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[期刊] 西南农业学报
[作者]
尹利方 陈泽斌 夏体渊 耿开友 赵凤 靳松 李静雯 牛燕芬
对污染铁皮石斛组培苗的内生细菌进行分离和鉴定，为预防铁皮石斛组织培养过程中内生细菌污染提供科学依据。采用ＮＡ培养基分离纯化细菌，通过形态特征、生理生化指标结合１６Ｓ ｒＤＮＡ序列同源性分析，对引起铁皮石斛组培苗污染的内生细菌进行鉴定。引起铁皮石斛组培苗污染的内生细菌为ＳＨ４２菌株，其形态特征及生理生化指标与莫海威芽孢杆菌（ＢＡｃｉｌｌｕＳ ｍｏｊＡｖｅＮＳｉＳ）基本相同；１６Ｓ ｒＤＮＡ序列分析结果表明，ＳＨ４２与Ｂ．ｍｏｊＡｖｅＮＳｉＳ（Ａｍ９４８９７０）聚在同一系统发育分支，其同源性为９９．４％。因此确定引起铁皮石斛组培苗污染的内生细菌ＳＨ４２为莫海威芽孢杆菌。
关键词：
铁皮石斛 组织培养 内生细菌 分离 鉴定
[期刊] 西南农业学报
[作者]
赵凤 耿开友 胡昳 夏体渊 陈泽斌 任禛 靳松
采用ＮＡ培养基分离纯化细菌，通过形态特征、生理生化指标结合１６Ｓ ｒ ＤＮＡ序列同源性分析，对引起化血胆组培苗污染的内生细菌进行鉴定。结果表明，引起化血胆组培苗污染的内生细菌为ＨＸＤ５菌株，其形态特征及２２项生理生化指标与枯草芽孢杆菌相符；１６Ｓ ｒＤＮＡ序列分析发现，ＨＸＤ５与Ｂ．ＡｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆＡｃｉｅＮＳ（Ｈｑ７２７９７１）、Ｂ．ｖＡｌｌｉＳｍｏｒｔｉＳ（ｆＪ３８６５４１）、Ｂ．ｌｉｃＨｅＮｉｆｏｒｍｉＳ（ｅｆ６４４４１４）、Ｂ．ＳｕＢｔｉｌｉＳ（Ａｙ５８３２１６）在同一系统发育分支，同源性为９９．９％～１００％。因此确定引起化血胆组培苗污染的内生细菌ＨＸＤ５为枯草芽孢杆菌。抑菌试．．．
[期刊] 西南农业学报
[作者]
靳松 尹利方 夏体渊 李冰 徐胜光 任禛 张永福 牛燕芬 刘一鸣
对污染蓝莓组培苗的细菌进行分离和鉴定，为防治蓝莓组织培养过程中细菌污染提供科学依据。采用ＮＡ培养基分离纯化细菌，通过形态特征、生理生化指标结合１６Ｓ ｒ ＤＮＡ序列同源性分析，对引起蓝莓组培苗污染的细菌进行鉴定。引起蓝莓组培苗污染的细菌为菌株ＬＭ５３和ＬＭ８５，１６Ｓ ｒ ＤＮＡ序列分析结果表明，ＬＭ５３和Ｂ．ＡＭｙＬｏＬｉｑｕｅｆＡｃｉｅＮＳ（Ｈｑ７２７９７１）、Ｂ．ｖＡＬＬｉＳＭｏｒｔｉＳ（ｆＪ３８６５４１）、Ｂ．ＬｉｃＨｅＮｉｆｏｒＭｉＳ（ｅｆ６４４４１４）、Ｂ．ＳｕＢｔｉＬｉＳ（Ａｙ５８３２１６）聚在同一系统发育分支，同源性为９９．９％～１００％；ＬＭ８５与苏云金芽孢杆菌Ｂ．ｔＨｕｒｉ．．．
关键词：
蓝莓 组织培养 污染 细菌 分离 鉴定
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
谢玲 张雯龙 蓝桃菊 陈艳露 覃丽萍 NARISAWA Kazuhiko 刘斌
从不同植物的茎和叶中分离获得２０４株真菌，通过对白菜的致病性测定筛选获得１株能显著促进白菜生长的内生真菌菌株２４Ｌ－４。结合形态学特征观察进行ＩＴＳ－ｒ ＤＮＡ和１８Ｓ－ｒ ＤＮＡ序列分析，对其进行鉴定，确定为ＤｅｖｒＩｅＳＩＡ ＬＡｇｅｒＳＴｒｏｅｍ。该菌株对铁皮石斛组培苗的株高、叶宽、茎径和干质量分别较未接种对照处理增加３３．３％、６５．７％、２７．３％和４５．１％，显著高于对照处理。同时，盆栽试验表明：Ｄ．ＬＡｇｅｒＳＴｒｏｅｍ铁皮石斛盆栽苗的茎径、鲜质量和干质量分别较无接种对照增加１０４．０％、８３．９％和１１４．７％，显著高于对照处理。显微镜观察发现：Ｄ．ＬＡｇｅｒＳＴｒｏｅｍ可定殖．．．
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
邵登科 吕正阳 李望豪 周瑞鹏 赖泽成 张春源 樊改丽 王荣波 林占熺 鲁国东 叶文雨
通过研磨组织、稀释分离等方法，从巨菌草的健康叶片中分离、筛选出1株具有溶磷和分泌吲哚乙酸能力的内生细菌，命名为FJU3,并对其生理生化特性、16S rDNA序列进行测定和分子生物学鉴定，也研究了其对盆栽玉米的促生效果.结果表明：菌株FJU3具有一定的溶磷能力，其分泌吲哚乙酸的质量浓度达到了14.2 mg·L~(-1),且显著高于其他菌株；经形态特征和分子生物学鉴定该菌株为解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus);菌株FJU3在产铁载体、接触酶、解硅酸盐等生理生化特性试验中均为阳性反应；玉米盆栽促生试验结果表明，促生效果比较显著的是地上部鲜质量和株高，与对照组相比，分别增加了76%和41%.
关键词：
巨菌草 内生细菌 生理生化特性 促生效果
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
余望寅 姚冠 扎西拉姆 普琼 刘京晶 周湘
【目的】揭示不同栽培环境对铁皮石斛Dendrobium catenatum内生细菌群落结构的影响,解析与石斛多糖含量存在潜在关联的功能菌种。【方法】针对温室人工基质培养和仿野生立木附生培养2种栽培体系下的铁皮石斛C9品系根、茎、叶等各部组织内生细菌,采用Illumina测序平台的Miseq进行高通量测序分析其菌落结构和多样性,同时利用逐步回归法分析内生细菌分布与组织多糖质量分数的关联性。【结果】铁皮石斛在2种栽培环境不同组织中的菌群结构差异显著(P<0.05),附生立木仿野生环境比温室环境下物种丰富度更高。同时,根部所含分类操作单元(OTUs)数量最多(112～630个),叶部则最少(28～73个)。其中,厚壁菌门Firmicutes(16.7%～34.9%)、拟杆菌门Bacteroidetes(8.7%～35.6%)和变形菌门Proteobacteria(15.9%～42.0%)的OTUs占优势。从菌种生理功能上看,固氮相关的菌种如弗兰克菌科Frankiaceae在树培环境下相对丰度更高,推测可能受树培寡氮环境的影响使固氮菌富集。逐步回归分析结果显示:不动杆菌Acinetobacter在根、茎、叶不同组织中的相对丰度与多糖质量分数变化关联度最大,其次为假单胞菌Pseudomonas。【结论】铁皮石斛内生细菌资源相当丰富,而栽培方式影响菌群分布,且与石斛多糖质量分数具有关联性。图4表1参27
[期刊] 西南农业学报
[作者]
徐文婷 张雅琼 董文汉 白燕冰 李泽生 孙文丽 杨生超 谢世清 梁泉
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是典型的菌根植物,共生真菌对铁皮石斛生长具有促进作用。本研究选用草炭土、菇渣、玉米芯等3种基质按不同比例配制了9种固体菌剂,比较测定了9种菌剂在室温条件下菌株的保存情况。选用保存效果最好的基质分别与内生真菌Chs-1-1、R2、S3制备菌剂进行铁皮石斛田间试验,测定了菌剂中内生真菌在铁皮石斛植株内的定殖能力和菌剂的促生效果。结果表明,草炭土的保存效果最好,在6个月后菌体数量达到8.1×107CFU/g;田间试验中,接种处理后铁皮石斛幼苗的存活率显著高于对照,最高者达95.78%;接种菌剂能有效提高幼苗的株高和根...
关键词：
石斛 内生真菌 固体菌剂 促生
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
龙正海 严小军 张煜炯 罗方
以分离自竹黄菌天然子座的LBR-SB6菌株为出发菌株,通过对形态特征、培养特性的研究,确定了该菌株为曲霉菌属Aspergillus sp.以改良查氏培养基为基础,对LBR-SB6液态发酵碳氮源等条件作了初步探讨,结果表明:乳糖、麦芽糖和玉米浆、亚硝酸钠分别是菌株生长和产色素的最佳碳源和氮源,1.0%竹汁对菌株生物量和色素生成量具有明显的促进作用.最终确定了LBR-SB6菌株液态发酵培养的最佳条件为:乳糖2%,亚硝酸钠0.2%,玉米浆0.1%(以干物质计),1.0%竹汁,磷酸氢二钾0.1%,硫酸镁0.025%,氯化钾0.5%,硫酸亚铁0.001%;最适温度25~28℃,摇床转速150~200 r...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
戴颖 穆亮亮 黄旭雄
探究了一株新分离的雨生红球藻的适宜生长条件。以藻细胞密度为响应值，通过单因子试验方法，获得该株雨生红球藻生长的最佳光照强度、培养温度和接种密度分别为105 μmol/(m~(2)·s)、21℃和 7.5×10~(4) cells/mL。然后采用响应曲面法(RSM)耦合Box-Behnken设计，建立了预测雨生红球藻细胞密度的二次多项式方程，培养光照强度、温度和接种密度及其二项式对雨生红球藻细胞培养密度有着显著影响。各因素影响强弱的顺序为：接种密度>光照强度>培养温度。响应曲面法获得雨生红球藻的最佳培养条件为光照强度120 μmol/(m~(2)·s)，温度20℃，接种密度9.25×10~(4 )cells/mL，在此组合条件下雨生红球藻细胞密度可达45.08 ×10~(4)cells/mL，比单因素实验得到的最高藻细胞密度高出6.9%。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
董志渊 李林玉 马维思 杨斌 王馨 严世武 杨丽英
【目的】研究铁皮石斛种子液体静置培养过程中,基本培养基对种子萌发、原球茎发育的影响以及来自不同培养基的原球茎及其体积大小对离体植株生长的影响。【方法】采用1/2B_5、1/2N_6、1/2MS、1/2花宝1号、1/2花宝2号等液体培养基静置培养铁皮石斛种子,观察统计种子萌发和原球茎发育生长情况;原球茎转至固体培养基后,比较来自不同液体培养基和体积大小(30目、40目)的原球茎,生长形成离体植株的形态类型。【结果】1/2N_6培养基培养获得的原球茎直径平均值最高,显著大于1/2MS培养基、1/2花宝1号培养基和1/2花宝2号培养基;原球茎在固体培养基上培养90 d,可发育形成单芽、多芽、愈伤组织等形态类型,来自不同液体培养基的原球茎,发育形成多芽、愈伤组织的比例均存在显著差异,原球茎大小对单芽、多芽、愈伤组织产生具有显著影响。【结论】铁皮石斛种子液体静置培养中,基本培养基是影响原球茎发育的重要因素,1/2N_6是较适宜的培养基;来自不同液体培养基的原球茎及其大小显著影响离体植株的生长,大于30目的原球茎发育形成正常单芽植株比例较高。
关键词：
铁皮石斛 种子 液体培养 离体植株
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
彭志兰 柳敏海 郭海波 罗海忠 薛超波 吴益春 罗海军 夏枫峰
采用选择性培养基通过定量增加亚硝酸盐含量来富集筛选好氧反硝化细菌,经过选择性培养基初步筛选,测定NO-2-N与NO-3-N的去除率,再通过反硝化培养基复筛选出同时具有去除NO-2-N与NO-3-N能力的目的菌。通过16S rRNA基因序列分析及同源性比对以及与其他已筛选出的部分硝化细菌与反硝化细菌的比对构建系统发育树,结合菌株的生理生化鉴定试验,鉴定出目的菌株。在好氧、28℃培养条件下,在反硝化培养基中,该菌株5 d内将NO-2-N由3 570 mg/L降至22 mg/L,去除率达99.4%,将与NO-3-N由2 464 mg/L降至27 mg/L,去除率达98.9%。通过形态学、生理生化反应...
关键词：
好氧反硝化细菌 筛选 鉴定 阴沟肠杆菌
[期刊] 西南农业学报
[作者]
吴翔 甘炳成 贾定洪 蒋元继 唐杰 周洁
利用阿须贝培养基从土壤样品中分离到一株具有自生固氮作用的细菌,编号为GN15。GN15为革兰氏阴性菌,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长速度快,长势好,通过对其进行形态特征、生理生化特征测定以及16SrDNA序列分析,结果表明,GN15为成团泛菌(Pantoea agglomerans),将其命名为Pantoea agglomerans GN15,对该菌的基础研究为固氮菌肥的研制提供基础的科学依据。
关键词：
自生固氮 分离 鉴定 成团泛菌
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
张战泓 罗源华 刘勇 张松柏 张德咏 罗香文
从某农药厂的排放口污泥中筛选分离甲氰菊酯高效降解光合细菌PSB07-28,根据菌株生理生化特征以及16S rDNA序列同源性鉴定降解菌,气相色谱法测定降解甲氰菊酯的能力,渗透休克法提取降解粗酶,测定其降解能力,定位降解酶.结果表明,PSB07-28菌株属红假单胞菌属(Rhodopseudomonas sp),对甲氰菊酯的最高耐受质量浓度为800mg/L,降解最佳条件为35℃,pH7.在最佳降解条件下,光照培养15d,对600mg/L甲氰菊酯降解率达42.49%.降解酶定域结果表明,降解酶是胞内酶.
[期刊] 海洋渔业
[作者]
张晓玲 陆亚男 樊成奇 马丽艳 蒋平 俞勇 黄洪亮 陈雪忠 杨桥
从采集自南极FAO 48.1海域海水样品中分离纯化到一株产吡咯喹啉醌(PQQ)海洋细菌,对其进行了细菌分类学鉴定、摇瓶培养发酵、发酵产物提取及HPLC定量分析,并对纯化的PQQ进行了针对一氧化氮(NO)抑制活性及羟自由基(.OH)清除抗氧化活性评价。结果表明,该菌株与副球菌属(Paracoccus sp.)内菌株的16S rRNA基因序列同源性较高。综合多个分类学指标的分析结果,将其鉴定为属于副球菌属,命名为Paracoccus sp.PQ-08。生物活性评价结果表明,PQQ可显著抑制人脐静脉内皮(ECV-304)模式细胞内诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在mRNA转录水平及蛋白水平的表达量,...
关键词：
南极洲 海洋细菌 分离 鉴定 生物活性
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李江红 郑志阳 洪双燕 齐香凤 梁勤
【目的】寻找抑制蜜蜂球囊菌的拮抗菌,用于白垩病的生物防治。【方法】利用细菌纯化技术从患白垩病的蜜蜂幼虫体内分离纯化了一株对蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)有抑制作用的细菌,并结合形态学、革兰氏染色以及16S rDNA序列分析技术进行鉴定,同时通过蜜蜂体内、体外接种试验研究其对蜜蜂球囊菌的抑制作用。【结果】该细菌被初步鉴定为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus),它在培养基中能够完全抑制蜜蜂球囊菌的生长,但其发酵液对蜜蜂球囊菌的生长没有影响。将含菌饲料喂蜜蜂幼虫,蜜蜂幼虫的死亡率和生长发育没有受到影响,说明该细菌对蜜蜂幼虫没有致病性。蜜蜂幼虫体内同时接种细菌和球囊菌孢子,发...
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