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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王淑军 陆兆新 吕明生 刘红飞 徐金利 杨磊
对一株分离自深海热液口古菌HJ21进行了分类鉴定及高温酶活性的研究。该菌株是极端嗜热的厌氧球菌,直径为1.0~1.2μm。菌株最适生长温度88℃;菌株生长pH为5.0~9.0,最适pH为6.5~7.0;菌株生长NaCl质量浓度为10~50 g.L-1,最适为20 g.L-1。根据其形态特征、生理生化特性以及16S rRNA基因序列分析结果,确定HJ21菌株为热球菌属(Thermococcus)。该菌株能产生高热稳定的高温α-淀粉酶、普鲁兰酶、α-葡萄糖苷酶和蛋白酶,这些酶的最适作用温度分别为95、95、100和100℃,α-淀粉酶、普鲁兰酶和α-葡萄糖苷酶在90℃的半衰期分别为5、5和2 h;...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
刘姝 陆兆新 吕凤霞 别小妹 房耀维 丁重阳
从连云港海域潮间带采集的样品中筛选得到1株产广谱、高活性抗菌物质的放线菌GB-2。该菌对藤黄微球菌、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等5种革兰氏阳性菌,大肠杆菌、荧光假单胞菌等4种革兰氏阴性菌及扩展青霉、黄曲霉、点青霉、犁头霉、番茄灰霉、小麦赤霉病菌、香蕉炭疽病菌、棉花枯萎病菌、稻瘟病菌等18种真菌有显著拮抗作用。根据其形态特征、培养特征、生理生化特性和16S rRNA序列分析结果,确定其为弗氏链霉菌变种。菌株GB-2所产抗菌物质的稳定性研究表明,该物质在121℃pH 1和pH 12条件下抑菌活性均不变;紫外线照射不影响其抗菌活性。结果揭示该菌在生防、食品及医药方面有潜在的应用价值。
关键词：
链霉菌GB-2 鉴定 抗菌活性 稳定性
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
赵子如 梅琴 高雅英 虞方伯 沈标
从云南腾冲眼镜泉中分离到1株嗜热厌氧的杆状细菌185y2。根据其生理生化特征和16S rDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为嗜热厌氧杆菌属Therm oanaerobactersp.。该菌的最适生长pH值和温度分别为7.0和70℃,具有水解淀粉的能力。从185y2的基因组DNA中扩增出高温淀粉酶结构基因,序列分析表明,它与中温菌的淀粉酶基因亲缘关系较远。克隆其耐高温淀粉酶基因,并构建重组表达载体,最终在E.coliBL21中得到了高效表达。
关键词：
嗜热厌氧菌 分离 鉴定 高温淀粉酶
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
余能富 吴祖建 黄一帆 刘斌
以羧甲基纤维素钠为唯一碳源,从福州永泰温泉分离到1株降解纤维素的嗜热菌YT-40-1,经过形态观察和ITS rD-NA序列比较分析,初步鉴定为近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis).菌株YT-40-1在初始pH为4.0、温度为50℃、接种量为10%、摇床转速为200 r.min-1的条件下在培养基中培养72 h,总酶活力达到最大.
关键词：
降解纤维素 嗜热菌 产酶条件
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
汪春蕾 赵敏 杨洪一 崔岱宗 李泰仑 李德斌 张宁
利用铜离子作为筛选剂,从凉水国家级自然保护区的土样中分离纯化出一株具有高漆酶活性的细菌。通过形态学观察、生理生化特性测定及16S rDNA序列分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为B.subtilisWD23。根据GenBank上公布的Bacillus subtilis cotA基因序列设计引物,克隆B.subtilis WD23的cotA基因,并采用pET--22b(+)/E.coli BL21(DE3)系统进行诱导表达,测定工程菌株发酵液的粗提液的漆酶活性达到1700U/mL,表明该菌株漆酶活性来源其芽孢。用固定化的B.subtilis WD23芽孢处理造...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
吴翔 陈强
从高温稻草堆肥中分离到一株能耐高温的放线菌DY19,分别对其表型特征、细胞化学组分特征和16S rRNA基因序列进行了分析,根据实验结果,初步认为DY19属于热多孢菌属。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
刘建玲 雷毅 阴耀邦 王高学
【目的】从温泉的底泥中分离、鉴定能产生免疫增强活性胞外代谢产物的嗜高温菌,并对其胞外代谢产物的免疫增强活性和抗病性进行研究。【方法】通过菌株个体形态、菌落形态和生理生化特性,初步排除从陕西西安东大温泉的底泥分离菌株中的重复菌株;以白细胞吞噬活性、白细胞杀菌活性、血清溶菌酶和血清SOD活性为指标进一步筛选获得目的菌株,采用个体形态、群落形态、生理生化特性和分子生物学方法对目的菌株进行初步鉴定;通过大孔吸附树脂浓缩活性成分,硅胶柱层析,以白细胞吞噬活性、白细胞杀菌活性、血清溶菌酶和血清SOD活性、免疫相关基因转录水平和免疫保护率为参考指标,活性追踪分离获得该菌株的主要活性物质。【结果】筛选到1株嗜...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
熊艳 张晓喻 李敏 黄春萍 刘刚 张宏
从农田土壤中分离得到1株对多种植物病原真菌有拮抗作用的菌株Loq18,经生理生化及分子鉴定确定为一株枯草芽孢杆菌,其无菌发酵液经硫酸铵沉淀得抗菌粗蛋白。为明确此抗菌粗蛋白的理化性质,研究了温度、pH变化、UV照射、有机溶剂和蛋白酶对抗菌蛋白稳定性的影响。结果表明,该抗菌粗蛋白具有良好的热稳定性,121℃高压灭菌处理20 min后仍具有对照活性的95%以上;对酸碱不敏感,在pH值4～11范围内相对稳定;对紫外线稳定,在紫外光下照射10 h以上时,其活性基本不受影响;经乙醚、丙酮等有机溶剂处理后仍具有对照活性的90%以上;对蛋白酶较稳定。
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙佑赫 周开艳 熊智
利用纯培养和碘液显色从松毛虫幼虫肠道中分离筛选得到一株产α-淀粉酶细菌2N02,通过16S rDNA序列比对,鉴定为枯草芽孢杆菌。摇瓶发酵后,产生的α-淀粉酶酶活力20.0 U/mL;经硫酸铵沉淀、透析脱盐后,初步研究酶学性质,测得酶反应最适温度50℃,最适pH值6.5,Mg2+、Ca2+对酶具有激活作用,Zn2+和EDTA则抑制酶活性。研究表明,该菌株是产α-淀粉酶较好的材料,具有一定的应用前景。
关键词：
α-淀粉酶 鉴定 酶学性质
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
任大明 赵钰 白炜琪 陈红漫 阚国仕 佡思涵 张聪
为探究产纤维素酶放线菌的生物学特征及其酶学性质，从土壤中筛选产纤维素酶放线菌，试验采用平板稀释法并结合刚果红染色法对土壤中的纤维素分解菌进行初筛，通过酶活测定复筛，筛得产纤维素酶能力较高的放线菌一株，对该菌株进行形态学、分子生物学及生理生化鉴定，并对酶学性质进行研究。结果表明：该菌在液体发酵中的内切酶、外切酶、β－葡萄糖苷酶及滤纸酶活分别为３０．０６，１０．４０，８．０５和１３．８８Ｕ·ｍ Ｌ～（－１）；通过对该菌株基因组中编码１６Ｓ ｒ ｒＮＡ的ＤＮＡ序列测序，得到一段１４０１ｂｐ的碱基序列，通过进化树分析可确认该菌为链霉菌属；在酶学性质研究中，该菌所产内切酶、外切酶、β－葡萄糖苷酶及滤纸酶．．．
关键词：
纤维素酶 放线菌 筛选鉴定 酶学性质
[期刊] 中国农业科学
[作者]
何璐 纪明山 王勇 徐洪波 齐补坤
【目的】分离药用植物苦参内生真菌,明确其抑菌特性,确定内生真菌BS001发酵产生抗菌物质的种类及结构。【方法】采用常规的组织分离法对内生真菌进行分离,平板菌块法测定抑菌特性,捷克八层析试验确定其极性,柱层析及冷冻干燥的方法对其分离纯化,并利用TLC生物自显影进行跟踪,采用高效液相色谱法(HPLC)测定其纯度,1H-NMR、13C-NMR以及液相色谱-质谱(LC-MS)等方法对其进行结构鉴定。【结果】从苦参种子中分离出1株内生真菌菌株,编号为BS001。该菌株对辣椒疫霉病菌、番茄炭疽病菌、油菜菌核病菌、苹果斑点落叶病菌等病原菌具有抑制效果,其中对番茄炭疽病菌的抑菌直径达2.734 cm。其发酵液...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
翟熙伦 杨金广 申莉莉 钱玉梅 王盼 孙丽萍 王惠卿 赵洪东 王永 王凤龙
【目的】筛选对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)具有显著拮抗活性的菌株。【方法】从山东诸城等植烟区采集烟草病毒病高发区健康烟株中烟100(Nicotianatabacum var.Zhongyan 100)的根际土壤,分离抗TMV的活性菌株,通过生理生化测定和分子鉴定确定菌株。采用Real-time PCR技术定量检测该菌株对TMV和PVY的抑制作用进一步验证该菌株的抗病毒活性。田间试验进行3个处理,菌液与病毒混合,2 h后接种(I),喷菌液2 h后接种病毒汁液(II),接种病毒汁液2 h后喷施菌液(III),...
[期刊] 海洋渔业
[作者]
张晓玲 陆亚男 樊成奇 马丽艳 蒋平 俞勇 黄洪亮 陈雪忠 杨桥
从采集自南极FAO 48.1海域海水样品中分离纯化到一株产吡咯喹啉醌(PQQ)海洋细菌,对其进行了细菌分类学鉴定、摇瓶培养发酵、发酵产物提取及HPLC定量分析,并对纯化的PQQ进行了针对一氧化氮(NO)抑制活性及羟自由基(.OH)清除抗氧化活性评价。结果表明,该菌株与副球菌属(Paracoccus sp.)内菌株的16S rRNA基因序列同源性较高。综合多个分类学指标的分析结果,将其鉴定为属于副球菌属,命名为Paracoccus sp.PQ-08。生物活性评价结果表明,PQQ可显著抑制人脐静脉内皮(ECV-304)模式细胞内诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在mRNA转录水平及蛋白水平的表达量,...
关键词：
南极洲 海洋细菌 分离 鉴定 生物活性
[期刊] 水产学报
[作者]
卢斌 柯才焕 杨明 康康 赵晶
琼胶酶在多糖降解应用中的作用日益重要,而从海洋微生物中筛选琼胶酶高产菌株成为一个重要途径。本研究从养殖的杂色鲍体内分离到一株高产琼胶酶的菌株MA-B22。该菌为革兰氏阴性菌,经16S rRNA序列鉴定表明,与Tamlana agarivorans sp.nov.具有99%同源性,因此初步定为Tamlana sp.。在2216E培养基中该菌株在培养时间60h,温度25℃,起始pH为6.0条件下产酶活性最高。基于上述培养条件,通过单因素和正交实验确定了培养基的最佳基本组成:氮源为牛肉膏(其最适浓度为6.0‰),碳源为琼脂(其最适浓度为2.5‰),配制培养基的人工海水的最适盐度为25。经培养条件优化...
关键词：
琼胶酶 酶活力 培养基
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李永胜 胡军华 姚廷山 李鸿筠 冉春 刘浩强 张弼
从柑桔园采集柑桔叶片,土壤和果实样品,通过CMC-Na平板初筛及酶活性复筛,得到1株产纤维素酶能力较强的细菌SB3。该菌株来自土壤,为革兰氏阴性杆状细菌;菌落白色,不产生色素。SB3菌株的最适生长温度为37℃,最适生长pH为7.5。根据菌株形态特征、生理生化特性和16SrDNA序列测定结果鉴定为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)。菌株SB3纤维素酶最适作用温度和pH分别为50℃和8.0,具有潜在的工业应用价值。
关键词：
纤维素酶 微生物 筛选鉴定
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