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为确定稻田养殖的大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)出血病病原与防治措施,应用微生物分离技术和分子生物学相关方法,对患出血病的大鳞副泥鳅进行病原菌的分离和鉴定并分析其药物敏感性。从患出血病大鳞副泥鳅中分离到3株优势菌(命名为DLFNQ-1、DLFNQ-2、DLFNQ-3);回归感染实验结果显示,仅DLFNQ-1对大鳞副泥鳅具有致病性,半致死浓度为2.3×10~7 CFU/mL;生理生化试验表明,DLFNQ-1菌株对葡萄糖、阿拉伯糖、氧化酶、七叶灵等反应为阳性,对柠檬酸、尿素酶等反应为阴性,与嗜水气单胞菌的生理生化特性相符;DLFNQ-1菌株的16S rDNA序列与嗜水气单胞菌(JN391411.1)的相似度达到99.7%,N-J进化树显示其16S rDNA与其它嗜水气单胞菌的聚为一支。DLFNQ-1菌株对庆大霉素、妥布霉素这两种抗生素高度敏感,对阿洛西林、哌拉西林、卡那霉素等中度敏感,对青霉素、阿莫西林、四环素等呈现出一定的耐药性。结果表明,引起稻田养殖大鳞副泥鳅出血病的病原为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),稻田养殖时可选用庆大霉素、妥布霉素进行防控。

关键词：大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus) 出血病嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) 药敏试验

黄鳝出血病病原菌的分离与鉴定

[期刊] 淡水渔业 [作者] 彭彬杨光友陈晓利占爱思何明莉

为确定四川省部分地区黄鳝(Monopterus albus)出血病病原的种类及耐药情况,从患出血病濒死的黄鳝肝脏、肾脏、脾脏等组织取样进行常规细菌学检查,对分离菌株进行形态观察、生理生化特性和16S rDNA基因分析,并进行动物回归试验及药敏试验。结果分离得到14株病原菌株,经形态特征、理化特性及16S rDNA序列分析,判定14株细菌均为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。14株病原菌株对泥鳅(Misgurnus anguillicauda-tus)、云斑(Amiurus nebulosus)和小白鼠均有较强的致病力;对萘啶酸、诺氟沙星、四环素、多西环素高度敏感;对磺胺...

关键词：黄鳝(Monopterus albus) 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) 出血病 16S rDNA

鲫鳃出血病2种病原菌的分离及鉴定

[期刊] 淡水渔业 [作者] 朱潜姚雪梅沈锋张世驰于娜高茂林

从患有鳃出血病的鲫鳃组织分离出2种革兰氏阴性杆菌,并进行形态特征及16S r RNA基因序列分析。结果显示,这2种病原菌为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)。体外溶血试验结果显示,2种菌对鱼的红细胞都有较强的溶血作用,且维氏气单胞菌的溶血速率明显高于阴沟肠杆菌。人工感染试验显示,这2种菌都具有较强的毒力,两者混合感染比单独感染致病率更高;但单独感染时阴沟肠杆菌比维氏气单胞菌引起的鳃出血症状更明显。5种常用水产药的耐药性结果表明两种菌都有一定的耐药性,但是维氏气单胞菌的耐药性更强。

关键词：鲫鳃出血病维氏气单胞菌(Aeromonas veronii) 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae) 溶血

治疗草鱼出血病的“一苦三黄”方

[期刊] 淡水渔业 [作者] 薛允连

草鱼出血病是一种由病毒引起的严重鱼病。这种病的症状是体色暗黑、微带红色、肌肉显现点状或块状血斑,严重时全身肌肉呈鲜红色。部分病鱼的口腔、下颚、头顶、眼眶周围、鳃盖、鳍条充血。有的鳃丝苍白,肠道发炎。每年5～9月,这种病在各地流行,

关键词：草鱼出血病三黄鳃丝全身肌肉体色微带鳍条鳃盖血斑水产研究所

草鱼出血病细胞培养弱毒疫苗的制备及其免疫效果

[期刊] 水产学报 [作者] 许淑英李焕林邓国成姜兰

本文报道经筛选的ＧＣＨＶ－８４１毒株在草鱼吻端成纤维细胞系（ＰＳＦ）中进行适应性培养，弱毒驯化，细胞培养弱毒疫苗的制备，安全性观察，不同稀释度和剂量的免疫保护率测定及保存试验。ＧＣＨＶ－８４１毒株在ＰＳＦ细胞中继代驯化至５３代达到减毒目的。筛选得５３～５９代作毒种制备的细胞弱毒疫苗使用安全。用稀释１０～１０４倍的疫苗，０．１～０．３毫升／尾剂量注射草鱼，其免疫保护率均在８５％以上。生产上使用疫苗的适宜浓度和剂量是稀释１０２倍和０．２毫升／尾。冻干疫苗宜保存于４℃以下。较合适的保存期是６个月（４℃）和１８个月（－２０℃）。

关键词：草鱼出血病,细胞培养,弱毒疫苗,免疫效果

草鱼出血病病毒vp6核酸疫苗的免疫效果评估

[期刊] 中国水产科学 [作者] 刘林徐诗英李婧慧邹勇倪金俤杨鸢劼曹广力薛仁宇陈辉贡成良

为了评估草鱼出血病病毒(GCRV)vp6基因核酸疫苗的免疫效果,将vp6基因克隆进pFastBacTMDual载体杆状病毒的多角体蛋白(Ph)启动子下游,同时将团头鲂(Megalobrama amblycephala)β-actin启动子控制的vp6基因克隆进杆状病毒的P10启动子下游,获核酸疫苗载体pFastBac-FA-VP6-ph-VP6。按每尾分别注射疫苗载体10、30、60μg的剂量免疫草鱼(Ctenopharyngodon idellus)(体长14～20 cm,体质量60～120 g),同设pFastBacTMDual载体(30μg/尾)阴性对照组及空白对照组(0.4 mL/尾无...

关键词：草鱼出血病病毒 vp6基因核酸疫苗免疫相对存活率

草鱼出血病病毒VP6蛋白的原核表达、纯化及免疫效果

[期刊] 水产学报 [作者] 刘林徐诗英李婧慧邹勇倪金俤杨鸢劼曹广力薛仁宇陈辉贡成良

为了探讨草鱼出血病病毒(GCRV)VP6亚单位疫苗对草鱼出血病的免疫保护作用,将vp6基因克隆进原核表达载体pET-28a(+),构建了重组质粒pET28a(+)-VP6。SDS-PAGE和Western-blotting显示,重组VP6蛋白的分子量约为43 ku,主要以包涵体形式存在,重组蛋白占菌体总蛋白的20%左右;Ni2+柱纯化后的重组蛋白,以每尾500μg肌肉注射免疫草鱼(14～20 cm,60～120 g),并在第14、21、28、49、70天通过间接凝集反应检测抗体水平,结果显示,免疫注射后第14天可检测到鱼体产生的特异性抗体,第21天达到最高峰,第70天仍可检测到抗体的存在;免疫...

关键词：草鱼出血病病毒原核表达纯化免疫

培养基更换后草鱼出血病灭活疫苗的免疫效果

[期刊] 淡水渔业 [作者] 曾令兵左文功廖来强田先文

使用廉价培养基ＣＡＳ在ＣＩＫ细胞系上增殖草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ—８５４株），所制备的灭活疫苗性能稳定，安全性好。用该疫苗免疫草鱼，饲养１０天后，其血清中和抗体水平测定结果表明，注射组为１０７．９±１１．０（３），浸泡组为６８．５±９．９（３），与对照组［２０．２３±４．５（３）］相比，Ｐ值分别为Ｐ＜０．００１和０．００１＜Ｐ＜０．０１，差异极显著。

关键词：草鱼出血病,CAS培养基,细胞灭活疫苗,免疫效果

聚六亚甲基胍对异育银鲫鳃出血病药效的初步研究

[期刊] 淡水渔业 [作者] 赵亮邹益东胡鲲杨先乐黄保华

通过PCR检测及序列对比分析,确诊江苏海丰农场两塘口内异育银鲫(Carassius auratus gibelio)所患疾病为鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirusⅡ,Cy HV-2)引发的鲫造血器官坏死症(Crucian CarpHematopoietic Necrosis),而后分别每10 d使用0.5 m L/m3和0.75 m L/m3聚六亚甲基胍(Polyhexamethylene guanide,PHMG)泼洒治疗,并定期采样,利用Real Time PCR测定样品中病毒表达

关键词：聚六亚甲基胍异育银鲫(Carassius auratus gibelio) 鲫造血器官坏死症实时荧光定量PCR 鲤疱疹病毒Ⅱ型

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