实现从商业化到安全评价各阶段转基因油菜的筛查检测,显著降低转基因油菜的筛查漏检率。研制的配套质粒分子pYCSC-1905为转基因油菜筛查和各基因元件标准方法的应用提供了通用标准样品,保证检测机构间检测数据的准确性和可比性。
[期刊] 统计与决策
[作者]
李志浩 王万军 胡建军
文章讨论了混合指标中定性与定量指标的多目标决策问题,并利用联系数理论表示了多目标决策问题中存在的不确定性指标,建立了一种基于混合指标的多目标决策方法。该方法不仅用联系数描述混合指标的不确定性,而且避免了计算权重。最后通过实例分析表明,该决策方法简单、决策结果正确有效。
关键词：
混合指标 多目标决策方法 联系数
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
王茜 周文君 杨沛卓 宋立众
该文设计了一种基于介质集成同轴线（the substrate integated coaxial line,SICL）的L波段混合环，可用于单脉冲雷达系统。SICL具有高效率、无色散、单一工作模式的特点，是一种有重要应用的传输线形式。以SICL为传输线，设计了采用两层介质基板的混合环结构，采用导电通孔实现上下金属平面的互联；在输出端，为了便于同轴线馈电，设计了一种微带线到SICL的转接结构，采用导电通孔实现微带线和SICL内导体的垂直连接，实现了较好的阻抗匹配。基于上述工作原理，设计了一种工作于1～1.2 GHz的混合环，仿真结果表明，每个端口的电压驻波比（VSWR）约小于2，端口隔离度约大于20 dB，实现了和差功能，加工和测试结果表明了该文设计的方案的有效性。基于SICL的混合环结构具有设计简单、易于加工和良好的电磁兼容性，可在工程上应用。
关键词：
SICL 混合环 垂直互联 和差器
[期刊] 运筹与管理
[作者]
王林 陈璨
设计了一种新颖的基于差分进化算法和NSGA-Ⅱ的混合进化算法用来解决多目标优化问题。在此算法中,根据算法的搜索情况设计相应的自适应变异算子,以便在突变操作中找到Pareto解。同时,选择操作将基于NSGA-Ⅱ快速非优超排序和拥挤机制将父代与子代的双种群进行截短,确保最优解不会丢失并保证解的多样性。三个经典测试函数的仿真结果表明,文中算法在实现多目标优化问题的两个目标(获得收敛于真实Pareto前沿的解和解沿着前沿均匀扩展)方面表现出良好的综合性能。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蒋建林 蒋金书
本研究改进了用 PCR合成 c DNA的方法。先用具有长链合成能力的高效反转录酶 (Superscript TM Rnase H-Reverse Transcriptase)合成第一链 c DNA,用多种 RNA酶去除 RNA后 ,在第一链 c DNA3′端用末端转移酶特异性加上多个 d GTP,再用具高保真和长链合成能力的耐高温 DNA聚合酶 (Taq和 Pwo DNA聚合酶 ) PCR扩增总 c DNA。总 c DNA长度分析试验结果表明本法合成的总 c DNA质量高
关键词：
cDNA合成 PCR
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
尹建新 祁亨年 冯海林 杜晓晨
利用计算机视觉技术检测木板材表面缺陷。提出了一种基于混合纹理特征的表面缺陷检测算法,能准确、鲁棒地检测出木板材表面图像中是否有缺陷。首先,分别使用灰度共生矩阵方法、Gabor滤波方法和几何不变矩方法提取了10个优化后的图像纹理及尺度、平移、旋转不变特征;然后,对特征向量进行有效组合;最后,基于融合后的混合纹理特征向量,应用BP人工神经网络对样本集进行训练和检测。实验表明,该方法能准确地对木板材表面缺陷进行检测,平均检测成功率达96.2%。
[期刊] 统计与决策
[作者]
汪瑜 林祎明 孙慧敏
为了解决现有PM方法应用于三区间数回归模型时难以保证数学一致性及回归区间和观测区间之间存在的相交性问题，文章构建一种用于回归区间上下界的PM方法和用于回归最有可能值点非参数化方法的混合回归模型，通过添加“回归区间上界≥回归最有可能值≥回归区间下界”这一约束条件来确保区间数据的数学一致性，并通过限制“回归区间上界≥观测区间下界且观测区间上界≥回归区间下界”来确保区间相交性。基于K-T方程组讨论回归系数的解析表达式。蒙特卡洛模拟结果表明：与CCRM~+模型相比，混合回归模型具有更好的回归效果，PCO平均提高了121%,N_0平均降低了89%。在观测数据波动更大的多元回归中，混合回归模型也具有更好的回归效果。
[期刊] 统计与决策
[作者]
刘斌
针对IT外包项目的供应商选择问题,文章在已有方法的基础上,结合PROMETHEE和模糊的目标规划,提出一种混合的多目标决策方法,最后算例验证该方法,说明该方法的有效性。
[期刊] 统计与决策
[作者]
霍剑
文章根据正态分布函数,提出一种以百分比为坐标的新正态分布函数模型,并绘制模型曲线,将一般所有的正态分布都统一描述为一条唯一的分布曲线。为检验正态性,本文拟通过样本分组,用样本信息绘制样本曲线,将其与本文提出的模型曲线拟合比较,从而得出检验结果。
关键词：
正态分布 累计百分比 正态性检验
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
舒兆港 林甲祥 杨长才 张振昌 景林
分析了现有ＩＰ／ＳＤＮ混合互联架构方案的优缺点，提出一个基于ＲＩＰｖ２路由协议的轻量级ＩＰ／ＳＤＮ互联架构．其主要原理是将ＳＤＮ网络抽象成ＲＩＰｖ２协议中的单个虚拟路由节点，在控制器内部实现ＲＩＰｖ２路由表和ＯＰｅＮｆｌＯｗ流表信息的转换．从ＲＩＰｖ２的协议角度来看，无论ＳＤＮ网络内部包含多少个交换机和子网，网络报文穿过该ＳＤＮ，其跳数只经过１跳．在开源控制器ｆｌＯＯＤｌＩｇｈｔ上实现了该架构并进行了试验验证和性能评估．与现有架构相比，该架构不需要增加额外的协议转换设备，能够实现与传统ＩＰ网络的多出口节点互联，且具有较低的性能开销，适用于中小型园区网的ＩＰ／ＳＤＮ互联场景．
关键词：
软件定义网络 混合互联架构 路由协议
[期刊] 统计研究
[作者]
余鹏
确定样本规模的一种新思路余鹏进行抽样调查是需要一笔费用的，而样本信息能够为我们提供的潜在价值是有限的。因此，从经济效果考虑，在进行抽样调查之前应将抽样所需费用与样本信息所能带来的潜在价值加以比较，以便决定是否进行抽样以及抽样的规模（至少对一个企业应该...
[期刊] 软科学
[作者]
罗新星 张晓鹏
针对C2C中商品排序的可信问题提出一种基于商铺可信度的混合模糊综合评价方法:采用模糊AHP方法进行指标的权重确定,结合模糊TOPSIS方法对商铺的可信度进行评估。通过算例验证了该方法的适用性。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
李顺姬 胡珏 刘双清 成小文 黄国华
以构建原核表达载体重组质粒G4FPAGB1为例,介绍了一种新的载体构建方法。棉铃虫单核衣壳核多角体病毒G4毒株基因组上的Ha–FP–A片段用Hin dⅢ和Eco RⅤ双酶切,Ha–FP–B片段用XhoⅠ和Bam HⅠ双酶切,绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因片段用Eco RⅤ和XhoⅠ双酶切,载体质粒p Bluescript SK(+)用Hin dⅢ和Bam HⅠ双酶切。酶切产物经电泳检测后,将所有含目的片段的胶块切下,放在同一个离心管中进行DNA回收,得到的混合DNA产物直接加入连接酶进行连接、转化。结果表明,3个目的片段均成功连接到载体质粒上。本...
关键词：
载体构建 克隆方法 一步式混合胶回收
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