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为了对一株大型野生真菌进行分离及鉴定,通过组织分离获得该野生菌的菌丝纯培养物,分别提取子实体及菌丝体的基因组DNA,并以此为模板进行ITS片段的扩增、测序及系统发育分析。结果表明,从菌丝体和子实体中菌扩增获得了750 bp左右的ITS片段,经序列测定表明,菌丝纯培养物来源于该子实体,比对结果表明,该真菌属于Agaricus属,GenBank登录号为JN907015。系统发育分析表明了该菌在属内的遗传地位。建立了野生大型真菌的鉴定方法,为该野生资源的利用奠定了基础。

关键词：蘑菇属分离鉴定 ITS

一株脱氧雪腐镰刀菌烯醇转化菌的分离、鉴定及其转化效果研究

[期刊] 南京农业大学学报 [作者] 何成华樊彦红刘国芳张海彬

以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)为唯一碳源,通过富集培养从土壤中分离到一株可以转化DON的真菌,命名为NJA-1。用引物Bt2a、Bt2b扩增了该菌的β-tubulin基因序列,GenBank的登录号为DQ902579。通过基因序列分析和形态学观察最终鉴定该菌株为塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)。该菌与塔宾曲霉AY820009的同源性为99%。在pH6.0、30℃、14 d内其对DON的平均转化率为94.4%。HPLC-MS分析结果表明,DON转化产物的相对分子质量为314.4,比DON的相对分子质量(296.3)增加了18.1。该菌在无机...

关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇生物转化分离鉴定 β-tubulin基因塔宾曲霉

一株旱稻联合固氮菌株的分离鉴定及促生作用研究

[期刊] 西南农业学报 [作者] 胡应平林冬梅胡弘正吴颖林佳丽林占熺刘斌

【目的】旱稻是一种重要的种质资源，对成熟期旱稻根系内生固氮菌进行筛选与鉴定，以获得对旱稻有较好促生作用的菌株。【方法】采用联合固氮固体培养基培养方法。从成熟期旱稻根系中分离出内生固氮菌，通过扩增固氮酶nifH基因和16S rRNA基因方法进行分子鉴定和系统进化分析；通过生化指标的测定和形态学的鉴定；采用透明圈法进行溶磷、产铁载体能力验证；以褐球固氮菌为阳性对照，利用ELISA测定试剂盒测定菌株分泌固氮酶活性、1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)脱氨酶，采用Salkowski比色法测定生长素（IAA）含量，并研究其生长特征。将分离的固氮菌株以1%浓度（约8×10~(7)CFU/mL）浸泡旱稻谷种进行催芽，研究其促生效果。【结果】分离的菌株URR45为固氮菌，属于嗜温型微生物，最适生长温度为32～50 ℃，最适pH为6.0～6.5，不耐盐。其分泌的固氮酶含量为220.15 U/L，ACC含量为898.69 ng/mL，生长素含量为14.91 mg/L，固氮酶含量和ACC含量显著高于对照组褐球固氮菌。该菌株能够利用葡萄糖、麦芽糖等碳源，属于发酵型细菌，具有水解明胶、溶磷和产铁载体特性。该菌株经16S rRNA基因测序后通过NCBI BLAST比对，鉴定为Herbaspirillum＿seropedicae，隶属于Pseudomonadota门、Betaproteobacteria纲、Burkholderiale目、Oxalobacteraceae科、 Herbaspirillum属，革兰氏染色呈紫色。促生试验结果表明，在主根长度、侧根长度以及测根数方面均显著高于对照组。【结论】该菌株对旱稻幼苗具有一定的促生作用，在农业上产上可作为功能性内生固氮菌开发利用。

关键词：旱稻联合固氮菌菌株鉴定固氮能力促生作用

一株黄颡鱼源迟缓爱德华氏菌弱毒株的分离鉴定及特性分析

[期刊] 淡水渔业 [作者] 靳洪振王玲玲吴亚鑫彭康尧袁汉文雷连成张付贤

为探明湖北荆州市某养殖基地患病黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)以烂身、腹水为主要症状且持续性死亡的确切病因，本研究对患病黄颡鱼进行了病原筛查，从患病黄颡鱼组织中分离到一株优势菌，经过形态特征、生理生化鉴定、16S rRNA测序和系统进化分析确定分离菌株为迟缓爱德华氏菌，命名为Et-4。结果显示：分离菌株Et-4具有较强的生物被膜形成能力，不携带esaV、fimA、gadB和katB四种主要的毒力基因。分离菌株Et-4人工感染健康黄颡鱼出现与自然发病类似的症状，并能从病鱼中再次分离出该菌，证实迟缓爱德华氏菌是引起此次黄颡鱼持续性死亡的致病原；分离菌株Et-4对黄颡鱼的LD_(50)为3.9×10~6 CFU/g,结合毒力基因谱判定其为弱毒株。分离株Et-4携带耐药基因tet A、sulⅠ和add A1,对头孢类药物、庆大霉素、新霉素等敏感；对四环素类、青霉素类、万古菌素等耐药；中药抑菌实验表明乌梅和丁香对迟缓爱德华氏菌Et-4有明显的抑制效果。

关键词：黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco) 迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda) 分离鉴定耐药基因药敏实验中药

一株高氨氮去除能力菌株的分离筛选及鉴定

[期刊] 华北农学报 [作者] 张峰峰谢凤行周可孙海波赵玉洁

为研究利用微生物方法解决养殖水体中氨氮污染的问题,从水产养殖环境中分离出31株氨氮去除菌,并从中筛选出具有较强氨氮去除能力的菌株AD-8,对其脱氮能力进行测定。结果表明,在培养基中氨氮浓度高达200mg/L时,AD-8菌株对其去除率均达86%以上,15℃下,48 h AD-8对氨氮的去除率可以达到91.2%;在模拟养殖水体中,AD-8氨氮去除率也可达90%。通过形态学特性、生理生化鉴定及16S rDNA序列分析,菌株AD-8初步鉴定为嗜碱假单胞菌(Pseudomonas alcaliphila)。

关键词：氨氮去除能力分离鉴定 16S rDNA 嗜碱假单胞菌

一株菌草内生细菌的分离鉴定及促生特性

[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版) [作者] 邵登科吕正阳李望豪周瑞鹏赖泽成张春源樊改丽王荣波林占熺鲁国东叶文雨

通过研磨组织、稀释分离等方法，从巨菌草的健康叶片中分离、筛选出1株具有溶磷和分泌吲哚乙酸能力的内生细菌，命名为FJU3,并对其生理生化特性、16S rDNA序列进行测定和分子生物学鉴定，也研究了其对盆栽玉米的促生效果.结果表明：菌株FJU3具有一定的溶磷能力，其分泌吲哚乙酸的质量浓度达到了14.2 mg·L~(-1),且显著高于其他菌株；经形态特征和分子生物学鉴定该菌株为解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus);菌株FJU3在产铁载体、接触酶、解硅酸盐等生理生化特性试验中均为阳性反应；玉米盆栽促生试验结果表明，促生效果比较显著的是地上部鲜质量和株高，与对照组相比，分别增加了76%和41%.

关键词：巨菌草内生细菌生理生化特性促生效果

一株多重耐药中华鳖源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定

[期刊] 淡水渔业 [作者] 毛烁君斯广杰任晓金石婷婷章烨王卓瑞章晓栋

从患典型鳃腺炎病中华鳖(Pelodiscus sinensis)肝脏和腹水处进行细菌接种,分离获得一株细菌。综合菌落形态,16 S rRNA序列进化分析和API细菌生化鉴定系统判定,所得菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)(SX43)。动物回归实验显示,分离株对小鼠的半数致死量(LD50)为106.5CFU,显示该菌株具有较强的致病性,可从实验幼鳖体内再次分离到相同的病原菌。常用药物的抗菌敏感性测定显示,菌株SX43对头孢哌酮、头孢曲松、头孢呋辛、复方新诺明、氯霉素高度敏感。

关键词：中华鳖(Pelodiscus sinensis) 弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii) 16 S rRNA

一株溴氰菊酯降解菌的分离鉴定及降解特性研究

[期刊] 淡水渔业 [作者] 苏志俊刘永涛徐春娟丁浩余琳雪艾晓辉

为建立有效地去除淡水养殖环境中溴氰菊酯残留的微生物修复技术,通过采集长期受菊酯类农药污染土壤样品,以溴氰菊酯为唯一碳源配制基础盐培养基对土样进行富集培养,筛选分离出1株溴氰菊酯降解菌(SW),根据形态、生理生化分析及16S rRNA序列分析,将其鉴定为多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium multivorum)。通过改变温度、pH、接种量、药物初始浓度等外部条件研究菌株最适降解条件。结果显示:在pH为7的基础盐培养基中,30℃、180 r/min摇床培养120 h,SW对1.0 mg/L溴氰菊酯的降解率达76.4%。溴氰菊酯可作为该菌生长的唯一碳源。SW降解溴氰菊酯的最优条件为30℃、pH 6.0、接种量4%。在溴氰菊酯浓度为0.1、0.5和1.0 mg/L时,降解过程基本符合一级动力学方程模型,降解半衰期(T_(1/2))分别为4.5、2.3和2.0 d。生物修复试验中SW对养殖淡水中0.5、5.0和50μg/L溴氰菊酯作用5 d后的降解率为21.6%,26.4%和53.8%。

关键词：溴氰菊酯多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium multivorum) 微生物修复

一株产α-淀粉酶细菌的分离、鉴定及酶学性质初步研究

[期刊] 华北农学报 [作者] 孙佑赫周开艳熊智

利用纯培养和碘液显色从松毛虫幼虫肠道中分离筛选得到一株产α-淀粉酶细菌2N02,通过16S rDNA序列比对,鉴定为枯草芽孢杆菌。摇瓶发酵后,产生的α-淀粉酶酶活力20.0 U/mL;经硫酸铵沉淀、透析脱盐后,初步研究酶学性质,测得酶反应最适温度50℃,最适pH值6.5,Mg2+、Ca2+对酶具有激活作用,Zn2+和EDTA则抑制酶活性。研究表明,该菌株是产α-淀粉酶较好的材料,具有一定的应用前景。

关键词： α-淀粉酶鉴定酶学性质

一株产纤维素酶放线菌的分离鉴定及酶学性质研究

[期刊] 沈阳农业大学学报 [作者] 任大明赵钰白炜琪陈红漫阚国仕佡思涵张聪

为探究产纤维素酶放线菌的生物学特征及其酶学性质，从土壤中筛选产纤维素酶放线菌，试验采用平板稀释法并结合刚果红染色法对土壤中的纤维素分解菌进行初筛，通过酶活测定复筛，筛得产纤维素酶能力较高的放线菌一株，对该菌株进行形态学、分子生物学及生理生化鉴定，并对酶学性质进行研究。结果表明：该菌在液体发酵中的内切酶、外切酶、β－葡萄糖苷酶及滤纸酶活分别为３０．０６，１０．４０，８．０５和１３．８８Ｕ·ｍＬ～（－１）；通过对该菌株基因组中编码１６ＳｒｒＮＡ的ＤＮＡ序列测序，得到一段１４０１ｂｐ的碱基序列，通过进化树分析可确认该菌为链霉菌属；在酶学性质研究中，该菌所产内切酶、外切酶、β－葡萄糖苷酶及滤纸酶．．．

关键词：纤维素酶放线菌筛选鉴定酶学性质

一株产漆酶细菌的分离、鉴定及对造纸黑液处理的初步研究

[期刊] 北京林业大学学报 [作者] 汪春蕾赵敏杨洪一崔岱宗李泰仑李德斌张宁

利用铜离子作为筛选剂,从凉水国家级自然保护区的土样中分离纯化出一株具有高漆酶活性的细菌。通过形态学观察、生理生化特性测定及16S rDNA序列分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为B.subtilisWD23。根据GenBank上公布的Bacillus subtilis cotA基因序列设计引物,克隆B.subtilis WD23的cotA基因,并采用pET--22b(+)/E.coli BL21(DE3)系统进行诱导表达,测定工程菌株发酵液的粗提液的漆酶活性达到1700U/mL,表明该菌株漆酶活性来源其芽孢。用固定化的B.subtilis WD23芽孢处理造...

关键词：枯草芽孢杆菌芽孢蛋白漆酶造纸黑液废水处理

一株高效好氧反硝化细菌的分离与鉴定

[期刊] 上海海洋大学学报 [作者] 彭志兰柳敏海郭海波罗海忠薛超波吴益春罗海军夏枫峰

采用选择性培养基通过定量增加亚硝酸盐含量来富集筛选好氧反硝化细菌,经过选择性培养基初步筛选,测定NO-2-N与NO-3-N的去除率,再通过反硝化培养基复筛选出同时具有去除NO-2-N与NO-3-N能力的目的菌。通过16S rRNA基因序列分析及同源性比对以及与其他已筛选出的部分硝化细菌与反硝化细菌的比对构建系统发育树,结合菌株的生理生化鉴定试验,鉴定出目的菌株。在好氧、28℃培养条件下,在反硝化培养基中,该菌株5 d内将NO-2-N由3 570 mg/L降至22 mg/L,去除率达99.4%,将与NO-3-N由2 464 mg/L降至27 mg/L,去除率达98.9%。通过形态学、生理生化反应...

关键词：好氧反硝化细菌筛选鉴定阴沟肠杆菌

一株产聚谷氨酸芽孢杆菌的分离与鉴定

[期刊] 中国农业大学学报 [作者] 惠明马晓娜贾洁牛天贵

从超高压灭菌的瓜汁中筛选出 1株产高分子聚合物的芽孢杆菌B53 。经紫外扫描、高效液相色谱分析及SDS PAGE分子量表征 ,确定该高分子是由谷氨酸单一成分组成的聚合物 ,最大吸收波长为 2 12nm ,分子质量集中在 5 70～ 6 6 9ku ,呈多分子质量聚集体形式 ,不具备典型肽或蛋白质特征。依据B53 的菌株形态、生理生化特征、G +C含量 (摩尔分数 )及 16SrRNA基因序列分析结果 ,将芽孢杆菌B53 菌株鉴定为枯草芽孢杆菌。

关键词：芽孢杆菌聚γ-谷氨酸分离鉴定

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