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[期刊] 中国农业科学
[作者]
丁家波 王芳 杨宏军 王楠 朱良全 顾进华 张广川 王海光 赵鹏 程君生 毛开荣 冯宇
【目的】对初步鉴定的牛种布鲁氏菌分离株(B.abortus 343)进行全面的生物学特性检定,为深入研究布鲁氏菌病提供参考菌株。【方法】将B.abortus 343划线培养及梯度稀释,使其形成单个菌落,观察菌落形态。挑取单个菌落进行革兰氏染色和柯氏染色,观察其染色特点;分别接种1.5×106 CFU到含硫瑾(1﹕25 000)或含碱性复红(1﹕25 000)的TSA平板上,观察其生长状态;将接种有B.abortus 343的TSA平板分别置于普通培养箱和CO2培养箱37℃培养72 h,观察其对CO2的依赖性;通过醋酸铅试纸条测定B.abortus 343代谢过程中是否释放H2S。通过平板凝集试...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张剑 马卫明 张亮 何洪彬 丁家波 杨宏军
【目的】布鲁氏菌virb8蛋白是布鲁氏菌的重要毒力因子,本研究拟构建含布鲁氏菌Virb8基因的原核表达载体,利用纯化蛋白作为包被抗原,建立检测牛布鲁氏菌血清抗体的间接ELISA方法(iELISA)。【方法】根据GenBank中的牛型布鲁氏杆菌Virb8序列,设计一对引物,以布鲁氏菌疫苗株S2全基因组DNA为模板扩增Virb8的基因,将目的基因克隆入PEASY-T3,经测序正确后,与载体pET-32a(+)连接,构建重组表达质粒pET-32a-Virb8,转化E.coli BL21(DE3),诱导表达融合蛋白pET-32a-Virb8,经SDS-PAGE及Western-blot分析鉴定后,采用...
关键词：
布鲁氏菌 Virb8 间接ELISA
[期刊] 中国农业科学
[作者]
曹伟平 丰硕 程佳旭 陈丹 吴青君 宋健
【目的】基于金龟子类害虫种类繁多、危害严重的现状以及农业对具有生态友好、可持续治理特点的生物防治的迫切需求，研究布氏白僵菌（Beauveria brongniartii）菌株JG-17对我国3种重要金龟子幼虫和成虫的毒力，为金龟子生防制剂的研发提供优良的菌种资源。【方法】采用稀释挑取法和病原菌回接法，在感病金龟子成虫虫尸上分离获得高毒力病原真菌；通过形态学与rDNA-ITS基因序列分析确定菌株JG-17的分类地位；采用十字交叉测量法和血球计数板法测定不同温度下菌株JG-17的生长速率和产孢量；采用浸渍法测定菌株JG-17对华北大黑鳃金龟（Holotrichia oblita）、暗黑鳃金龟（Holotrichia parallela）和铜绿丽金龟（Anomala corpulenta）成虫和幼虫的毒力；通过盆栽试验测定菌株JG-17对暗黑鳃金龟2龄幼虫的防治效果。【结果】分离获得一株对3种金龟子成虫和幼虫同时具有较高毒力的白僵菌菌株JG-17，结合形态学和rDNA分子鉴定结果，确定菌株JG-17为布氏白僵菌。25—29℃为JG-17的适宜生长温度，生长速率均在4 mm·d~(-1)以上，27℃下，JG-17的生长速率和产孢量最高。JG-17 1×10~8个孢子/mL处理浓度下，华北大黑鳃金龟、铜绿丽金龟和暗黑鳃金龟成虫13 d累计死亡率分别为78.0%、100.0%和86.0%,LT50分别为9.458、6.911和8.391 d。相同处理浓度下，JG-17对暗黑鳃金龟幼虫的毒力高于铜绿丽金龟和华北大黑鳃金龟，1×10~8个孢子/mL浓度下，华北大黑鳃金龟、铜绿丽金龟和暗黑鳃金龟1龄幼虫13 d的累计死亡率分别为76.7%、96.7%和100.0%,2龄幼虫13 d的累计死亡率分别为66.7%、36.7%和100.0%；不同孢子浓度下，对暗黑鳃金龟1龄和2龄幼虫的LT50均明显低于铜绿丽金龟和华北大黑鳃金龟。盆栽试验中，相同施用剂量下，中耕期淋灌处理的暗黑鳃金龟幼虫死亡率与沟施处理的幼虫死亡率差异不显著，播种前撒施方式下取得相近的防治效果需要10倍以上的孢子量。【结论】布氏白僵菌JG-17对华北大黑鳃金龟、暗黑鳃金龟和铜绿丽金龟成虫和幼虫均具有较高致死率，对防治金龟子类地下害虫具有较大的开发应用潜力。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
索朗斯珠 曾群辉 查果 刘慧文 夏业才
从自然病死的西藏牦牛的心、肝、脾、肾、淋巴结与血液病料中分离到128株疑似大肠杆菌,鉴定结果表明,有32株为大肠埃希氏菌,其中的10株菌有致病性;在这10株中3株毒力较强,为产毒性大肠埃希氏菌,致病率达90%以上,其余7株中等毒力,致病率达50%。首次鉴定出牦牛大肠杆菌血清型有18种:O142,O148,O158,O26,O43,O159,O39,O108,O91,O21,O14,O13,O36,O88,O24,O18,O68和O25。3株毒力较强菌株的血清型鉴定结果表明,1号菌株为O148,O142,O158混合型;2号菌株为O26,O148,O142,O158混合型;30号菌株为O26,O...
[期刊] 林业科学
[作者]
冯波 周建华 郭亨孝 刘应高 肖育贵
从蜀柏毒蛾暴发种群中发现大量虫体萎缩、体色变红的感病现象。经采集、分离得到一株病原菌,其纯培养物的致病性被科赫原理证明。经生理生化测定和分子鉴定,确定此病原菌为缺陷假单胞菌。通过室内感染测定该菌对蜀柏毒蛾2龄幼虫的毒力,毒力回归方程为Y=-9.7851+6.667X,致死中含量LC50=9.28×108cfu.mL-1。室内和林间感染试验表明:该病原对感染幼虫具有明显的抑食作用,未死亡残存种群在体长、体质量、羽化率、怀卵量和卵的孵化率方面都显著低于对照。
关键词：
无芽孢杆菌 蜀柏毒蛾 毒力研究
[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨敬辉 陈宏州 肖婷 吴祥 吉沐祥 庄义庆
为探明草莓炭疽病病原及不同杀菌剂对草莓炭疽病菌的室内抑菌活性，对分离自江苏省句容市的一株草莓炭疽病病原进行形态特征观察、致病性测定和分子鉴定，并采用菌丝生长速率法测定了１２种杀菌剂对该病原菌的室内毒力。结果表明，该病原为围小丛壳菌（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ ｃｉｎＧｕｌａｔａ）；咪鲜胺、氟硅唑、丙环唑、氟环唑、苯醚甲环唑、戊唑醇、烯唑醇、吡唑醚菌酯、己唑醇、腈菌唑、多菌灵和啶酰菌胺对草莓炭疽病菌的ｅｃ５０值分别为０．０５４４、０．４２２０、０．６８３１、０．７１１２、０．８０８３、１．２６５２、１．３５６０、１．９１７６、２．２５５９、７．５８３４、１４．３５２２和１６．８１４０μＧ·ｍ ｌ－１。．．．
关键词：
草莓炭疽病菌 病原鉴定 杀菌剂 毒力测定
[期刊] 西南农业学报
[作者]
何劲 康冀川 雷帮星 文庭池
为筛选出对小菜蛾具有强毒力的菌株,对采自不同地方被真菌侵染死亡的68头昆虫上分离出的62株虫生真菌,再以小菜蛾(Plutella xylostella)为试验昆虫,从中选出14株生长快、产孢多的菌株进行毒力测定。结果表明:14株真菌对小菜蛾均有致病性,但不同菌株对蚜虫的毒力存在明显差异,毒力最强的为11号、12号和13号菌株,在1.5×107个孢子/mL下,对小菜蛾的校正死亡率高达96%、98%和98%。
关键词：
虫生真菌 小菜蛾 毒力
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
阮柳 马占鸿 刘振宇 秦丰 王海光
为了解河北苜蓿根腐病病原种类，以便有目的地加以防治，对从河北采集的苜蓿根腐病样品进行了病原分离、鉴定以及致病性和室内毒力测定。根据形态学和核糖体内转录间隔区ＩＴＳ４和ＩＴＳ５、延伸因子ＥＦ－１Ｈ和ＥＦ－２Ｔ序列作为引物鉴定，分离出的７１株致病菌株均为镰孢菌属（ＦｕＳａｒＩｕｍ），其中，木贼镰孢（Ｆ．ＥｑｕＩＳＥＴＩ）５５株，尖孢镰孢（Ｆ．ｏｘｙＳｐｏｒｕｍ）７株，层出镰孢（Ｆ．ｐｒｏｌＩＦＥｒａＴｕｍ）６株，变红镰孢（Ｆ．ＩｎｃａｒｎａＴｕｍ）２株，茄镰孢（Ｆ．ＳｏｌａｎＩ）１株。尖孢镰孢菌株Ｄ１９－２、层出镰孢菌株Ｓ４５和茄镰孢菌株ｑ１的致病性最强。通过含毒介质法测定，结果表明，４０％腈菌唑．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
王巧煌 林楠 元丽花 季静 林丹
为探明2021年3月福建某水库养殖大口黑鲈疾病暴发的原因，实验从患病大口黑鲈肝脏、肾脏、脾脏中分离优势菌，通过人工感染实验确定病原菌，并综合16S rDNA基因序列分析、生理生化和质谱特征等技术对该病原菌进行种属鉴定，同时，进行毒力基因检测、药物敏感性实验以及组织病理学观察。结果显示，从病鱼脾脏中分离获得1株优势菌并鉴定为鲁氏耶尔森氏菌；该菌株对大口黑鲈的半致死剂量为3.8×10~5 CFU/尾；该菌株携带yrP1、yhl A、yhl B等毒力基因，对恩诺沙星、盐酸多西环素、氟甲喹、硫酸新霉素、氟苯尼考等5种药物相对敏感。组织病理学观察发现，鲁氏耶尔森氏菌的感染造成大口黑鲈肝脏、肾脏、脾脏不同程度的损伤，表现为明显的变性、坏死及炎症细胞的浸润等。本研究首次报道了鲁氏耶尔森氏菌对养殖大口黑鲈的致病性，可为养殖大口黑鲈鲁氏耶尔森氏菌病的诊断和药物防治提供参考依据。
[期刊] 华北农学报
[作者]
李华 顾才东 高玉凤 王素玲
2003-2006年对宁夏稻瘟病菌群体分布及优势小种的毒力研究,分别采用了3套鉴别品种,即用7个中国统一的鉴别品种、12个日本清泽鉴别品种、33个菲律宾国际水稻所已知单基因系,分析近几年宁夏生理小种的种类和优势小种。经测定宁夏有3群9个中国小种,ZA1,ZC17,ZC7小种为优势小种;根据稻瘟病菌与日本12个已知抗病基因品种互作亲和性的结果,区分为18个毒性类型,其中637小种出现频率最高,分布广且毒力频率高,成为宁夏的优势小种。该小种的毒力谱很广,能侵染除Pi-z,Pi-ta,Pi-b基因外的大多数已知抗性基因,中国小种ZC17及637小种是目前宁夏水稻生产上值得密切关注的小种之一。
关键词：
稻瘟病菌 生理小种 分布 毒力
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
李石磊 刘君昂 赵莹 路宗岩
油茶为我国南方主要的油料作物,近年来油茶病害发生越来越严重,而且由于油茶病害发病时期不同以及各种病原菌抗病性的不同,无形中增加了杀菌剂的喷洒次数,并浪费了大量的人力物力,因此有必要从市面常见的杀菌剂中筛选出一种高效广谱的杀菌剂来更好的防治油茶病害。本文通过菌丝生长速率法来测定所选择的6种杀菌剂对3种油茶病害的室内毒力效果,结果显示苯甲咪鲜胺对3种病原菌的抑制效果最好,对3种病原菌的EC50分别为炭疽病菌1.86 mg/L、叶枯病菌1.98 mg/L、软腐病菌0.41 mg/L,EC50值均为6种杀菌剂最低。课题的研究可能为防治油茶病害提供了用药参考,具有潜在的参考价值。
关键词：
油茶 杀菌剂 室内毒力测定 EC50
[期刊] 水产学报
[作者]
王巧煌 林楠 元丽花 季静 林丹
为探明2021年3月福建某水库养殖加州鲈疾病暴发的原因，实验从患病加州鲈肝脏、肾脏、脾脏中分离优势菌，通过人工感染实验确定病原菌，并综合16S rDNA基因序列分析、生理生化和质谱特征等技术对该病原菌进行种属鉴定，同时，进行毒力基因检测、药物敏感性实验以及组织病理学观察。结果显示，从病鱼脾脏中分离获得1株优势菌并鉴定为鲁氏耶尔森菌；该菌株对加州鲈的半致死剂量为3.8×10~(5) CFU/尾；该菌株携带yrP1、yhlA、yhlB等毒力基因，对恩诺沙星、盐酸多西环素、氟甲喹、硫酸新霉素、氟苯尼考等5种药物相对敏感。组织病理学观察发现，鲁氏耶尔森菌的感染造成加州鲈肝脏、肾脏、脾脏不同程度的损伤，表现为明显的变性、坏死及炎症细胞的浸润等。本研究首次报道了鲁氏耶尔森菌对养殖加州鲈的致病性，可为养殖加州鲈鲁氏耶尔森菌病的诊断和药物防治提供参考依据。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
胡梦华 马立才 赵姝 刘旭 周俊芳 房文红
从发病的凡纳滨对虾中分离并经鉴定得到一株溶藻弧菌（命名为：Ｖ＿Ａ－７６），通过对虾回感实验和药物敏感性实验分别对Ｖ＿Ａ－７６菌株的耐药表型和致病能力进行了研究，并运用ＰＣＲ方法检测了该菌的毒力相关基因、整合子和耐药基因的携带情况。对虾感染实验结果表明，溶藻弧菌Ｖ＿Ａ－７６能够导致凡纳滨对虾发病死亡。经ＰＣＲ检测发现，该菌携带８种毒力相关基因：ｔｄｈ、ｔｌｈ、ｔｏｘ Ｓ、ＣｏｌｌＡｇｅｎＡＳｅ、ｆｌＡ Ａ、ｏｍＰ Ｗ、ＡＳＰ Ａ和ｆｕＲ。药敏结果显示，Ｖ＿Ａ－７６对环丙沙星、氯霉素、链霉素、红霉素、磺胺甲噁唑、复方新诺明和利福平７种药物表现出较高的耐药水平，且该菌包含１类整合子、４类超级整合子Ｓ．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
陈福广 李绍戊 卢彤岩
为了深入揭示我国鱼类病原菌嗜冷黄杆菌（Flavobacterium psychrophilum，F. psychrophilum）的基因组进化及其致病机制，本实验对嗜冷黄杆菌毒力菌株CH06进行全基因组测序，比较基因组分析及其毒力相关基因的挖掘。基因组测序结果表明，CH06的基因组大小为2 836 981 bp，GC含量为32.56%，注释出2 437个编码基因。ANI分析结果显示，CH06与12株嗜冷黄杆菌的AI值均高于99%。因此，菌株CH06应属于嗜冷黄杆菌分支。基因组序列分析发现，CH06含有5个插入序列、4个基因岛和3个前噬菌体，揭示这些可移动遗传元件推动了CH06的基因组进化。系统进化树和基因组共线性分析发现，CH06与菌株CSF259-93和FPG101亲缘关系较近。分泌系统分析显示CH06中存在完整的Ⅰ型分泌系统(type I secretion system，T1SS)和Ⅸ型分泌系统 (type IX secretion system，T9SS)。我们对所有的2 437个编码蛋白分析并在CH06基因组上鉴定出27种T9SS效应蛋白。此外，CH06中还存在10个组氨酸激酶蛋白和15个反应调节蛋白。这些结果表明CH06可能存在复杂的跨膜分泌毒力因子和感知环境变化并作出反应的机制。本研究对CH06的基因组进化以及毒力相关基因进行分析，为研究我国鱼类病原嗜冷黄杆菌的进化和多样性以及致病机制提供参考。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
周而勋 王克荣 陆家云
研究栗疫病菌(Cryphonectria parasitica)弱毒力现象的最终目的是利用弱毒力菌株防治栗疫病,为此必须更多地了解弱毒力菌株的生物学性状、生理生化性状以及环境因素对弱毒力菌株扩散的影响等。研究表明,栗疫病菌的弱毒力菌株与毒力菌株在许多生物学性状上均存在差异,如菌落形态、菌落颜色、生长速率和产孢量等。目前,两类菌株在生理生化方面的研究报道较少,作者试图通过研究毒力和弱毒力菌株对高温和紫外线的耐受力以及对化学试剂的敏感性,了解其抵御不良环境的能力。
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