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[期刊] 中国农业科学  [作者] 齐放军  高世强  吴茂森  何晨阳  
目的本文研究了信号分子一氧化氮(NO)和过氧化氢(H2O2)对水稻细胞过敏反应(HR)的诱导作用。方法用溴酚兰染色法定量检测这两种信号分子单独或协同诱导作用下水稻细胞的HR。结果该两种信号分子可以独立或协同诱导水稻细胞HR的产生,H2O2对NO诱导的HR具有调节作用,但NO与H2O2浓度平衡与否对HR诱导并无影响。结论H2O2和NO均是诱导水稻细胞HR的信号分子,诱导过程中并不存在“NO/H2O2浓度平衡作用机制”。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 孟威  文景芝  吴茂森  何晨阳  
【目的】阐明在不同黄单胞病菌诱导的水稻过敏性细胞死亡(HCD)中的一氧化氮(NO)信号途径及其作用机制。【方法】比较分析了在水稻细胞-番茄斑点病菌(Xanthomonas campestris pv.vesicatoria,Xcv)不亲和互作、水稻-白叶枯病菌(X.oryzaepv.oryzae,Xoo)亲和互作中NO的发生以及NO对水稻防卫基因诱导表达的影响。【结果】Xcv不仅诱导了NO的迸发、NOS活性及其NO合成相关基因(nos和nr)的表达,而且诱导了防卫基因(苯丙氨酸解氨酶基因pal、过氧化物酶基因pox和谷胱苷肽转硫酶基因gst)的表达;Xoo不诱导NO的迸发,抑制了NOS的活性、...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 丁逍  刘琳  陈迪  马海田  
为了建立体外模拟氧自由基诱导的细胞氧化损伤模型,本试验采用Percoll密度梯度离心法纯化原代大鼠Leydig细胞,并鉴定特异性蛋白3β-HSD;采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位、ROS以及O·-2含量,比色法测定·OH、MDA的含量以及抗氧化物酶SOD、CAT和POD的活性。结果显示:特异性蛋白3β-HSD鉴定后,荧光显微镜观察到大部分细胞呈现特异性荧光。MTT测定结果显示,300~1 000μmol·L-1H2O2处理细胞均可极显著降低细胞活力(P<0.01);300μmol·L-1H2O2处理可显著提高Leydig的凋亡率以及增加ROS含量(P<0.05)...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李欣  李鑫玲  庞新跃  朱文学  樊金玲  罗磊  杜琳  王娜  王利平  
【目的】分析细菌内源过氧化氢在细胞分裂周期中的时空变化,探讨细菌增殖中过氧化氢的生理功能。【方法】采用组织化学法通过透射电子显微镜技术观察水稻白叶枯病菌内源过氧化氢的积累位置。【结果】不同菌株内源过氧化氢水平不同,在细菌的整个细胞分裂周期中观察到过氧化氢在细胞壁上的积累水平维持稳定,在多个菌株的细胞分裂过程中,除细胞壁之外,还在2个新的位点(类间体结构和核区)出现过氧化氢的大量积累,表现出数量和空间定位的显著变化。【结论】在多个水稻白叶枯病菌菌株中发现胞内额外的大量过氧化氢积累和定位与细胞分裂的进程密切相关,这种过氧化氢的时空变化很可能是细菌分裂时的普遍现象。推测过氧化氢应在细菌增殖中具有重要...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 黄本开  刘开力  徐晟  宣伟  樊颖瑞  黄思睿  凌腾芳  刘志兵  孙永刚  沈文飚  
以100mmol·L-1NaCl作为盐胁迫条件,研究不同浓度的外源一氧化氮供体硝普钠(sodiumnitroprusside,SNP)处理5d对盐胁迫下水稻幼苗叶片脂质过氧化的影响。结果表明,低浓度SNP(10μmol·L-1)可以在处理后期(第4~5天)显著地缓解盐胁迫对水稻幼苗叶片造成的氧化损伤,并与其对过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)等H2O2清除酶活性以及脯氨酸含量的上调作用一致。此外,较高浓度的SNP处理(50μmol·L-1)也具有在一定程度上缓解脂质过氧化的作用。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 马纯艳  徐昕  郝林  曹军  
【目的】研究小白菜幼苗对二氧化氮(NO2)急性胁迫的应答及过氧化氢(H2O2)的调节作用。【方法】在自制的熏气箱中对供试植株进行NO2(浓度分别为0.25、0.5、1.0和2.0μl·L-1)熏蒸24h(10﹕00~次日10﹕00),测定某些生理生化指标。延长熏气至7d,每天7h(8﹕00~15﹕00),测定植株的生长速率。为了评价外源H2O2在植株对NO2应答中可能的调节作用,熏气前1d对试验组叶面喷洒10mmol·L-1H2O2溶液(相当于每棵植株喷洒约1mgH2O2),对照组喷洒等量蒸馏水。【结果】0.25μl·L-1NO2促进小白菜生长,而0.5μl·L-1及以上浓度NO2使植株生长速...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 牛丽  曹佩琴  刘仲华  
为探明茶黄素–3,3'–双没食子酸酯(TFDG)对人晶状体上皮细胞SRA01/04(Human lens epithelial cells,HLECs SRA01/04)的保护作用,采用MTT法建立高浓度葡萄糖(HG)诱导的HLECs损伤模型,同时观察HLECs细胞形态的变化。用不同浓度(4、8、16、64、32、64、128、256、512μmol/L)TFDG处理HLECs损伤细胞,采用化学比色法和硝酸还原法测定HLECs内一氧化氮(NO)的含量和一氧化氮合酶(NOS)的活性。结果表明:高浓度葡萄糖可以抑制人晶状体上皮细胞生长,用于HLECs损伤模型诱导的最佳葡萄糖浓度为50 mmol/L...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李烈川  申明  宁彩波  管志强  蒋毅  吴望军  刘红林  
[目的]本试验旨在研究抑制氧化应激诱导的自噬对猪卵巢颗粒细胞凋亡的作用。[方法]采用流式细胞术和细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,cck8)检测不同浓度(0、50、100和150μmol·l~(-1))过氧化氢处理12 h对猪颗粒细胞的凋亡诱导作用和细胞活力的影响;Western-blot检测微管相关蛋白1轻链3(lc3,包括lc3-Ⅰ和lc3-Ⅱ)和自噬相关蛋白P62/sQstm1的表达量变化,转染gFP-lc3质粒检测自噬体的数量;利用3-甲基腺嘌呤(3-mA)提前4 h抑制自噬后再氧化应激12 h,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,cck8检测细胞活力。[结果]氧化应激...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李惠民  胡洁  贺军民  
【目的】研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)催化产物磷脂酰肌醇3-磷酸(PI3P)对紫外线B(UV-B)诱导保卫细胞中过氧化氢(H2O2)产生和气孔关闭的影响,为进一步阐明植物细胞转导UV-B辐射信号的机制提供依据。【方法】以蚕豆(Vicia faba L.)表皮条为材料,采用PI3K的抑制剂沃曼青霉素(WM)和LY294002(LY)来抑制PI3P的形成,采用二苯基碘(DPI)和水杨基氧肟酸(SHAM)分别抑制H2O2形成的NADPH氧化酶途径和细胞壁过氧化物酶途径,通过气孔开度分析和激光扫描共聚焦显微镜技术,确定PI3P在0.8 W·m-2UV-B辐射诱导蚕豆保卫细胞H2O2产生和气孔关闭中...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 姜国建  于仁诚  王云峰  颜天  周名江  
通过硝基蓝四唑(NBT)还原法和血细胞形态法两种一氧化氮合成酶的鉴定方法,以日本对虾(Penaeusjaponicus)作为研究对象,对日本对虾血细胞中的一氧化氮合成酶进行初步鉴定,并优化硝基蓝四唑(NBT)还原法测定对虾血细胞中一氧化氮合成酶的实验条件。结果显示,当L-精氨酸浓度为2.5mmol/L,脂多糖(LPS)质量浓度为100μg/mL,Ca2+浓度为2.5mmol/L时,NBT法测定一氧化氮合成酶活力的结果最佳。同时,还建立了两种针对一氧化氮合成酶活力的分析方法—L-瓜氨酸分析法和亚硝酸盐分析法,并对其测定条件进行了优化。结果表明,对虾血细胞在4℃下与L-精氨酸和LPS孵育8h后测定...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李欣  于慧春  庞新跃  李红玉  王金生  
采用辣根过氧化物酶-酚红法定量检测病原菌细胞内源过氧化氢的产生,并通过组织化学法观察细胞中过氧化氢积累的亚细胞定位。结果表明:辣根过氧化物酶-酚红法及组织化学染色法均检测到水稻白叶枯病菌内源过氧化氢的产生。透射电子显微镜观察结果和辣根过氧化物酶-酚红法定量检测结果均显示,过氧化氢在水稻白叶枯病菌细胞中普遍存在,不同病原菌内源过氧化氢的水平有极显著差异。病原菌细胞中过氧化氢的积累主要定位在细胞壁。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 董海丽  井金学  
活性氧和一氧化氮是生物体内普遍存在的信号分子 ,参与多种生理功能的调控 ,对生物体正常生长发育具有重要意义。最近的研究认为 ,在环境条件胁迫下 ,植物体也能通过类似哺乳动物体内 NADPH氧化酶和一氧化氮合酶途径产生活性氧和一氧化氮。活性氧和一氧化氮在植物抗病反应中具有直接杀伤病原物、参与细胞壁的氧化交联、激活抗病相关基因的表达和依赖转录的防卫反应、诱导寄主细胞过敏性坏死等重要作用。本文据近年的研究结果对以上几个方面作一综述
[期刊] 水产学报  [作者] 殷国俊  Geert Wiegertjes  LI Yue-ming  Johan Schrama  Johan Verreth  徐跑  周洪琪  
用密度梯度离心分离鲤头肾中的巨噬细胞和嗜中性粒细胞。用RPMI细胞培养液对分离的细胞进行原代培养,在细胞培养液中加入不同浓度的黄芪水提取液来研究黄芪对鲤头肾中免疫细胞非特异性免疫应答的影响。黄芪水提取液单独使用时能刺激鲤头肾中巨噬细胞的增殖,但不能刺激巨噬细胞的氮暴发活性。用黄芪和脂多糖(LPS)混合刺激巨噬细胞和中性粒细胞时,黄芪水提取液能显著提高脂多糖刺激所产生的一氧化氮的产量。研究结果表明,黄芪不仅能刺激巨噬细胞数量的增加,而且能协同脂多糖增强头肾中免疫细胞的功能,从而对机体的非特异性免疫起调节作用。
[期刊] 华北农学报  [作者] 赵浩暖  王海宁  丛明燕  胡顺卿  朱树华  
探究不同浓度一氧化氮(NO)和冷藏处理对巨峰葡萄采后贮藏品质的影响。以巨峰葡萄作为试验材料,用不同浓度NO溶液浸泡处理葡萄果实,在0,25℃条件下恒温贮藏,研究不同浓度NO和冷藏处理对巨峰葡萄采后果实硬度、维生素C含量、可溶性蛋白浓度、可溶性糖含量、活性氧含量、丙二醛含量及脯氨酸含量等物质含量的变化。相比5,30μmOl/l NO处理,15μmOl/l NO处理有效地保持了采后葡萄果实的果实硬度,推迟了果实中可溶性蛋白浓度、可溶性糖以及维生素C含量的降低时间,抑制了活性氧含量和丙二醛含量的升高,提高了采后葡萄果实的脯氨酸含量,使葡萄果实在采后储存过程中能较长时间保持果实风味,延缓腐败时间并提高...
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 陈颖  杨华  乐利  林芳芝  罗永亚  王俊霖  曹福亮  
以银杏悬浮细胞为研究材料,通过向液体培养基中添加0~20.0 m M的H2O2,探讨H2O2处理下银杏细胞黄酮代谢、抗氧化酶及活性氧之间的相互关系。主要结果有:1外源H2O2处理限制了悬浮细胞的生长,但提高了苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性(20 m M第6 d除外)和总黄酮的合成,最高达18.8 mg/g DW(10.0 m M处理)。2低浓度(0.5~1.0 m M或0.5~5.0 m M)的H2O2能够激活SOD和CAT酶,而高于5 m M以上抑制两酶活性,POD活性在10~20 m M较高。0.5~1.0 m M外源H2O2对细胞内源H2O2和MDA(第6 d的20m M除外)的积累影响不...
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